一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法技术

本发明专利技术属于转基因大豆生态安全评估领域，具体涉及一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，统计测定野生大豆、杂交或回交后代整个生活史周期中最能够反映生存能力和繁殖能力的性状，包括营养期4个性状和生殖期8个性状，最后利用总适合度可以明确得到转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度高低。本发明专利技术解决了目前没有评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度方法的问题。对科学评估转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度具有重要作用，适合度的评估是安全释放转基因大豆的重要环节，根据转基因大豆基因漂移到野生大豆后对野生大豆适合度的影响提前做好基因漂移的防范工作。

【技术实现步骤摘要】
一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法
本专利技术涉及一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，属于转基因大豆生态安全评估领域。
技术介绍
自1996年世界首例转基因作物(转基因耐储藏番茄)商品化种植以来，转基因生物技术以及转基因产品的研究和应用得到极大发展，2019年12月30日，农业农村部科技教育司公式了拟批准颁发农业转基因生物安全证书目录，其中就包含了抗草甘膦转基因大豆品种SHZD32-01。转基因生物技术的迅速发展以及转基因作物在全球的商品化应用，为提高农作物产量、减少资源的投入和降低劳动成本提供了一种新的选择，也为世界粮食安全的保障提供了新的机遇。至2018年，转基因作物的种植面积增至1.917亿公顷。在所有转基因作物中转基因大豆(Glycinemax)的种植面积最大，2018年达到0.959亿公顷，占全球转基因作物种植面积的50％。近年来，中国大豆进口量持续增长，到2017年已达9553万吨，随着转基因大豆的进口，在运输、加工等环节可能会造成转基因大豆的散落并长成植株，而转基因大豆的花粉可能会漂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，所述方法包括：/n对转基因大豆与野生大豆分批种植，使二者的花期相遇；通过人工杂交方式获得转基因大豆与野生大豆的杂交后代或回交后代，再通过杂交后代或回交后代的自交获得更多世代的试验材料；/n开展杂交后代或回交后代与其亲本的同质园种植比较试验；/n测定并计算试验材料的各适合度性状，得到试验材料适合度性状的相对适合度，以及各供试材料的总适合度；/n适合度性状的相对适合度计算方法：以野生大豆为比较的标准“1”，相应杂交或回交后代的各适合度性状与野生大豆的该适合度性状之比为相对适合度值，总适合度值是其各适合度性状的相对适合度值的平均...

【技术特征摘要】
1.一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，所述方法包括：
对转基因大豆与野生大豆分批种植，使二者的花期相遇；通过人工杂交方式获得转基因大豆与野生大豆的杂交后代或回交后代，再通过杂交后代或回交后代的自交获得更多世代的试验材料；
开展杂交后代或回交后代与其亲本的同质园种植比较试验；
测定并计算试验材料的各适合度性状，得到试验材料适合度性状的相对适合度，以及各供试材料的总适合度；
适合度性状的相对适合度计算方法：以野生大豆为比较的标准“1”，相应杂交或回交后代的各适合度性状与野生大豆的该适合度性状之比为相对适合度值，总适合度值是其各适合度性状的相对适合度值的平均数。


2.根据权利要求1所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，所述适合度性状包括出苗率、子叶真叶大小、株高、地上部干生物量、花器大小、花粉活力、单株结荚数、单株饱粒种子数、结实率、百粒重、种子落粒率、种子活力持续能力。


3.根据权利要求2所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，杂交或回交后代在移栽到盆钵前需要进行分子鉴定，移栽携带抗性基因的植株；分子鉴定步骤为：以野生大豆为阴性对照，转基因大豆为阳性对照，提取杂交后代植株的总DNA，采用PCR后进行琼脂糖凝胶电泳的方法，检测转基因大豆与野大豆的杂交或回交后代中转基因是否存在。


4.根据权利要求2所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，适合度性状的调查方法为：
出苗率：将幼苗真叶展开视为出苗，统计播种材料苗期出苗数，出苗率＝出苗数/播种种子数×100％；
子叶真叶大小：第一片复叶未展开时期，利用游标卡尺测量子叶的长度宽度、真叶的长度宽度，子叶真叶大小值为子叶长×宽+真叶长×宽；
株高：第三个三出复叶期利用直尺测量植株顶端到根茎处的高度；
地上部干生物量：成熟后收获植株地上部晒干并称重；
花器大小：在植株盛花期，随机选取单株上不少于50朵完全盛开的花朵，测量萼片长度、翼瓣长度、龙骨瓣长度、花瓣外露长度、沟槽长度，花器大小为五个数值之和；
花粉活力：花粉置于培养基开始后100min时测量有活力的花粉数目；花粉活力＝已萌发的花粉粒数/总花粉粒数；
单株饱粒种子数：统计植株单株饱满种子总数量；
结实率：统计每个荚内的种子粒数和饱满种子粒数，结实率＝每荚饱粒数/每荚总粒数；
百粒重：称量100粒饱满种子的重量；
种子落粒率：统计植株生理成熟(植株上50％的荚其颜色转变为黑褐色)后10d内的落粒种子数，再根据单株种子数计算种子落粒率。种子落粒率＝落粒种子数/单株种子数；
种子活力持续能力：将收获的种子进行土壤埋藏试验，每隔3个月对埋藏种子进行取样，不少于8次，每次取样后对埋藏种子进行种子萌发试验，计算活力指数，活力指数Vi＝Gi×St；Gi：发芽指数；St：发芽t天后幼苗的鲜重，发芽指数Gi＝∑(Gt/Dt)；Gt：在t日内的发芽数；Dt：发芽日数；比较同一取样时间点野生大豆与其杂交或回交后代活力指数的差值，当二者出现最大差值时，此时二者的活力指数作为总适合度的计算指标。


5.根据权利要求1所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，杂交后代或回交后代与其亲本的同质园种植比较试验分为单种农田土、单种荒地土、混种农田土、混种荒地土四个种植条件；
单种时：先利用刀片划破野生大豆种子及其杂交或回交后代种子的硬实表皮，处理程度应当划破种皮但不伤及种胚，然后播种于底部打孔的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋小玲，强胜，盛泽文，刘金悦，胡玉琪，刘琪，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32