用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物、其组织工程组合物使用盒及应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，具体讲，涉及一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其组织工程组合物使用盒及应用。本发明专利技术的前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。本发明专利技术采用温度敏感性高分子材料复合干细胞，涂到人体后发生相转化，形成固体凝胶粘附到创面表面，同时将干细胞稳定的固定于凝胶中，通过添加粘结剂，从而使形成的凝胶可牢固的粘附于皮肤表面，修复皮肤损伤。

【技术实现步骤摘要】
用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物、其组织工程组合物使用盒及应用
本专利技术涉及生物医药
，具体讲，涉及一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其组织工程组合物使用盒及应用。
技术介绍
皮肤损伤是多种疾病或损伤导致的皮肤破损现象，表现为皮肤易反复破溃、部分皮肤功能丧失、易产生瘢痕等皮肤增生组织等。常见导致皮肤难治性破损的因素有糖尿病、微生物炎症及免疫性疾病所致的皮肤溃疡、烧烫伤、红斑狼疮、银屑病等。目前，全球约有超过4.25亿的糖尿病患者。中国是全球糖尿病患病人数最多的国家。糖尿病足是糖尿病患者常见严重并发症之一，1999年世界卫生组织将糖尿病足定义为糖尿病因合并各种不同程度的末梢血管病变和神经病变，导致下肢感染、溃疡和(或)深部组织破坏。近6％的糖尿病患者并发糖尿病足溃疡，至少25％的糖尿病足溃疡难以治愈，导致了84％的与糖尿病相关的下肢截肢。溃疡、截肢、死亡是糖尿病足的三大最终结局。溃疡的发生被认为是截肢的前兆，而下肢截肢经常会导致糖尿病患者死亡，70％的患者在截肢手术后5年内死亡。糖尿病足溃疡的高截肢率和高死亡率，严重影响患者的生活质量，加重医疗保健系统及社会负担。目前，针对糖尿病足溃疡传统治疗方式的疗效及预后往往难以达到预期。目前临床工作中采取多学科合作的方式，对于糖尿病足创面的内科治疗主要是控制血糖、调整抗生素抗感染、降血脂、改善微循坏、营养神经药物的使用。外科治疗，包括对于严重感染的慢性创面采取短时间内坏死组织清创，防止感染扩散致使下肢感染平面上移；蛆虫生物清创技术及臭氧化学清创技术将在控制感染的同时促进肉芽组织生长；针对感染控制后的难愈合创面采取植皮、皮瓣移植、皮肤牵张闭合器修复软组织缺损，或者应用脂肪移植、富血小板血浆及富血小板纤维蛋白等进行组织修复。但由于糖尿病患者足部溃疡形成难以愈合最主要的原因是由于局部血液循环障碍和机体免疫力降低，局部伤口感染，常见细菌耐药的形成。因此，糖尿病足的皮肤溃疡上述方法非常难以治愈。干细胞是一类具有自我复制能力、多向分化能力的细胞，通过分化功能及分泌功能，促进血管生成及细胞外基质的重建，从而促进创面愈合。专利技术专利申请201310265106.X公开了一种促进糖尿病皮肤创伤修复的复合制剂及其制备方法，该制剂包含温敏性水凝胶和骨髓间充质干细胞。专利技术专利ZL201710812388.9公开一种治疗难治性皮肤破损的生物凝胶剂及其应用，其中的干细胞培养添加剂由脐带间充质干细胞、中药提取物和血清组成。但目前采用干细胞治疗糖尿病足溃疡仍存在诸多问题，其中最主要的问题是干细胞无法稳定的固定并存活于糖尿病足溃疡创面上，如何通过合适的方式方法使干细胞稳定的固定、存活较长时间作用于溃疡创面，而不是很快脱落失活，就成为了解决干细胞局部治疗溃疡(如糖尿病足溃疡)创面问题的主要瓶颈。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一专利技术目的在于提供一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物。本专利技术的第二专利技术目的在于提供该用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物的制备方法。本专利技术的第三专利技术目的在于提供一种用于修复皮肤损伤组织工程组合物使用盒。本专利技术的第四专利技术目的在于提供上述干细胞凝胶前体组合物和组织工程组合物使用盒制备得到的凝胶。本专利技术的第五专利技术目的在于提供上述干细胞凝胶前体组合物和组织工程组合物使用盒的应用。为了完成本专利技术的专利技术目的，采用的技术方案为：本专利技术提出一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，所述前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。可选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括免疫调节剂或免疫增强剂；所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌制剂，卡介苗，假单胞菌制剂，卡介菌多糖、核酸制剂，红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂，A群链球菌制剂，绿脓杆菌制剂，布氏菌制剂，胸腺肽，胸腺五肽，IL-2，干扰素，免疫核糖核酸，左旋咪唑，异丙肌苷，聚肌胞苷酸，聚肌尿苷酸；优选的，所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌的无细胞制剂、卡介苗、胸腺肽、胸腺五肽、IL-2、干扰素、免疫核糖核酸、左旋咪唑、异丙肌苷、聚肌胞苷酸、聚肌尿苷酸。可选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括抗生素，所述抗生素选自抗革兰氏阴性菌、抗革兰氏阳性菌、抗厌氧菌、抗真菌的抗生素的至少一种。可选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括溶剂，所述溶剂选自生理盐水和磷酸缓冲液中的至少一种；优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括干细胞无血清培养基；优选的，所述干细胞无血清培养基在所述干细胞凝胶组合物中的质量百分比浓度为0.8～1.5％，优选1.04～1.35％。可选的，所述干细胞选自间充质干细胞、脂肪干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞中的至少一种；所述间充质干细胞来源于骨髓、脐带、脐血、胎盘、羊膜、牙髓或脂肪组织，优选脐带间充质干细胞；优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×105～1×108个/mL的干细胞；优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×106～1×107个/mL的干细胞。优选的，所述干细胞为第2～10代细胞；优选的，所述干细胞为第3～5代细胞。可选的，所述温度敏感性高分子材料选自聚N-异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺衍生物、羟丁基壳聚糖、羟丁基壳聚糖衍生物、泊洛沙姆407、聚乳酸/羟基乙酸/聚乙二醇共聚物、聚乙二醇单甲醚-(癸二酸-D,L-乳酸)聚酯酸酐-聚乙二醇单甲醚三嵌段共聚物、纤维素、纤维素衍生物和聚乙二醇/聚己内酯嵌段共聚物；优选的，所述温度敏感性高分子材料在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为1～15％，更优选2～9％。可选的，所述粘合剂选自羧甲基纤维素、卡波姆、聚乙烯醇、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、白芨多糖、贻贝粘性蛋白、透明质酸钠中的至少一种；优选的，所述粘合剂在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.25～5％，优选为0.5～4％。可选的，所述凝胶相变温度调节剂选自泊洛沙姆188、聚山梨醇酯和聚乙二醇中的至少一种；优选的，所述凝胶相变温度调节剂在所述干细胞凝胶前体组合物中的质量百分比浓度为0.5～10％，优选1～5％。可选的，所述干细胞凝胶前体组合物的相变温度为20℃～37℃，优选为25～35℃。本专利技术还涉及该干细胞凝胶前体组合物的制备方法，包括如下步骤：当传代培养的干细胞长至60％～80％时，更换成无血清的DMEM培养基中培养6～12h，加入胰蛋白酶进行消化，然后收集细胞，离心后与所述温度敏感性高分子材料、所述粘合剂和所述凝胶相变温度调节剂混合，得到所述干细胞凝胶前体组合物。本专利技术还涉及一种用于修复皮肤损伤的组织工程组合物使用盒，所述组织工程组合物使用盒中含有上述的干细胞凝胶前体组合物和薄膜；优选的，所述组织工程组合物使用盒中还包括无菌纱布。...

【技术保护点】
1.一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于修复皮肤损伤的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述前体组合物包括干细胞、温度敏感性高分子材料、粘合剂和凝胶相变温度调节剂。


2.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括免疫调节剂或免疫增强剂；
所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌制剂，卡介苗、假单胞菌制剂，卡介菌多糖、核酸制剂，红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂，A群链球菌制剂，绿脓杆菌制剂，布氏菌制剂，胸腺肽，胸腺五肽，IL-2，干扰素，免疫核糖核酸，左旋咪唑，异丙肌苷，聚肌胞苷酸，聚肌尿苷酸；
优选的，所述免疫调节剂或免疫增强剂选自短棒状杆菌的无细胞制剂、卡介苗、胸腺肽、胸腺五肽、IL-2、干扰素、免疫核糖核酸、左旋咪唑、异丙肌苷、聚肌胞苷酸、聚肌尿苷酸。


3.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括抗生素，所述抗生素选自抗革兰氏阴性菌、抗革兰氏阳性菌、抗厌氧菌、抗真菌的抗生素中的至少一种。


4.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括溶剂，所述溶剂选自生理盐水和磷酸缓冲液中的至少一种；
优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中还包括干细胞无血清培养基；
优选的，所述干细胞无血清培养基在所述干细胞凝胶组合物中的质量百分比浓度为0.8～1.5％，优选为1.04～1.35％。


5.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述干细胞选自间充质干细胞、脂肪干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞中的至少一种；
所述间充质干细胞来源于骨髓、脐带、脐血、胎盘、羊膜、牙髓或脂肪组织，优选脐带间充质干细胞；
优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×105～1×108个/mL的干细胞；更优选的，所述干细胞凝胶前体组合物中含有1×106～1×107个/mL的干细胞。
进一步优选的，所述干细胞为第2～10代细胞；优选的，所述干细胞为第3～5代细胞。


6.根据权利要求1所述的干细胞凝胶前体组合物，其特征在于，所述温度敏感性高分子材料选自聚N-异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺衍生物、羟丁基壳聚糖、羟丁基壳聚糖衍生物、泊洛沙姆407、聚乳酸/羟基乙酸/聚乙二醇共聚物、聚乙二醇单甲醚-(癸二酸-D,L-乳酸)聚酯酸酐-聚乙二醇单甲醚三嵌段共聚物、纤...

【专利技术属性】
技术研发人员：高尚先，
申请(专利权)人：高尚先，
类型：发明
国别省市：上海;31