一种病理组织切片的制作方法技术

本发明专利技术公开了一种病理组织切片的制作方法，包括以下步骤：活体取材、组织固定、组织洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烘片、脱蜡、渗水、水洗、染色等辅助操作，提高了组织切片的制作质量及后期病理实验结果的准确性。如在浸蜡、包埋步骤中：先将石蜡块在50‑60℃温度下熬制2‑3h，能极大地避免石蜡固定后有气泡的问题，提高组织切片的成品率；通过将切片机改进为自动传输组织切片的方式，取消了用镊子和毛笔类的工具将切片组织进行转送的步骤，减少组织切片的污染，提高后期实验准确度，同时使得切片机可以连续切片，提高整体制作的效率。

【技术实现步骤摘要】
一种病理组织切片的制作方法
本专利技术涉及病理学
，尤其涉及一种病理组织切片的制作方法。
技术介绍
病理切片是病理标本的一种，病理切片是取一定大小的实验动物或病变组织，用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里，用切片机切成薄片，再用苏木精－伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变，病变的发生发展过程，最后作出病理诊断。病理切片是通过观察细胞等级的病理组织结构，而病理组织制作过程中步骤繁多，且切片厚度极小，因此对组织的制作及切片的制作质量要求高。目前病理组织制作过程中主要存在的问题是通过蜡块包埋后，蜡块中有气泡，存在较多不合格的切片，影响组织切片质量，降低了切片的成品率；另一方面，通过常规切片机切片后，操作人员用镊子和毛笔类的工具将切片组织进行转送，这种方式很容易对切片组织形成污染，影响后期实验结果，同时，该种方法需要对切片机不断地开机、停机，降低了切片的效率。
技术实现思路
针对上述存在的问题，本专利技术旨在提供一种病理组织切片的制作方法，包括以下步骤：活体取材、组织固定、组织洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烘片、脱蜡、渗水、水洗、染色等辅助操作，提高了组织切片的制作质量及后期病理实验结果的准确性，并且通过对切片机的改进，提高了病理切片切片效率和切片质量。为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案如下：一种病理组织切片的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：a、活体取材：选取实验动物或手术切除后的病变组织，常规消毒后，得到离体组织；b、组织固定：将离体组织完全浸泡在10％中性甲醛溶液中24h；c、组织洗涤：用纯水将固定后组织上的甲醛溶液清洗1-2h；d、脱水：将洗涤后的组织依次于80％乙醇1.5-2h、95％乙醇1-1.5h、100％乙醇0.5-1h中脱水处理；e、透明：将脱水后的组织依次在二甲苯Ⅰ中浸入0.5-1h、二甲苯Ⅱ中浸入0.3-0.5h进行透明处理；f、浸蜡、包埋：先将石蜡块在50-60℃温度下熬制2-3h，将熬制后的石蜡和透明后的组织一起放入55-60℃电热恒温箱中2-2.5h浸蜡，包埋得到病理蜡块；g、切片：将病理蜡块通过切片机进行切片操作，切片厚度为2-4um；所述切片机包括斜面刀座和辅助装置，所述斜面刀座顶部设有刀片，斜面刀座的斜面上设有传输装置，所述刀片底端延伸到传输装置表面，所述斜面刀座底部设有水浴盒，所述传输装置底端延伸到水浴盒的溶液中，切片后的病理组织通过传输装置直接浸入到40-45℃水浴盒中；h、贴片、烘片选取水浴盒中完整的组织切片在载玻片上进行贴片，切完片后放入60-65℃恒温箱中3-5h至干燥；i、脱蜡将干燥后的切片依次在二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ溶液中各进行0.2-0.3h的脱蜡处理；j、渗水、水洗将脱蜡后的切片依次于无水乙醇、95％乙醇、80％乙醇中浸泡2-3min后，用纯水水洗后放置无水滴状态；k、染色将水洗后的切片根据常规方法进行染色，染完色后进行封片备用。优选的，在步骤g中，所述传输装置包括设置在斜面刀座斜面上的上辊轮和下辊轮，所述上辊轮和下辊轮上套设有传输带，所述上辊轮一侧设有微型电机。优选的，所述下辊轮上靠近斜面刀座一侧设有清理装置，所述清理装置与传输带表面相抵。优选的，所述清理装置上设有橡胶刮片，所述橡胶刮片与传输带表面接触。优选的，在步骤k中染色时长为8-10min。本专利技术的有益效果是：(1)通过本专利技术完整的制作步骤，提高了组织切片的制作质量及后期病理实验结果的准确性。(2)在浸蜡、包埋步骤中：先将石蜡块在50-60℃温度下熬制2-3h，能极大地避免石蜡固定后有气泡的问题，提高组织切片的成品率。(3)通过对切片机的改进，取消了用镊子和毛笔类的工具将切片组织进行转送的步骤，减少组织切片的污染，提高后期实验准确度，同时使得切片机可以连续切片，提高整体制作的效率。附图说明图1为本专利技术切片机立体结构示意图。图2为本专利技术斜面刀座与水浴盒左视结构图。图3为本专利技术图2A处放大图。图4为本专利技术图2B处放大图。具体实施方式为了使本领域的普通技术人员能更好的理解本专利技术的技术方案，下面结合附图1-4和实施例一至三对本专利技术的技术方案做进一步的描述。实施例一一种病理组织切片的制作方法，包括以下步骤：a、活体取材：选取实验动物或手术切除后的病变组织，常规消毒后，得到离体组织，将离体组织修整为10×10×3mm规格；b、组织固定：将修整后的离体组织贴附在纸板上，然后整体完全浸泡在10％中性甲醛溶液中24h；c、组织洗涤：用纯水将固定后组织上的甲醛溶液清洗1.5h；d、脱水：将洗涤后的组织依次于80％乙醇中1.5h、95％乙醇中1h、100％乙醇中0.5h中脱水，将组织中的水分去除，由于水与石蜡不能互溶，影响后期包埋质量，因此通过梯度乙醇脱水，能提高组织后期包埋质量；e、透明：将脱水后的组织依次在二甲苯Ⅰ中浸入0.5h、二甲苯Ⅱ中浸入0.3h进行透明处理，该步骤的作用是：由于脱水用的梯度乙醇均与后期包埋的石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后要经过二甲苯过渡，当组织中含有二甲苯时，光线可以透过，组织会呈现出不同程度的透明状态，提高了透明的多样性及透明质量；f、浸蜡、包埋：先将石蜡块在50℃温度下熬制2h，能最大化的消除组织切片通过石蜡固定后有气泡，影响后续切片质量，将熬制后的石蜡和透明后的组织一起放入55℃电热恒温箱中进行2h浸蜡，然后立即投入冷水中包埋得到病理蜡块，放入冰箱中冷藏保存；g、切片：将病理蜡块通过切片机1进行切片操作，切片厚度为2um；进一步的改进在于：所述切片机1包括斜面刀座2和辅助装置，所述斜面刀座2顶部设有刀片21，斜面刀座2的斜面上设有传输装置3，所述刀片21底端延伸到传输装置3表面，所述斜面刀座2底部设有水浴盒4，所述传输装置3底端延伸到水浴盒4的溶液中，切片后的病理组织通过传输装置3直接浸入到40℃水浴盒4中；切片时，将刀片21切下的组织切片，通过传输装置3传输到水浴盒4中，减少了目前需要通过用镊子和毛笔类的工具，将组织切片进行转送的步骤，减少组织切片的污染，提高后期实验准确度，同时使得切片机1可以连续切片，提高整体制作的效率；传输装置3底端延伸到水浴盒4的溶液中，防止组织切片粘连在传输装置3，便于组织切片与传输装置3的分离，提高了刀座整体工作的连贯性；进一步为了便于组织切片的传输：所述传输装置3包括设置在斜面刀座2斜面上的上辊轮31和下辊轮32，所述上辊轮31和下辊轮32上套设有传输带33，所述上辊轮31一侧设有微型电机34，工作时，启动微型电机34，带动上辊轮31、传输带33和下辊轮32转动，刀片21切下的组织切片沿传输带33输送到水浴盒4的溶液中，简单快捷，切片工作稳定；进一步为了便于将传本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种病理组织切片的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：/na、活体取材：选取实验动物或手术切除后的病变组织，常规消毒后，得到离体组织；/nb、组织固定：将离体组织完全浸泡在10％中性甲醛溶液中24h；/nc、组织洗涤：用纯水将固定后组织上的甲醛溶液清洗1-2h；/nd、脱水：将洗涤后的组织依次于80％乙醇1.5-2h、95％乙醇1-1.5h、100％乙醇0.5-1h中脱水处理；/ne、透明：将脱水后的组织依次在二甲苯Ⅰ中浸入0.5-1h、二甲苯Ⅱ中浸入0.3-0.5h进行透明处理；/nf、浸蜡、包埋：先将石蜡块在50-60℃温度下熬制2-3h，将熬制后的石蜡和透明后的组织一起放入55-60℃电热恒温箱中2-2.5h浸蜡，包埋得到病理蜡块；/ng、切片：将病理蜡块通过切片机(1)进行切片操作，切片厚度为2-4um；/n所述切片机(1)包括斜面刀座(2)和辅助装置，所述斜面刀座(2)顶部设有刀片(21)，斜面刀座(2)的斜面上设有传输装置(3)，所述刀片(21)底端延伸到传输装置(3)表面，所述斜面刀座(2)底部设有水浴盒(4)，所述传输装置(3)底端延伸到水浴盒(4)的溶液中，切片后的病理组织通过传输装置(3)直接浸入到40-45℃水浴盒(4)中；/nh、贴片、烘片/n选取水浴盒(4)中完整的组织切片在载玻片上进行贴片，切完片后放入60-65℃恒温箱中3-5h至干燥；/ni、脱蜡/n将干燥后的切片依次在二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ溶液中各进行0.2-0.3h的脱蜡处理；/nj、渗水、水洗/n将脱蜡后的切片依次于无水乙醇、95％乙醇、80％乙醇中浸泡2-3min后，用纯水水洗后放置无水滴状态；/nk、染色/n将水洗后的切片根据常规方法进行染色，染完色后进行封片备用。/n...

【技术特征摘要】
1.一种病理组织切片的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、活体取材：选取实验动物或手术切除后的病变组织，常规消毒后，得到离体组织；
b、组织固定：将离体组织完全浸泡在10％中性甲醛溶液中24h；
c、组织洗涤：用纯水将固定后组织上的甲醛溶液清洗1-2h；
d、脱水：将洗涤后的组织依次于80％乙醇1.5-2h、95％乙醇1-1.5h、100％乙醇0.5-1h中脱水处理；
e、透明：将脱水后的组织依次在二甲苯Ⅰ中浸入0.5-1h、二甲苯Ⅱ中浸入0.3-0.5h进行透明处理；
f、浸蜡、包埋：先将石蜡块在50-60℃温度下熬制2-3h，将熬制后的石蜡和透明后的组织一起放入55-60℃电热恒温箱中2-2.5h浸蜡，包埋得到病理蜡块；
g、切片：将病理蜡块通过切片机(1)进行切片操作，切片厚度为2-4um；
所述切片机(1)包括斜面刀座(2)和辅助装置，所述斜面刀座(2)顶部设有刀片(21)，斜面刀座(2)的斜面上设有传输装置(3)，所述刀片(21)底端延伸到传输装置(3)表面，所述斜面刀座(2)底部设有水浴盒(4)，所述传输装置(3)底端延伸到水浴盒(4)的溶液中，切片后的病理组织通过传输装置(3)直接浸入到40-45℃水浴盒(4)中；
h、贴片、烘片
选取水浴盒(4)中完整的组织切片...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔北辰，王莉娟，杨娟，
申请(专利权)人：宝鸡职业技术学院，
类型：发明
国别省市：陕西;61