一种用于检测犬细小病毒的LAMP引物组、荧光可视化快速试剂盒及方法技术

本发明专利技术提供了一种用于检测犬细小病毒的LAMP引物组及其荧光可视化快速检测试剂盒及检测方法。本发明专利技术的试剂盒中包含了针对犬细小病毒设计的引物组，所述引物组合中包含了一对外引物、一对内引物和一条环引物。利用本发明专利技术制备的荧光可视化快速检测试剂盒可实现对犬细小病毒的高灵敏度和高特异性检测，检测最低为10copies，同时操作简便，成本较低，设备适用范围广，适于在疫病发生时现场快速诊断疫病，及时治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测犬细小病毒的LAMP引物组、荧光可视化快速试剂盒及方法
本专利技术涉及微生物检测
，具体涉及用于检测犬细小病毒的LAMP引物组、荧光可视化快速试剂盒及检测方法。
技术介绍
犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)引起的犬的一种具有高度接触性传染的烈性传染病。临床以感染性腹泻症状、急性出血性胃肠炎、急性心肌炎和高死亡率为特征。犬细小病毒属于细小病毒科细小病毒属，无囊膜的单链DNA病毒结构。基因组全长为5323bp，含有两个主要的开放阅读框(Openreadingframes,ORFS)ORF1和ORF2，编码的蛋白包括非结构蛋白NS1和NS2，结构蛋白VP1和VP2。自1970年首次报道在狗体内发现CPV以来，CPV不断出现抗原变异类型，包括CPV-2a，CPV-2b，CPV-2c等。不同年龄阶段的犬均可以感染CPV，幼犬的感染几率最高，死亡率高达70％以上，对养犬业具有巨大的危害，因此临床上急需一种能够快速检测CPV的方法。传统的CPV检测方法主要包括病毒的分离鉴定、聚合酶链式反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测犬细小病毒的LAMP引物组，其特征在于，其包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、外引物BIP和一条环引物LB；其中，所述外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述内引物FIP的核苷酸序列如SEQID NO.3所示的，所述内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述环引物LB的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测犬细小病毒的LAMP引物组，其特征在于，其包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、外引物BIP和一条环引物LB；其中，所述外引物F3的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述外引物B3的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述内引物FIP的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的，所述内引物BIP的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示，所述环引物LB的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。


2.权利要求1所述的引物组在制备检测犬细小病毒的LAMP试剂盒中的应用。


3.一种用于检测犬细小病毒的LAMP试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物组。


4.一种用于检测犬细小病毒的荧光可视化快速试剂盒，其特征在于，其包括LAMP预混液、BstDNA聚合酶溶液和荧光目视检测试剂，所述LAMP预混液含10×Thermopolbuffer、MgSO4、甜菜碱、dNTPs、如权利要求1所述的引物组。


5.根据权利要求4所述的荧光可视化快速试剂盒，其特征在于，所述荧光目视检测试剂为含6mmol/LMnCl2和0.4mmol/L钙黄绿素的溶液。


6.根据权利要求4所述的荧光可视化快速试剂盒，其特征在于，还包括样品快速处理试剂，所述样品快速处理试剂包括DNAExtractSolutionA和DNAExtractSolutionB，所述DNAExtractSolutionA中含有质量百分比为2.5％的聚乙二醇，3mg/mL的蛋白酶K，0.1％Triton-X100，所述DNAExtractSolutionB含有3mmol/LEDTA，1.5mmol/LTtis-HCl，质量百分比为0.25％的海藻糖。


7.根据权利要求4所述的荧光可视化快速试剂盒，其特征在于，还包括阴性质控标准品和阳性质控标准品，所述阳性质...

【专利技术属性】
技术研发人员：王林，张玮，孙丹，杜鹃，李蕊，王培，程敏姮，韦海涛，宋彦军，周德刚，刘晓冬，
申请(专利权)人：北京市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：北京;11