一种嗜热好望角放线菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种嗜热好望角放线菌及其应用，属于微生物技术领域。所述嗜性放线菌为好望角链霉菌HWJ001，并于2019年5月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.17831。本发明专利技术的好望角链霉菌HWJ001可应用于生物有机肥的高温发酵，发酵温度可高达70℃以上，缩短发酵周期至18‑21天，大大提高了发酵效率和有机肥的肥效。

【技术实现步骤摘要】
一种嗜热好望角放线菌及其应用
本专利技术涉及微生物发酵
，具体涉及一种嗜热好望角放线菌及其应用。
技术介绍
鸡粪是一种比较优质的有机肥，其含纯氮、磷(P2O5)、钾等多种元素。鸡粪在施用前必须经过腐熟，将存在鸡粪中的寄生虫及其卵以及其他一些传染性的病菌通过腐熟的过程得到灭活及脱臭。它含有植物所需的中微量元素、有益微生物活性菌及多种酶。这些微生物菌在土壤中的生命活动，能固定空气中氮素、疏松土壤、分解土壤中长期使用化肥固化的磷钾矿物质，为作物提供足够的多种营养元素。传统的生物有机肥的生产技术以厌氧堆肥为主，采用的发酵微生物大都是低温菌种，发酵温度一般控制在45℃，时间长(3-6个月)、效率低，而且低温环境下无法达到去除有害病菌、虫卵的效果，有益微生物往往不能达到国家生物有机肥标准。
技术实现思路
为解决现有技术中存在的问题，本专利技术专利首先获得了一种放线菌地方株(经第三方鉴定为好望角链霉菌，命名为HWJ001)。其由熟化的生物有机肥中分离，经纯化鉴定，人工驯化适应工业化生产后，再通过耐热驯化，培育成为可用于工业化生产生物有机肥的菌种。本菌种建议分类名为：好望角链霉菌(Streptomycesspeibonae)，已于2019年5月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为：CGMCCNo.17831。进一步的，本专利技术获得的好望角链霉菌HWJ001菌株能够用于有机肥的发酵生产，特别是鸡粪有机肥的高温发酵生产。同时，本专利技术设计了上述好望角链霉菌HWJ001菌株直接用于鸡粪有机肥高温发酵生产的微生物菌剂，所述微生物菌剂中所述好望角链霉菌HWJ001株的含量不少于1亿个CFU/ml。同时，本专利技术设计了一种鸡粪有机肥高温发酵的方法，所述鸡粪有机肥高温发酵的原料为鸡粪、上述含有好望角链霉菌HWJ001菌种的微生物菌剂、花生壳、锯末和红糖，所述发酵方法包括以下步骤，a、发酵菌剂制备，取含有好望角链霉菌HWJ001菌株的微生物菌剂500ml，加入到10L质量分数5％的红糖水中,置恒温摇床，37℃发酵4-6小时；b、取5L发酵好的发酵菌剂均匀喷洒在花生壳和锯末的混合物料上，该混合物料中花生壳和锯末的质量比为1:1；c、将步骤b的花生壳和锯末的混合物料平铺在发酵池中，厚度为50cm；d、按鸡粪：花生壳和锯末＝1:1的体积比，将鸡粪加入到发酵池中，并用翻耙机翻耙使鸡粪与花生壳、锯末混合均匀；e、使用水分测定仪检测步骤d的混合物的水分，调整发酵物水分含量在40％-60％；f、发酵过程中，使用翻耙机每日上午、下午各翻耙一次，并测量记录温湿度，鸡粪在微生物菌剂的作用下，温度很快升到50～60摄氏度，在4天左右达到70℃以上，并持续1周；发酵2～3周后温度下降至50℃以下发酵结束。相对于现有技术，本专利技术专利提供的嗜热好望角链霉菌HWJ001菌株能够适应70℃以上的高温，高温条件下促进了发酵物料的快速降解，将整个发酵周期缩短到3周以内，大大的提高了鸡粪有机肥的生产效率；同时肥料经过高温发酵的过程将肥料中残留的虫卵、病毒等有害生物进行了有效的消灭；并且发酵结束得到的有机肥料保留了较多有益物质，有益菌的含量达到国家标准，肥料质量提升明显。附图说明图1是菌株显微镜形态图图2是菌株的革兰氏染色检图图3是菌落在四种培养基中的培养效果图具体实施方式下面结合附图和具体实施例对本专利技术做进一步的说明。实施例1好望角链霉菌HWJ001株的获得一、菌株的分离鉴定：1、按比例配制商品化放线菌固体培养基100ml，120℃灭菌30分钟；2、称取腐熟的鸡粪10g于三角瓶中，加入90ml生理盐水，搅拌均匀，于数显恒温水浴振荡器振摇30分钟，备用；3、将灭菌好的培养基铺到6个平皿中，凝固后备用；4、用接种环蘸取步骤2的样品分别在6个平皿中进行划线培养；5、将划线的平皿倒置于36℃的培养箱中，培养72小时。6、挑取平皿上的放线菌菌落作进一步的分离纯化。二、菌种保藏：1、按比例配制商品化放线菌培养基100ml，120℃灭菌30分钟；2、取试管放入160℃干燥箱中灭菌4小时，备用；3、将灭菌好的放线菌培养基于分装灭菌完毕的试管中制备斜面培养基；4、用接种环蘸取第一阶段得到的纯化的放线菌菌种接种至试管的培养基斜面；5、接种完毕后置于36℃培养箱中培养72小时；6、之后取出，置于4℃冰箱保存，作为原始菌种。三、耐热驯化技术：1、按比例配制商品化放线菌液体培养基，灭菌后分装至多支经高温灭菌的试管中，5ml/支；2、取少许第二阶段的原始菌种，接种于5支装有放线菌液体培养基的5ml试管中，并于数显恒温水浴振荡器中，60℃振摇12小时；3、取少许于60℃振摇12小时培养的菌液，再接种于5支装有放线菌液体培养基的5ml试管，于数显恒温水浴振荡器中，62℃振摇12小时；4、取少许于62℃振摇12小时培养的菌液，再接种于5只装有放线菌液体培养基的5ml试管，于数显恒温水浴振荡器，64℃振摇12小时；5、重复如上操作，每次移种后，培养温度提高2℃，直至于数显恒温水浴振荡器，70℃振摇12小时；6、在70℃环境下，连续传代培养5代，直至菌株生长速度与37℃时相同，获得嗜热的放线菌7、将嗜热的放线菌培养物在放线菌平板培养基上划线分离，挑取典型的菌落，接种于10只装有放线菌液体培养基的5ml试管培养基，数显恒温水浴振荡器70℃振摇12小时。8、选择生长速度较快的试管中的放线菌，接种于斜面培养基。并送第三方鉴定机构，对菌株进行测序鉴定。9、获得嗜热菌株于4℃冰箱保存，作为嗜热放线菌的原始嗜热放线菌菌种。四、原始放线菌菌种的鉴定1、16rDNA测序测序工作由青岛征信检测分析有限公司完成，参照KIeseretal.中所述方法提取嗜热放线菌的基因组DNA，用细菌16rDNA通用引物扩增嗜热放线菌的16SrDNA序列。经第三方检测机构所得序列如SEQIDNo.1所示，所测序列进行同源性比较，比较结果显示嗜热放线菌与好望角链霉菌(Streptomycesspeibonae)最为相似，相似性为99.19％。命名为好望角链霉菌HWJ001株。2、培养形态特征如图3所示，将好望角链霉菌HWEJ001株分别于高氏1号培养基、酵母膏-麦芽膏琼脂培养基、于燕麦粉琼脂培养基培养、营养琼脂培养基进行培养，其菌落形态如表1所示。表1培养基气生菌丝基内菌丝可溶性色素高氏1号琼脂白色浅黄色无酵母膏-麦芽膏琼脂(ISP2)灰白色黄色无...

【技术保护点】
1.一种嗜热好望角放线菌，其特征在于，所述嗜热好望角放线菌为好望角链霉菌HWJ001菌株，于2019年5月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.17831。/n

【技术特征摘要】
1.一种嗜热好望角放线菌，其特征在于，所述嗜热好望角放线菌为好望角链霉菌HWJ001菌株，于2019年5月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNo.17831。


2.根据权利要求1所述好望角链霉菌HWJ001菌株在有机肥高温发酵中的应用，所述有机肥为鸡粪有机肥。


3.一种微生物发酵菌剂，其特征在于，所述微生物发酵菌剂包括权利要求1所述的好望角链霉菌HWJ001菌株，所述好望角链霉菌HWJ001株的含量为1亿CFU/ml(CFU:菌落形成单位)。


4.根据权利要求2所述的鸡粪有机肥的发酵方法，其特征在于，所述鸡粪有机肥的发酵原料为鸡粪、微生物发酵菌剂、花生壳、锯末和红糖，所述发酵方法包括以下步骤：
a、微生物发酵菌剂制备：取含有好望角链霉菌HWJ00...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金纪，常维山，庚承芳，梁潇，张劲，米雪丽，王春婷，薛超，
申请(专利权)人：山东中农普宁药业有限公司，山东倍倍安生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37