一种椴树种子快速萌发方法技术

本发明专利技术涉及一种椴树种子快速萌发方法，属于林木遗传育种技术领域。本发明专利技术所述萌发方法包括以下步骤：1)将椴树种子在90～100℃下处理2～10s，在24～26℃的水中浸泡24～48h；2)将吸涨的种子在脱落酸受体抑制剂中进行第一暗培养；3)将第一暗培养的椴树种子进行第二暗培养；4)将第二暗培养的种子转移至基质中进行培养。本发明专利技术所述萌发方法可低成本、快速、高效完成椴树种子的萌发，将为椴树种质资源保存以及优良新品种选育提供强有力的技术支持。

【技术实现步骤摘要】
一种椴树种子快速萌发方法
本专利技术涉及林木遗传育种
，具体涉及一种椴树种子快速萌发方法。
技术介绍
椴树(Tiliatuan)树形优美，叶大荫浓，花香馥郁，寿龄较长，病虫害少，具有烟尘吸附能力，对有害气体抗性强，是世界著名的行道树树种。椴树叶秋季金黄色，赏叶期长，可用于城市秋季景观建设。椴树材质细软，不易变形，是优质的胶合板材原料。此外，椴树花可产生大量花蜜，是我国重要的蜜源植物，其花和苞片在欧洲是花茶制作和芳香油提取的原料。由于椴树自身经济价值高，我国椴树野生种质资源尚未得到有效的保护，目前处于濒危状态，是国家二级保护植物，是作为未来生态园林建设中应用潜力较大的珍贵树种。但是椴树种子具有深度休眠特性，休眠期可长达2-3年。因此，如何快速有效打破椴树种子休眠是椴树种质资源保护和新品种培育的重要的环节。根据已有的研究表明，椴树种子萌发的抑制物主要为脱落酸(ABA)。目前主要采用的萌发方法是变温层积法。主要步骤包括①通过去除果皮后，开水处理2秒，室温浸泡24小时，②分别用赤霉素(0.2mg/ml)和细胞分裂素(0.2mg/ml)浸泡24小时。③15～20℃层积5天(细沙浇透，种沙比1:3，定期翻动)；④0～5℃层积15天(定期翻动种子)；⑤处理结束，将种子拨入穴盘。种子催芽处理过程时间为23天，发芽率约40％，种子萌发时间跨度为约35天。变温层积法处理繁琐，不易掌握，种子萌发率低且整齐度差。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种椴树种子快速萌发方法。本专利技术所述萌发方法能够解决目前椴树种子休眠时间长、出苗率低、种子萌发不整齐等繁育技术问题。本专利技术提供了一种椴树种子快速萌发方法，包括以下步骤：1)将去除果皮的椴树种子在90～100℃下处理2～10s，在24～26℃的水中浸泡24～48h，得到吸涨的种子；2)将步骤1)得到的吸涨的种子在脱落酸受体抑制剂中进行第一暗培养，得到第一暗培养的种子；所述第一暗培养的温度为20～22℃，时间为4d；3)将步骤2)得到的第一暗培养的椴树种子转移至0～5℃下进行第二暗培养，得到第二暗培养的种子；所述第二暗培养的时间为3d；4)将步骤3)得到的第二暗培养的种子转移至基质中进行培养。优选的是，步骤1)所述水包括无菌水。优选的是，步骤2)所述脱落酸受体抑制剂包括ARA，所述ARA的结构如式I所示：优选的是，所述ARA溶于水使用，所述ARA在水中的摩尔浓度为0.4μM。优选的是，步骤2)中，所述吸涨的种子在浸润脱落酸受体抑制剂的吸水纸上进行第一暗培养。优选的是，所述吸水纸置于培养皿中。优选的是，所述吸涨的种子为种皮撑破的椴树种子。优选的是，步骤4)所述基质含质量比为1:1:1的珍珠岩、蛭石和草炭。优选的是，步骤4)所述基质置于穴盘中。本专利技术还提供了上述技术方案所述的萌发方法在椴树育种中的应用。本专利技术提供了一种椴树种子快速萌发方法。本专利技术所述萌发方法能够迅速打破椴树种子深度休眠，促进种子萌发。本专利技术所述方法可低成本、快速、高效完成椴树种子的催芽，将为椴树种质资源保存以及优良新品种选育提供强有力的技术支持。附图说明图1为本专利技术提供的椴树种子快速萌发方法流程图；图2为本专利技术提供的不同萌发方法处理下紫椴种子萌发情况图。具体实施方式本专利技术提供了一种椴树种子快速萌发方法，包括以下步骤：1)将去除果皮的椴树种子在90～100℃下处理2～10s，在24～26℃的水中浸泡24～48h，得到吸涨的种子；2)将步骤1)得到的吸涨的种子在脱落酸受体抑制剂中进行第一暗培养，得到第一暗培养的种子；所述第一暗培养的温度为20～22℃，时间为4d。3)将步骤2)得到的第一暗培养的椴树种子转移至0～5℃下进行第二暗培养，得到第二暗培养的种子；所述第二暗培养的时间为3d；4)将步骤3)得到的第二暗培养的种子转移至基质中进行培养。本专利技术将去除果皮的椴树种子在90～100℃下处理2～10s，在24～26℃的水中浸泡24～48h，得到吸涨的种子。本专利技术所述果皮优选采用机械方法去除，由于椴树果皮、种皮等组织中均含有大量ABA，因此选择机械去除的方法，先将果皮进行去除，减少ABA的来源。在本专利技术中，所述水优选包括无菌水。本专利技术优选在100℃下进行处理，本专利技术所述100℃下处理优选为用100℃的开水进行处理。本专利技术优选选择100℃开水处理2～10s，更优选为10s，有助于减弱种皮中的高含量ABA对种子萌发的抑制作用。并且结合24～26℃，更优选25℃的无菌水浸泡，促进种子迅速开始吸涨作用。在本专利技术中，所述吸涨的种子为种皮撑破的椴树种子，将种皮涨破后，有助于与ABA受体抑制剂(ARA)接触，充分发挥其对ABA的解抑制作用。得到吸涨的种子后，本专利技术将吸涨的种子在脱落酸受体抑制剂中进行第一暗培养，得到第一暗培养的种子；所述第一暗培养的温度为20～22℃，优选为20℃，时间为4d。在本专利技术中，所述脱落酸受体抑制剂优选包括ARA，所述ARA的结构如式I所示：对单双子叶植物ABA受体均具有广谱抑制作用。本专利技术对所述的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的常规脱落酸受体抑制剂ARA常规市售产品即可，如美国LifeChemical公司生产的ARA，化学结构式为C18H23N5OS2。在本专利技术中，所述ARA优选溶于水使用，所述ARA在水中的摩尔浓度优选为0.4μM。本专利技术通过利用ABA受体抑制剂(ARA)可达到迅速解除ABA抑制种子萌发的作用。在本专利技术中，所述吸涨的种子优选在浸润脱落酸受体抑制剂的吸水纸上进行第一暗培养。在本专利技术中，所述吸水纸优选置于培养皿中。为保证种子促萌过程中，不受细菌污染，要求本步骤所用溶剂、吸水纸、培养皿等都为灭菌后，在超净工作台无菌状态下使用。得到第一暗培养的种子后，本专利技术将第一暗培养的椴树种子转移至0～5℃下，更优选为4℃下进行第二暗培养，得到第二暗培养的种子；所述第二暗培养的时间为3d。得到第二暗培养的种子后，本专利技术将第二暗培养的种子转移至基质中进行培养。在本专利技术中，所述基质含质量比为1:1:1的珍珠岩、蛭石和草炭。在本专利技术中，所述基质置于穴盘中。将种子拨入穴盘后，本专利技术优选统计出苗率和萌发整齐程度。本专利技术通过上述优化脱落酸受体抑制剂使用浓度与处理时间后，在椴树种子催芽处理过程中，可以显著缩短种子萌发时间，提高发芽率以及萌发整齐程度。如图1所示，本专利技术实施例中椴树的种子快速萌发方法具体包括以下步骤：待测样本为野外采集的紫椴风干种子。利用碾压的方式，将紫椴种子果皮去除。将种子放入100℃开水中，处理10s。随后转入25℃无菌水浸泡24h。配制0.4μMABA受体抑制剂(ARA)无菌溶液，将培养皿内的吸水纸浸润。随后将发生吸涨作用的椴树种子转移至培养皿中。环境温度选择为20℃，暗培养，4d。后转入4℃环境，暗培养，3d。最终，将种子转移入穴盘中，穴盘培养基比本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种椴树种子快速萌发方法，包括以下步骤：/n1)将去除果皮的椴树种子在90～100℃下处理2～10s，在24～26℃的水中浸泡24～48h，得到吸涨的种子；/n2)将步骤1)得到的吸涨的种子在脱落酸受体抑制剂中进行第一暗培养，得到第一暗培养的种子；所述第一暗培养的温度为20～22℃，时间为4d；/n3)将步骤2)得到的第一暗培养的椴树种子转移至0～5℃下进行第二暗培养，得到第二暗培养的种子；所述第二暗培养的时间为3d；/n4)将步骤3)得到的第二暗培养的种子转移至基质中进行培养。/n

【技术特征摘要】
1.一种椴树种子快速萌发方法，包括以下步骤：
1)将去除果皮的椴树种子在90～100℃下处理2～10s，在24～26℃的水中浸泡24～48h，得到吸涨的种子；
2)将步骤1)得到的吸涨的种子在脱落酸受体抑制剂中进行第一暗培养，得到第一暗培养的种子；所述第一暗培养的温度为20～22℃，时间为4d；
3)将步骤2)得到的第一暗培养的椴树种子转移至0～5℃下进行第二暗培养，得到第二暗培养的种子；所述第二暗培养的时间为3d；
4)将步骤3)得到的第二暗培养的种子转移至基质中进行培养。


2.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，步骤1)所述水包括无菌水。


3.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，步骤2)所述脱落酸受体抑制剂包括ARA，所述ARA的结构如式I所示：

【专利技术属性】
技术研发人员：宋跃朋，刘鹏，陈盼飞，张德强，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11