在原核细胞中增殖功能性马铃薯Y病毒的方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种在原核细胞中增殖功能性马铃薯Y病毒的方法。本发明专利技术通过在马铃薯Y病毒cDNA的类原核启动子区插入内含子，用于降低或消除类原核启动子区的启动子活性，经修饰马铃薯Y病毒cDNA编码的氨基酸序列与马铃薯Y病毒编码cDNA的氨基酸序列相同。该方案改善了现有技术中马铃薯Y病毒cDNA对原核细胞的固有毒性，避免马铃薯Y病毒对原核细胞生长产生影响，提高马铃薯Y病毒cDNA的产率，同时不改变马铃薯Y病毒RNA转录物的感染性。

Methods of proliferating functional potato Y virus in prokaryotic cells

【技术实现步骤摘要】
在原核细胞中增殖功能性马铃薯Y病毒的方法
本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及一种在原核细胞中增殖功能性马铃薯Y病毒的方法。
技术介绍
马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)是危害最为严重的植物病毒之一，其广泛的分布在世界各地的马铃薯和烟草种植区。PVY侵染马铃薯和烟草后，会引起叶脉坏死、叶面黄化褪绿、块茎环斑坏死等症状，导致马铃薯和烟草种质退化，产量降低，给马铃薯和烟草的生产造成严重损失。PVY是马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)代表成员，病毒粒体呈弯曲线状，其基因组由正义单链RNA构成，长约9.7kb，包含一个大的开放阅读框(Openreadingframe,ORF)，两端含有非编码区(Untranslatedregions，UTRs)。在进行翻译时，开放阅读框先编码一个多聚蛋白(Polyprotein)，之后再通过自身编码的蛋白酶将多聚蛋白切割加工为P1、HC-Pro、P3等10个成熟蛋白。此外，PVY基因组内还有一个通过+2相位移码翻译产生的蛋白-PIPO，该蛋白与P3蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种经修饰马铃薯Y病毒cDNA，其特征在于，在马铃薯Y病毒cDNA内一或多个类原核启动子区中含有一或多个内含子；/n该内含子用于降低或消除类原核启动子区的启动子活性，所述经修饰马铃薯Y病毒cDNA编码的氨基酸序列与马铃薯Y病毒编码cDNA的氨基酸序列相同。/n

【技术特征摘要】
1.一种经修饰马铃薯Y病毒cDNA，其特征在于，在马铃薯Y病毒cDNA内一或多个类原核启动子区中含有一或多个内含子；
该内含子用于降低或消除类原核启动子区的启动子活性，所述经修饰马铃薯Y病毒cDNA编码的氨基酸序列与马铃薯Y病毒编码cDNA的氨基酸序列相同。


2.根据权利要求1所述的经修饰马铃薯Y病毒cDNA，其特征在于，所述马铃薯Y病毒为PVYNTN-NW株系，优选为JL-W1；
优选地，所述类原核启动子区的序列如SEQIDNO.1所示。


3.根据权利要求1所述的经修饰马铃薯Y病毒cDNA，其特征在于，内含子为马铃薯内含子，优选为序列如SEQIDNO.2的内含子。


4.根据权利要求1-3任一项所述的经修饰马铃薯Y病毒cDNA，其特征在于，内含子插入位点的两端的任意端均至少有一个碱基与内含子在马铃薯基因组的位点相同；
优...

【专利技术属性】
技术研发人员：王永志，苏颖，李小宇，张春雨，马俊丰，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：吉林;22