一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法技术

本发明专利技术一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，属于花卉繁殖方法领域。为解决现有耐寒丰花月季繁殖方法效率低、污染性大的问题，本发明专利技术提供了一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，包括以下步骤：一、外植体灭菌处理；二、初代培养；三、增殖培养；四、生根培养；五、驯化移栽。将其用于月季繁殖中，所得月季可在满足能在冬季寒冷地区露地越冬的要求的同时，提高增殖系数和萌芽率，降低污染率。降低繁殖过程中对环境产生的污染。

【技术实现步骤摘要】
一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法
本专利技术属于花卉繁殖方法领域，尤其涉及一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法。
技术介绍
丰花月季(RosafloribundaL.)是蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(RosaL.)的重要观赏植物之一，丰花月季的花色丰富、栽培管理简单，适于在园林绿化中广泛应用且商业价值很高。耐寒丰花月季是近几年培育出的丰花月季新品种系列，具有能够在寒冷地区露地越冬、花期长、耐粗放管理特点，亟需大量的苗木以进入推广应用。目前月季的繁殖技术依旧沿袭了传统的扦插、嫁接等方法。但是，通过一般的扦插繁殖，不仅繁殖速度慢、效率低、种苗易退化，而且成苗率受季节、插穗质量、插穗位置、基质、温度等诸多因素的影响，难以在相对较短的时间内获得大量种苗。而有些月季品种扦插不易生根，繁殖速度受到很大限制。一些新育出和引进的品种，由于数量极少，短期内难以推广。而大量现有的耐寒丰花月季的繁殖方法，在组织培养中，会利用到氯化汞溶液，其具有极大的污染性。
技术实现思路
为解决上述现有耐寒丰花月季繁殖方法效率低、污染性大的问题，本专利技术提供了一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法。本专利技术的技术方案：一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，包括以下步骤：一、外植体灭菌处理：将所选取的外植体部位，切成2～3cm的小段，每小段带有一个腋芽；用商业洗洁精溶液浸泡外植体15～20min，经流水充分冲洗40min后，将处理后的外植体放入灭菌的烧杯中，用酒精溶液杀菌30～40s，无菌水冲洗3次，将其加入到NaClO溶液中进行灭菌处理，灭菌时间为6～12min，然后用无菌水对其冲洗5次后晾干；二、初代培养：待外植体表面干燥后，将其接种在1/2MS培养基中，在培养室中培养20～25天；三、增殖培养：将已经长出的幼苗分别从茎段上切下，并将其接种至增殖培养基J1中，在培养室中进行继代培养，继代培养周期为30天，连续继代3次后，将幼苗移至增殖培养基J2中，进行第4及第5次继代培养；四、生根培养：将生长到4～5cm丛生苗分离、剪下移入生根培养基中，在培养室中培养20～25天，无菌苗长出白色根须；五、驯化移栽：直接移栽至苗钵，浇透水放置在保湿培养盒内，保持盒内湿度，15天后打开培养盒的透气孔，30天后去掉外罩，完成组织培养。进一步的，外植体取材时期为6月和7月，生长旺盛时期；外植体取材为当年生长势健壮的半木质化带芽点的枝条，外植体取材部位为枝条的中部茎段。进一步的，步骤一所述商业洗洁精溶液的体积百分浓度为0.05％，所述酒精溶液的体积百分浓度为75％，所述NaClO溶液的质量百分比浓度为2％～5％。进一步的，步骤一所述NaClO溶液的质量百分比浓度最优为4％，NaClO灭菌时间最优为12min。进一步的，步骤二、步骤三及步骤四所述培养室的培养室内温度为22～25℃，24h中培养室内光照时间为14h、黑暗时间为10h，光照强度为1800～2000Lux。进一步的，步骤二所述增殖培养基J1的配方为：MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉7.5g/L，增殖培养基J1的pH值为5.8；所述增殖培养基J2的配方为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉7.5g/L，pH值为5.8。进一步的，步骤三所述将已经长出的幼苗分别从茎段上切下的过程中，要充分保留部分基部。进一步的，步骤四所述生根培养基的配方为：1/2MS+NAA0.1+蔗糖20g/L+琼脂粉7.5g/L，生根培养基的pH值为5.8。进一步的，步骤四所述根须为白色，根量为6～7根，根长度为4～5cm。进一步的，步骤五所述苗钵内蛭石、珍珠岩及草炭土的体积比为1：1：1，苗钵的直径为8～10cm。本专利技术的有益效果：1、本方法将丰花月季的繁殖与当地气候气温相结合，繁殖出的丰花月季可在冬季寒冷地区露地越冬，在保留了丰花月季原有的耐寒性好、花期长、耐粗放管理的优点的同时，改善了传统月季繁殖速度慢、效率低、种苗易于退化的不足。提高了丰花月季幼苗的增殖速度、提高发芽率，提高了繁殖速度，减少了繁殖过程中产生的污染。2、取材时期选为6月和7月，外植体取材为当年生长势健壮的半木质化带芽点的枝条，外植体取材部位为枝条的中部茎段。可达到外植体萌芽率较高、污染率较小的有益效果，在有利于外植体后期生长的同时可降低污染。3、选用质量百分比浓度为4％的NaClO溶液进行灭菌，灭菌时间为12min，可在达到较好的灭菌效果的同时，达到外植体发芽率较高、污染率较低的有益效果。同时本方法用NaClO溶液代替了HgCl2溶液进行消毒，降低了消毒过程中的污染性。4、本方法选用的增殖培养基J、增殖培养基J2、生根培养基的配方保证了幼苗培养具有较高的增殖系数和稳定性，进一步提高了丰花月季的繁殖效率。5、苗钵选用蛭石、珍珠岩及草炭土作为基质，提高幼苗成活率幼苗成活率可达98％以上，并可缩短驯化时间2～3天，进一步提高了丰花月季的繁殖效率。附图说明图1为实施例1所述初代培养5天观察结果示意图；图2为实施例1所述初代培养5天观察结果示意图；图3为实施例1所述将幼苗接种至增殖培养基J1示意图；图4为实施例1所述将继代培养三次后幼苗接种至增殖培养基J2示意图；图5为实施例1所述生根培养前将丛生苗接种至生根培养基示意图；图6为实施例1所述生根培养后丛生苗长出的白色根须示意图；图7为实施例1所述苗钵示意图；图8为实施例1所述培养盒示意图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术的技术方案做进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。实施例1一、外植体灭菌处理：取6月所取的当年生长势健壮的半木质化带芽点的枝条的中部茎段，切成2cm的小段，茎段下放斜切约45度角，每小段带有1个腋芽。用体积百分浓度为0.05％商业洗洁精溶液浸泡外植体20min，用纱布包好后，将其经流水充分冲洗40min，放入经灭菌过的烧杯，用75％的酒精杀菌40s，无菌水冲洗3次。将处理后的外植体加入NaClO中灭菌，NaClO的浓度为4％，灭菌时间为12min。处理过后，用无菌水对其冲洗5次后晾干。二、初代培养：将所得外植体接种在1/2MS培养基中，培养室内温度为24℃，每24h中培养室内光照时间为14h，培养室内黑暗时间10h，光照强度为2000勒克斯(Lux)。分时段观察外植体，初代培养第5天观察结果如图1所示，初代培养第15天观察结果如图2所示。培养15天后，观察外植体萌芽和污染情况，并按下列计算公式计算萌芽率及污染率，重复3次实验，取平均值，统计结果见表一、表二、表三。污染率＝(污染外植体数/接种外植体数)×100％萌发率＝(萌发外植体数/接种外植本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：/n一、外植体灭菌处理：将所选取的外植体部位，切成2-3cm的小段，每小段带有一个腋芽；用商业洗洁精溶液浸泡外植体15～20min，经流水充分冲洗40min后，将处理后的外植体放入灭菌的烧杯中，用酒精溶液杀菌30～40s，无菌水冲洗3次，将其加入到NaClO溶液中进行灭菌处理，灭菌时间为6～12min，然后用无菌水对其冲洗5次后，用灭菌的滤纸吸干表面水分；/n二、初代培养：待外植体表面干燥后，将其接种在1/2MS培养基中，在培养室中培养20～25天；/n三、增殖培养：将已经长出的幼苗分别从茎段上切下，并将其接种至增殖培养基J1中，在培养室中进行继代培养，继代培养周期为30天，连续继代3次后，将幼苗移至增殖培养基J2中，进行第4及第5次继代培养；/n四、生根培养：将生长到4～5cm丛生苗分离、剪下移入生根培养基中，在培养室中培养20～25天，无菌苗长出白色根须；/n五、驯化移栽：直接移栽至苗钵，浇透水放置在保湿培养盒内，保持盒内湿度，15天后打开培养盒的透气孔，30天后去掉外罩，完成组织培养。/n

【技术特征摘要】
1.一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
一、外植体灭菌处理：将所选取的外植体部位，切成2-3cm的小段，每小段带有一个腋芽；用商业洗洁精溶液浸泡外植体15～20min，经流水充分冲洗40min后，将处理后的外植体放入灭菌的烧杯中，用酒精溶液杀菌30～40s，无菌水冲洗3次，将其加入到NaClO溶液中进行灭菌处理，灭菌时间为6～12min，然后用无菌水对其冲洗5次后，用灭菌的滤纸吸干表面水分；
二、初代培养：待外植体表面干燥后，将其接种在1/2MS培养基中，在培养室中培养20～25天；
三、增殖培养：将已经长出的幼苗分别从茎段上切下，并将其接种至增殖培养基J1中，在培养室中进行继代培养，继代培养周期为30天，连续继代3次后，将幼苗移至增殖培养基J2中，进行第4及第5次继代培养；
四、生根培养：将生长到4～5cm丛生苗分离、剪下移入生根培养基中，在培养室中培养20～25天，无菌苗长出白色根须；
五、驯化移栽：直接移栽至苗钵，浇透水放置在保湿培养盒内，保持盒内湿度，15天后打开培养盒的透气孔，30天后去掉外罩，完成组织培养。


2.根据权利要求1所述一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，其特征在于，外植体取材时期为6月和7月，生长旺盛时期；外植体取材为当年生长势健壮的半木质化带芽点的枝条，外植体取材部位为枝条的中部茎段。


3.根据权利要求2所述一种耐寒丰花月季环保高效微繁殖方法，其特征在于，步骤一所述商业洗洁精溶液的体积百分浓度为0.05％，所述酒精溶液的体积百分浓度为75％，所述NaClO溶液的质量百分比浓度为2％～5％。


4.根据权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王云云，聂迪，张旌，肖宇，高宇，王晓飞，刘淑霞，孙宇峰，车代弟，张金柱，杨涛，
申请(专利权)人：黑龙江省科学院大庆分院，
类型：发明
国别省市：黑龙;23