【技术实现步骤摘要】
用于过氧化物酶的超灵敏化学发光底物
本专利技术涉及一种化学发光底物，其用于在测定样品中分析物的测定中测定过氧化物酶，其中该化学发光底物允许以非常高的灵敏度进行定量的过氧化物酶检测。
技术介绍
辣根过氧化物酶(HRP)催化的鲁米诺(luminol)的化学发光氧化在抗原、抗体和核酸的分析测试中，且尤其是在印迹测试例如斑点印迹、蛋白印迹(WesternBlots)(蛋白质)、DNA印迹(SouthernBlots)和RNA印迹(NorthernBlots)(核酸)中得到广泛应用。已知通过加入电子介体或增强剂(enhancer)可以使由HRP催化的鲁米诺的化学发光氧化更快、更有效地进行，如例如由KrickaLJ(1991),ClinicalChemistry,37:1472-1481；或由KrickaLJ,VoytaJC和BronsteinI在“ChemiluminescentMethodsforDetectingandQuantitatingEnzymeActivity”(2000),MethodsEnzymol；305:...
【技术保护点】
1.一种用于增加由8-氨基-5-氯-7-苯基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4(2H,3H)-二酮、过氧化物酶或其缀合物、增强剂、共增强剂和过氧化物氧化剂的化学发光反应产生的光发射的方法，其中所述增强剂为阴离子N-烷基吩噻嗪且所述共增强剂选自4-二烷基氨基吡啶或N-唑，并且/n其中所述方法包括以下步骤：/ni.通过将8-氨基-5-氯-7-苯基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4(2H,3H)-二酮、所述增强剂、所述共增强剂和所述过氧化物氧化剂混合在一起来实现化学发光底物，以及/nii.将所述过氧化物酶或其缀合物加至所述化学发光底物。/n
【技术特征摘要】
20190122 IT 1020190000009591.一种用于增加由8-氨基-5-氯-7-苯基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4(2H,3H)-二酮、过氧化物酶或其缀合物、增强剂、共增强剂和过氧化物氧化剂的化学发光反应产生的光发射的方法，其中所述增强剂为阴离子N-烷基吩噻嗪且所述共增强剂选自4-二烷基氨基吡啶或N-唑，并且
其中所述方法包括以下步骤：
i.通过将8-氨基-5-氯-7-苯基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4(2H,3H)-二酮、所述增强剂、所述共增强剂和所述过氧化物氧化剂混合在一起来实现化学发光底物，以及
ii.将所述过氧化物酶或其缀合物加至所述化学发光底物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述阴离子N-烷基吩噻嗪选自3-(10H-吩噻嗪-10-基)丙烷-1-磺酸、4-(10H-吩噻嗪-10-基)丁烷-1-磺酸、3-(10H-吩噻嗪-10-基)丙酸和4-(10H-吩噻嗪-10-基)丁酸，及其盐。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述共增强剂选自咪唑、1-甲基咪唑、4-吗啉代吡啶(MORP)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)和4-吡咯烷基吡啶(PPY)。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述过氧化物酶选自辣根过氧化物酶、大豆过氧化物酶和甘薯过氧化物酶。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述过氧化物氧化剂选自过氧化氢、摩尔比为1∶1的尿素和过氧化氢复合物、过硼酸盐、过碳酸盐。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学发光化合物，8-氨基-5-氯-7-苯基吡啶并[3,4-d]哒嗪-1,4(2H,3H)-二酮在所述化学发光底物中的浓度包含在0.01mM和1mM之间。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述阴离子N-烷基吩噻嗪增强剂在所述化学发光底物中的浓度包含在0.1和10mM之间。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述共增强剂在所述化学发光底物中的浓度包含在0.1和100mM之间。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述过氧化物在所述化学发光底物中的浓度包含在0.1和10mM之间。
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述化学发光底物的pH包含在5.0和9.0之间。
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【专利技术属性】
技术研发人员：L·德拉·西亚纳，L·比亚吉尼，T·P·扬森，R·佩尔西亚坎特，M·瓦焦鲁，M·E·韦特拉伊诺，
申请(专利权)人：喜雅纳肯有限公司，
类型：发明
国别省市：意大利;IT
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