基于PCR-RFLP的家栖鼠常见鼠种快速鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种基于PCR‑RFLP的家栖鼠常见鼠种快速鉴定方法，属于遗传工程技术领域。包括以下步骤：(1)采集鼠类动物组织或排泄物标本；(2)提取标本总核酸；(3)扩增鼠线粒体Cyt‑b基因的完整片段，包含上下游非编码序列，其目的片段长度为1242bp；(4)同时采用两种限制性核酸内切酶BamH1和EcoRI对上述PCR产物进行快速酶切；(5)将酶切产物1.5％琼脂糖凝胶电泳后在荧光成像系统中进行图谱分析。本发明专利技术方法具备快速、准确和廉价的优势，对人员技术、设备和试剂的成本要求较低。可以同时鉴定常见的三种鼠种，遗传物质来源广，具有很大的应用推广价值。

PCR-RFLP based rapid identification of common rodents

【技术实现步骤摘要】
基于PCR-RFLP的家栖鼠常见鼠种快速鉴定方法
本专利技术涉及家栖鼠鼠种的鉴定方法，属于遗传工程

技术介绍
鼠类动物，作为哺乳动物中繁殖最块、生存能力超强的有害动物，不仅给农业和畜牧业造成直接影响，还因其可携带、传播多种病原体，给公众健康带来巨大威胁。我国北方三大家栖鼠主要包括褐家鼠(Rattusnorvegicus)、小家鼠(Musmusculus)和黄胸鼠(Rattustanezumi)，鼠种的鉴定对于鼠的来源地追踪、种群进化分析，以及药物种类和药物投放地的选择等至关重要，从而直接影响防鼠灭鼠的效果。传统形态学的鼠种鉴定方法虽然经典但也存在诸多局限性，对鉴定人员的知识储存和鼠形态完整度均有着较高要求，而鼠的形态特征也可能随着生态学的不断变化而发生变化，给鼠种的鉴定提出了更高的要求。因此迫切需要一种准确的分子生物学鉴定方法来作为传统形态学鉴定方法的补充。随着分子生物学的不断发展和应用，其在鼠种鉴定中可发挥重要作用，如在只有鼠排泄物的条件系即可通过分子鉴定的手段快速获得鼠种的准确信息。中国专利CN105177153A公开了一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于PCR-RFLP的家栖鼠常见鼠种快速鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)采集鼠类动物组织或排泄物标本；(2)提取标本总核酸；(3)PCR扩增鼠线粒体Cyt-b基因的完整片段，包含上下游非编码序列，其目的片段长度为1242bp；(4)同时采用两种限制性核酸内切酶BamH1和EcoRI对上述PCR产物进行酶切；(5)将酶切产物经1.5％琼脂糖凝胶电泳后，在荧光成像系统中进行图谱分析；/n步骤(3)中，用于扩增Cyt-b基因的引物对的序列如下：/n序列为SEQ ID NO.1的H6：5’-TCTTCATTTYTGGTTTACAAGACCA-3’；/n序列为SEQ ID NO.2的L7：...

【技术特征摘要】
1.基于PCR-RFLP的家栖鼠常见鼠种快速鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)采集鼠类动物组织或排泄物标本；(2)提取标本总核酸；(3)PCR扩增鼠线粒体Cyt-b基因的完整片段，包含上下游非编码序列，其目的片段长度为1242bp；(4)同时采用两种限制性核酸内切酶BamH1和EcoRI对上述PCR产物进行酶切；(5)将酶切产物经1.5％琼脂糖凝胶电泳后，在荧光成像系统中进行图谱分析；
步骤(3)中，用于扩增Cyt-b基因的引物对的序列如下：
序列为SEQIDNO.1的H6：5’-TCTTCATTTYTGGTTTACAAGACCA-3’；
序列为SEQIDNO.2的L7：5’-ACYAATGACATGAAAAATCATCGTTG-3’。


2.根据权利要求1所述的鼠种快速鉴定方法，其特征在于：步骤(1)中，鼠类标本为内脏、血...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘世友，严慧，魏亚梅，韩旭，蔡亚男，韩占英，张艳波，许永刚，齐顺祥，李琦，
申请(专利权)人：河北省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：河北;13