利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性的方法。所述方法将银纳米粒子溶胶和待测胰蛋白酶溶液混合，加入酪蛋白作为底物反应，以三氯乙酸为终止反应剂，反应结束后，离心分离，用分光光度计测定上清液的吸光度，根据胰蛋白酶的活性与吸光度的线性关系，计算得到待测胰蛋白酶的活性。本发明专利技术利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性，具有制备简单、不需要进行提取、不需显色、步骤简便等优点，大大减少了时间成本和实验成本，重现性良好，检验快速且准确，满足实际检测工作需要。

Determination of trypsin activity by silver nanoparticles

【技术实现步骤摘要】
利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性的方法
本专利技术涉及一种利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性的方法，属于酶活性检测领域。
技术介绍
胰蛋白酶是一种对人体非常重要的蛋白水解酶，其相对分子质量为23,000，由223个氨基酸残基组成，其蛋白分子中含有4个色氨酸残基和6对二硫键。在人体中，胰蛋白酶是胰腺分泌到小肠的最重要的消化蛋白酶之一。它还存在于食管、胃、肝、肺、血管内上皮细胞、脾脏白细胞甚至皮肤细胞中，广泛表达于人体其他组织。现有的测定胰蛋白酶活性的方法比较复杂，实验运用中比较难以操作，因此如何高效测定胰蛋白酶活性成为如今的研究热点。刘俊会等采用苯甲酰-DL-精氨酸-p-硝基酰替苯胺盐酸盐(BAPA)为底物，大豆胰蛋白酶抑制剂作为抑制剂测定豆制品中的胰蛋白酶的活性(刘俊会等.豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性测定方法的改进[J].食品科学，2009,30,12,237-240.)。鲍恩东等以体外添加胰蛋白酶的奶牛血清和牛奶为研究对象，优化商品化的胰蛋白酶活性检测试剂盒，采用紫外分光光度法检测奶牛血清和牛奶中胰蛋白酶的活性(鲍恩东等.牛奶和血清中胰蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n将银纳米粒子溶胶和待测胰蛋白酶溶液混合，加入酪蛋白作为底物反应，以三氯乙酸为终止反应剂，反应结束后，离心分离，用分光光度计测定上清液的吸光度，根据胰蛋白酶的活性与吸光度的线性关系，计算得到待测胰蛋白酶的活性。/n

【技术特征摘要】
1.利用银纳米粒子测定胰蛋白酶活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将银纳米粒子溶胶和待测胰蛋白酶溶液混合，加入酪蛋白作为底物反应，以三氯乙酸为终止反应剂，反应结束后，离心分离，用分光光度计测定上清液的吸光度，根据胰蛋白酶的活性与吸光度的线性关系，计算得到待测胰蛋白酶的活性。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的胰蛋白酶溶液通过将胰...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆锐，刘敏，王连军，李健生，沈锦优，孙秀云，
申请(专利权)人：南京理工大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32