【技术实现步骤摘要】
一种GPC-3抗体包被磁珠及其制备方法、试剂盒
本专利技术属于生物
,具体为一种GPC-3抗体包被磁珠及其制备方法、试剂盒。
技术介绍
Glypican-3(GPC-3)是Glypican家族中的一员,属于膜性硫酸乙酰肝素多糖蛋白。在哺乳动物的胚胎期,GPC-3通过影响多个分子信号通路而对组织器官的发育起到重要的调控作用,其功能缺失将导致过度生长和畸变综合征(SGBS)。成人GPC-3的异常表达与多种肿瘤的发生发展关系密切。GPC-3在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中表达上调,与HCC的生物学特性相关,在肝癌的早期诊断、生物治疗和预后评估中具有良好的应用前景。肝细胞癌简称肝癌,是全球最常见的恶性肿瘤之一。根据世界卫生组织报告显示,我国肝癌的发病率为25.7/10万,居全球之首,每年新发和死亡患者占全球总数的一半。尽管HCC的治疗水平有了极大提高,但死亡率并无明显改善,5年以上生存率仅为10%左右,其主要原因是肝癌起病隐匿,早期没有症状或症状不明显,又缺乏有效的早期诊断手段,患 ...
【技术保护点】
1.一种GPC-3抗体包被磁珠的制备方法,其特征在于,包括:/n将GPC-3抗体配制为质量浓度为8-12mg/mL的溶液,获得GPC-3抗体溶液;/n将粒径为1.5-2.0um与2.0-3.0um的磁性微球按质量比1:3-1:5混合,获得磁珠溶液;/n将第一缓冲液与所述磁珠溶液按体积比1:1-1:2混合,获得第一混合溶液;/n将所述GPC-3抗体溶液与所述第一混合溶液按体积比1:2-1:3混合,并回旋振荡15-30min,获得第二混合溶液;/n将所述活化剂与所述第二混合溶液按体积比1:3-1:4混合,并回旋振荡1-2h,获得第三混合溶液;/n将封闭液与所述第三混合溶液按体积 ...
【技术特征摘要】
1.一种GPC-3抗体包被磁珠的制备方法,其特征在于,包括:
将GPC-3抗体配制为质量浓度为8-12mg/mL的溶液,获得GPC-3抗体溶液;
将粒径为1.5-2.0um与2.0-3.0um的磁性微球按质量比1:3-1:5混合,获得磁珠溶液;
将第一缓冲液与所述磁珠溶液按体积比1:1-1:2混合,获得第一混合溶液;
将所述GPC-3抗体溶液与所述第一混合溶液按体积比1:2-1:3混合,并回旋振荡15-30min,获得第二混合溶液;
将所述活化剂与所述第二混合溶液按体积比1:3-1:4混合,并回旋振荡1-2h,获得第三混合溶液;
将封闭液与所述第三混合溶液按体积比1:4-1:5混合,并回旋振荡15-30min,获得第四混合溶液;
将所述第四混合溶液进行离心处理,离心处理后去除上清液,获得GPC-3抗体包被磁珠。
2.根据权利要求1所述的一种GPC-3抗体包被磁珠的制备方法,其特征在于,所述第一缓冲液包括如下一种:磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、醇醚磺基琥珀酸单酯二钠盐MES缓冲溶液、磷酸盐缓冲液、Tris–盐酸缓冲液,优选地,所述封闭液包括如下至少一种:PEG20000、BSA、酪蛋白。
3.根据权利要求1所述的一种GPC-3抗体包被磁珠的制备方法,其特征在于,所述活化剂为质量浓度5-20mg/mL的碳二亚胺溶液EDAC。
4.根据权利要求1所述的一种GPC-3抗体包被磁珠的制备方法,其特征在于,所述将所述第四混合溶液进行离心处理,离心处理后去除上清液,获得GPC-3抗体包被磁珠,包括:
将所述第四混合溶液在转速为12000-16000rpm条件下离心处理10-30min,离心处理后去除上清液;
用第二缓冲液重悬去除上清液后的第四混合溶液;
重复所述离心处理和所述重悬2-3次,以去除GPC-3抗体包被磁珠中的杂质,获得GPC-3抗体包被磁珠。
5.一种GPC-3抗体包被磁珠,其特征在于,由如权利要求1-4任一项所述的一种GPC-3抗体包被磁珠的制备方法制备得到。
6.一种GPC-3抗体包被磁珠试剂盒,其特征在于,包括如权利要求5所述的一种GPC-3抗体包被磁珠,其中,将所述GPC-3抗体包被磁珠与防凝液混合,以减...
【专利技术属性】
技术研发人员:华权高,甘华铭,舒芹,来祥兵,郭静,张雪娇,赵愿安,
申请(专利权)人:武汉生之源生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:湖北;42
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