一种肉苁蓉苯乙醇苷及制备治疗阿尔茨海默病药物的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种肉苁蓉苯乙醇苷及制备治疗阿尔茨海默病药物的应用，属于医药技术领域。本发明专利技术通过APP/PS1双转基因小鼠AD模型探讨肉苁蓉苯乙醇苷防治阿尔茨海默病的具体作用机制，证实肉苁蓉苯乙醇苷能够通过调控通路上游及下游关键靶点，改善胰岛素信号通路转导障碍，调节脑能量代谢，以此表明肉苁蓉苯乙醇苷对阿尔茨海默病具有明显的预防和治疗作用。本发明专利技术既丰富了中药防治阿尔茨海默病研究资料，又为开发以苯乙醇苷为母核结构的肉苁蓉抗阿尔茨海默病新药奠定研究基础，适于推广与应用。

【技术实现步骤摘要】
一种肉苁蓉苯乙醇苷及制备治疗阿尔茨海默病药物的应用
本专利技术属于医药
，特别涉及一种肉苁蓉苯乙醇苷及其制备方法，以及所述肉苁蓉苯乙醇苷在制备治疗阿尔茨海默病药物中的应用。
技术介绍
阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)是一种中枢神经系统退行性疾病，目前临床上对其仍缺乏有效的根治良策。AD主要临床表现为进行性认知功能障碍和记忆损害。由于AD起病隐匿、发病率高、病程长、治疗成本高，给患者家庭和社会带来巨大伤害和经济负担。因阿尔茨海默病易诊难治，病理机制复杂，相较于化学药品中医药防治原则从整体观、多靶点出发，更适合干预具有多种病理机制的AD的治疗。近年来，胰岛素信号通路的发现，为AD的研究带来了新的启发。而胰岛素不仅存在于记忆相关的海马中，还广泛分布于脑内其它细胞和组织内，其在神经元的保护、学习记忆等高级智能活动中发挥着不可忽视的作用。因此检测胰岛素信号通路关键蛋白的表达，对AD防治中新靶标的探寻及发病机制的深入研究至关重要。虽然中药肉苁蓉具有抗氧化、抗炎、抗老防衰等多种功效，对其药理活性的研究也证实肉苁蓉苯乙醇苷表现出较好的拮抗AD潜能，但目前尚未见有通过胰岛素信号通路研究肉苁蓉苯乙醇苷对AD作用的研究报道。本专利技术通过APP/PS1双转基因小鼠AD模型探讨肉苁蓉苯乙醇苷防治AD的具体作用机制，证实肉苁蓉苯乙醇苷能够通过调控通路上游及下游关键靶点，改善胰岛素信号通路转导障碍，调节脑能量代谢，已表明肉苁蓉苯乙醇苷对AD具有明显的预防和治疗作用。
技术实现思路
r>有鉴于此，本专利技术的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种用于制备预防与治疗阿尔茨海默病药物的肉苁蓉苯乙醇苷。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种肉苁蓉苯乙醇苷，所述肉苁蓉苯乙醇苷是由肉苁蓉肉质茎提取而得，且所述肉苁蓉苯乙醇苷提取物的含量(纯度)为87.6％～94.1％。本专利技术还请求保护上述肉苁蓉苯乙醇苷的提取工艺，具体包括如下步骤：(1)将肉苁蓉肉质茎粉碎后过筛，用80％乙醇回流提取3～4次，合并滤液后减压浓缩得浸膏；(2)将步骤(1)制备的浸膏用水混悬，依次经大孔吸附树脂柱层析与H2O、30～95％乙醇梯度洗脱后，收集30～50％乙醇洗脱流份段；(3)将步骤(2)收集的乙醇洗脱流份减压浓缩并用水混悬，依次经MCI柱层析与H2O-CH3OH体系梯度洗脱后，收集30～50％的CH3OH洗脱流份段；(4)将步骤(3)收集的甲醇洗脱流份减压浓缩至稠膏状，随后用水混悬并经ODS柱层析，即得肉苁蓉苯乙醇苷。优选的，所述步骤(1)中，添加80％乙醇与肉苁蓉肉质茎的体积比为(3～4)：1。具体的，所述肉苁蓉苯乙醇苷的制备方法如下：称取适量肉苁蓉干燥肉质茎，粉碎后过筛，分别使用3～4倍量80％乙醇回流提取3～4次，合并滤液后减压浓缩得浸膏，将浸膏用适量水混悬，经过SP-825大孔吸附树脂柱层析，依次以H2O、30～95％乙醇梯度洗脱，然后合并30～50％乙醇洗脱流份段；减压浓缩得浸膏，浸膏用适量水混悬，再经MCI柱层析，以H2O-CH3OH体系梯度洗脱，收集30～50％的CH3OH洗脱流份段，最后减压浓缩至稠膏状，浸膏用适量水混悬后经ODS反复柱层析即得肉苁蓉苯乙醇苷。本专利技术还有一个目的是提供上述肉苁蓉苯乙醇苷在制备治疗阿尔茨海默病药物的应用。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种肉苁蓉苯乙醇苷在制备治疗阿尔茨海默病药物的应用，所述治疗阿尔茨海默病药物中肉苁蓉苯乙醇苷的有效剂量范围为62.5～250mg/kg/d。进一步优选的，所述治疗阿尔茨海默病药物中肉苁蓉苯乙醇苷的有效剂量范围为125～250mg/kg/d。需要说明的是，所述肉苁蓉苯乙醇苷通过调节胰岛素信号通路靶标发挥预防与治疗阿尔茨海默病的作用。其中，所述靶标包括胰岛素受体(InR)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、胰岛素受体底物(IRS)、磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)、苏氨酸蛋白激酶(AKT)。近年来，胰岛素信号通路的发现，为AD的研究带来了新的启发。胰岛素不仅存在于记忆相关的海马中，还广泛分布于脑内其它细胞和组织内，其在神经元的保护、学习记忆等高级智能活动中发挥着不可忽视的作用。AD脑内胰岛素受体(InR)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)与受体结合后诱发自身受体磷酸化，促使胰岛素受体底物(IRS)蛋白磷酸化，调节下游分子的生长和代谢，进一步使p85调节亚单位磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)而刺激葡萄糖转化，活化苏氨酸蛋白激酶(AKT)，抑制下游与凋亡相关蛋白，使神经元存活(见附图1)。由此可见，胰岛素信号通路作为体内重要的神经保护性信号通路，其主要刺激信号不但调控蛋白表达，而且其主要信号途径PI3K/AKT可调节突触可塑及参与学习记忆过程。而传统防治AD机制研究多针对于炎症、免疫、抗氧化应激等神经系统疾病经典信号通路，存在一定的局限性。AD演化发展迅速，且到目前为止发病机制尚未明确，胰岛素信号通路作为“三型糖尿病”之称的AD的热点研究通路，对其的有效研究势必对后期药物开发和防治手段的完善有着重大的现实意义。鉴于此，本专利技术通过考察肉苁蓉苯乙醇苷干预后胰岛素信号通路关键蛋白的表达情况，对AD防治体系中药物新靶标的探寻及发病机制的深入研究至关重要。经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术提供了一种肉苁蓉苯乙醇苷及制备治疗阿尔茨海默病药物的应用，具有如下优异效果：本专利技术通过APP/PS1双转基因小鼠AD模型探讨肉苁蓉苯乙醇苷防治阿尔茨海默病的具体作用机制，证实肉苁蓉苯乙醇苷能够通过调控通路关键靶标，改善胰岛素信号通路转导障碍，调节脑能量代谢，以此表明肉苁蓉苯乙醇苷对阿尔茨海默病具有明显的预防和治疗作用，为开发以苯乙醇苷为母核结构的肉苁蓉抗AD新药提供依据。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1为脑内胰岛素信号转导通路图。图2为肉苁蓉苯乙醇苷紫外光谱图。图3为肉苁蓉苯乙醇苷对AD小鼠InR、IRS-1蛋白表达结果图(其中图(a)为对AD小鼠InR蛋白表达，图(b)为对AD小鼠IRS-1蛋白表达)。图4为肉苁蓉苯乙醇苷对AD小鼠IGF-1R蛋白表达结果图。图5为肉苁蓉苯乙醇苷对AD小鼠PI3K及p-PI3K蛋白表达结果图(其中图(a)为对AD小鼠PI3K蛋白表达，图(b)为对AD小鼠p-PI3K蛋白表达)。图6为肉苁蓉苯乙醇苷对AD小鼠AKT及p-AKT蛋白表达结果图(其中图(a)为对AD小鼠AKT蛋白表达，图(b)为对AD小鼠p-AKT蛋白表达)。具体实施方式下面将结合本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肉苁蓉苯乙醇苷，其特征在于，所述肉苁蓉苯乙醇苷是由肉苁蓉肉质茎提取而得，且所述肉苁蓉苯乙醇苷提取物的含量(纯度)为87.6％～94.1％。/n

【技术特征摘要】
1.一种肉苁蓉苯乙醇苷，其特征在于，所述肉苁蓉苯乙醇苷是由肉苁蓉肉质茎提取而得，且所述肉苁蓉苯乙醇苷提取物的含量(纯度)为87.6％～94.1％。


2.一种如权利要求1所述的肉苁蓉苯乙醇苷的提取工艺，其特征在于，具体包括如下步骤：
(1)将肉苁蓉肉质茎粉碎后过筛，用80％乙醇回流提取3～4次，合并滤液后减压浓缩得浸膏；
(2)将步骤(1)制备的浸膏用水混悬，依次经大孔吸附树脂柱层析与H2O、30～95％乙醇梯度洗脱后，收集30～50％乙醇洗脱流份段；
(3)将步骤(2)收集的乙醇洗脱流份减压浓缩并用水混悬，依次经MCI柱层析与H2O-CH3OH体系梯度洗脱后，收集30～50％的CH3OH洗脱流份段；
(4)将步骤(3)收集的甲醇洗脱流份减压浓缩至稠膏状，随后用水混悬并经ODS柱层析，即得肉苁蓉苯乙醇苷。


3.根据权利要求2所述的一种肉苁蓉苯乙醇苷的提取工艺，其特征在于，所述步骤(1)中，添加80％乙醇与...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨建华，胡君萍，居博伟，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：新疆;65