基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1、种子消毒萌发；步骤2、工程菌液制备；步骤3、侵染共培；步骤4、恢复培养；步骤5、筛选培养；步骤6、生根培养。该方法以BMET5作为载体，用工程菌液萌发成熟种子，然后用萌发的种子制备子叶节并用工程菌液对其进行二次侵染，操作简单，转化效率可达14.63％，对汉麻靶向精准育种，快速获得目标性状的种质资源，做强汉麻种业芯片具有重要意义。本发明专利技术为大麻遗传转化提供了关键技术手段，拓展了大麻遗传转化方法，提供ruby表达证实了T‑DNA在大麻基因组中的稳定整合，为大麻转基因研究和商业应用打下了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种大麻遗传转化体系构建方法，具体涉及一种基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法。

技术介绍

1、大麻(cannabis sativa)属于大麻科(cannabaceae)植物，其能够使人放松的特性已有超过2700年的历史。自过去十年以来，人们对大麻素(cannabinoids)的医疗效果重新产生了浓厚的兴趣。尽管大麻以其主要成分四氢大麻酚(thc)的致幻作用而闻名，但它还含有多种具有治疗潜力的植物大麻素，可用于治疗从复杂神经系统疾病到癌症等多种人类疾病，例如大麻二酚(cbd)、大麻酚(cbn)、大麻原酚(cbg)和大麻色素(cbc)。另外其茎中含有优质的纤维素，种子含有高质量的油以及花序含有有价值的树脂，从特种纸浆和纸张到营养食品，药品和化妆品，大麻茎，种子和花序可以衍生出多种产品。

2、组织培养已被广泛用于通过转基因和基因编辑技术推进植物研究。尽管在一些物种中已报道了成功转化幼苗再生的案例，但对于大麻(cannabis sativa)而言，这仍是得到转基因或基因编辑植株的瓶颈。只有大麻的毛状根被证实易受根瘤杆菌(ae本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述萌发培养基配方为：MS+100μmol/LAS+蔗糖30g/L，pH＝5.8。

3.根据权利要求1所述的基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述侵染液配方为：MS+100μmol/LAS+蔗糖30g/L，pH＝5.8。

4.根据权利要求1所述的基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述共培养培养基配方为：MS+0.1～0.4mg/...

【技术特征摘要】

1.一种基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述萌发培养基配方为：ms+100μmol/las+蔗糖30g/l，ph＝5.8。

3.根据权利要求1所述的基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述侵染液配方为：ms+100μmol/las+蔗糖30g/l，ph＝5.8。

4.根据权利要求1所述的基于成熟种子菌液萌发法建立大麻遗传转化体系的方法，其特征在于所述共培养培养基配方为：ms+0.1～0.4mg/ltdz+0.05-0.1mg/lnaa+100μmol/las+蔗糖30g/l+琼脂7g/l，ph＝5.8。

5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：边境，张晓艳，李学海，王云云，曹焜，王晓楠，肖湘，孙凯旋，
申请(专利权)人：黑龙江省科学院大庆分院，
类型：发明
国别省市：