抗EGFR抗体药物结合物（ADC）和其用途制造技术

本公开提供抗体‑药物结合物(ADC)，其包含通过连接子与抗EGFR抗体连接的细胞毒性剂或细胞抑制剂；包含所述ADC的组合物；制造所述ADC的方法；和治疗癌症的方法，其包含向患有癌症的个体施用所述ADC。本公开提供特异性结合EGFR，且尤其是人类EGFR(hEGFR)的ADC。本文所述的抗EGFRAb在重链恒定区中包含S239C突变，其中编号是根据Kabat。在某些实施例中，所述抗EGFR抗体的所述重链恒定区缺乏C端赖氨酸，或在所述重链恒定区的C端包含除赖氨酸以外的氨基酸。

Anti EGFR antibody drug conjugate (ADC) and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗EGFR抗体药物结合物（ADC）和其用途相关申请的交叉引用本申请要求2017年9月2日提交的美国临时申请第62/553,937号的权益，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。
本公开尤其涉及人类表皮生长因子受体(EGFR，也称为HER-1或Erb-B1)抗体药物结合物(ADC)、包含此类ADC的组合物、制造ADC的方法和其用途。
技术介绍
癌症疗法包含大范围的治疗方法，包括手术、放射线和化学疗法。尽管通常互补的方法允许执业医师可以有广泛的选择来治疗癌症，但现有的治疗方法受许多缺点困扰，例如对靶向癌细胞的选择性没有超过对正常、健康细胞，以及癌症对治疗产生抗性。与例如放射治疗的非靶向疗法相比，基于靶向治疗剂(例如抗体)治疗癌症的最新方法已产生具有较少副作用的化学治疗方案。增强抗体的抗肿瘤效力的一种有效方法涉及将细胞毒性药物或毒素与能够被靶细胞内化的单克隆抗体连接。这些药剂被称为抗体-药物结合物(ADC)。在向患者施用后，ADC经由其抗体部分结合于靶细胞且变得内化，从而允许药物或毒素发挥其作用(参见例如美国专利申请公开案第US2005/0180972号和第US2005/0123536号)。人类表皮生长因子受体是由c-erbB原癌基因编码的170kDa跨膜受体，且展现内在酪氨酸激酶活性(Modjtahedi等人，《英国癌症杂志(Br.J.Cancer)》73：228-235(1996)；Herbst和Shin，《癌症(Cancer)》94：1593-1611(2002))。SwissProt数据库条目P00533提供人类EGFR的序列。EGFR经由酪氨酸激酶介导的信号转导路径调节许多细胞过程，包括但不限于激活控制细胞增殖、分化、细胞存活、细胞凋亡、血管生成、有丝分裂发生和癌转移的信号转导路径(Atalay等人，《肿瘤学年鉴(Ann.Oncology)》14：1346-1363(2003)；Tsao和Herbst，《信号(Signal)》4：4-9(2003)；Herbst和Shin，《癌症》94：1593-1611(2002)；Monjtahedi等人，《英国癌症杂志》73：228-235(1996))。已知的EGFR配体包括EGF、TGFA/TGF-α、双调蛋白、epigen/EPGN、BTC/β细胞调节素、表皮调节素/EREG和HBEGF/肝素结合EGF。通过EGFR的配体结合触发关键细胞质残基的受体同型和/或异型二聚化和自身磷酸化。磷酸化的EGFR募集衔接子蛋白(如GRB2)，转而激活复杂的下游信号级联，至少包括以下主要下游信号级联：RAS-RAF-MEK-ERK、PI3激酶-AKT、PLCγ-PKC和STATs模块。此自身磷酸化还通过若干其它蛋白质引发了下游活化和信号传导，所述蛋白质经由其自身的磷酸酪氨酸结合SH2域与磷酸化酪氨酸结合。这些下游信号传导蛋白起始若干信号转导级联，主要是MAPK、Akt和JNK路径，从而引起细胞增殖。通过EGFR的配体结合还可激活NF-κ-B信号级联。配体结合还直接使其它蛋白质(如RGS16)磷酸化，激活其GTP酶活性，并可能将EGF受体信号传导与G蛋白结合受体信号传导结合。配体结合还使MUC1磷酸化且增加其与SRC和CTNNB1/β-连环蛋白的相互作用。已在许多人类恶性病况，包括膀胱癌、脑癌、头颈癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、前列腺癌和肾癌中报道了EGFR的过表达。(Atalay等人，《肿瘤学年鉴(Ann.Oncology)》14：1346-1363(2003)；Herbst和Shin，《癌症》94：1593-1611(2002)；和Modjtahedi等人，《英国癌症杂志》73：228-235(1996))。在许多这些病况中，EGFR的过表达与患者的不良预后相关或有关联。(Herbst和Shin，《癌症》94：1593-1611(2002)；和Modjtahedi等人，《英国癌症杂志》73：228-235(1996))。EGFR还表达于正常组织的细胞中，尤其是皮肤、肝脏和胃肠道的上皮组织中，尽管其水平通常低于恶性细胞中的水平(Herbst和Shin，《癌症》94：1593-1611(2002))。含有EGFR基因扩增(即，EGFR基因的多个拷贝)的很大一部分肿瘤还共表达受体的截短形式(Wikstrand等人(1998)《神经病毒学杂志(J.Neurovirol.)》4，148-158)，其称为de2-7EGFR、ΔEGFR、EGFRvIII或Δ2-7(术语在本文中可互换使用)(Olapade-Olaopa等人(2000)《英国癌症杂志》82，186-94)。de2-7EGFR中所见的重排导致框内成熟mRNA缺少跨外显子2-7的801个核苷酸(Wong等人(1992)《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.)》89，2965-9；Yamazaki等人(1990)《日本癌症研究杂志(Jpn.J.CancerRes.)》81，773-9；Yamazaki等人(1988)《分子细胞生物学(Mol.Cell.Biol.)》8，1816-20；和Sugawa等人(1990)《美国国家科学院院刊》87，8602-6)。对应EGFR蛋白具有包含细胞外域的残基6-273的267个氨基酸的缺失，和在融合连接部的新的甘氨酸残基(Sugawa等人，1990)。此缺失与甘氨酸残基的插入一起在缺失界面处产生了独特的连接肽(Sugawa等人，1990)。已在多种肿瘤类型中报道了EGFRvIII，包括神经胶质瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌和前列腺癌(Wikstrand等人(1997)《癌症研究(CancerRes.)》57，4130-40；Olapade-Olaopa等人(2000)《英国癌症杂志》82，186-94；Wikstrand等人(1995)《癌症研究》55，3140-8；GarciadePalazzo等人(1993)《癌症研究》53，3217-20)。尽管此截短的受体不结合配体，但其具有低组成活性且赋予神经胶质瘤细胞作为裸小鼠中的肿瘤异种移植物生长的显著生长优势(Nishikawa等人(1994)《美国国家科学院院刊》91，7727-31)，且能够转化NIH3T3细胞(Batra等人(1995)《细胞生长与分化(CellGrowthDiffer.)》6，1251-9)和MCF-7细胞。de2-7EGFR在神经胶质瘤细胞中利用的细胞机制尚未完全确定，但据报道包括细胞凋亡减少(Nagane等人(1996)《癌症研究》56，5079-86)和增殖的少量增强(Nagane等人，1996)。由于此截短受体的表达局限于肿瘤细胞，因此其表示抗体疗法的高度特异性标靶。因此，在本领域中仍需要可用于癌症治疗中的治疗目的的抗EGFR抗体和ADC。
技术实现思路
本公开提供抗体-药物结合物(ADC)，其包含通过连接子与抗EGFR抗体连接的细胞毒性剂或细胞抑制剂；包含ADC的组合物；制造ADC的方法；和治疗癌症的方法，其包含向患有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体-药物结合物(ADC)，包含式(X)的结构，或其盐：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170902 US 62/5538371.一种抗体-药物结合物(ADC)，包含式(X)的结构，或其盐：



其中式(X)包含与细胞毒性弹头结合的抗EGFR抗体(Ab)，
其中所述抗EGFR抗体包含：
含有包含SEQIDNO:3的CDRH1序列、包含SEQIDNO:4的CDRH2序列和包含SEQIDNO:5的CDRH3序列的重链可变区；
含有包含SEQIDNO:8的CDRL1序列、包含SEQIDNO:9的CDRL2序列和包含SEQIDNO:10的CDRL3序列的轻链可变区；和
在重链恒定区中包含S239C的突变，其中编号是根据Kabat；
其中所述抗EGFR抗体通过所述包含S239C的突变与所述细胞毒性弹头结合，且
其中n为2。


2.根据权利要求1所述的ADC，其中所述重链可变区包含SEQIDNO:2且所述轻链可变区包含SEQIDNO:7。


3.根据权利要求1所述的ADC，其含有包含SEQIDNO:1的全重链，和包含SEQIDNO:6的全轻链。


4.根据权利要求1所述的ADC，其中所述抗EGFR抗体包含IgG1同型。


5.根据权利要求2所述的ADC，其中所述抗EGFR抗体包含IgG1同型。


6.根据权利要求1所述的ADC，其中所述抗EGFR抗体的所述重链恒定区缺乏C端赖氨酸或在所述重链恒定区的C端包含除赖氨酸以外的氨基酸。


7.根据权利要求2所述的ADC，其中所述抗EGFR抗体的所述重链恒定区缺乏C端赖氨酸或在所述重链恒定区的C端包含除赖氨酸以外的氨基酸。


8.根据权利要求3所述的ADC，其中所述抗EGFR抗体的所述重链恒定区缺乏C端赖氨酸或在所述重链恒定区的C端包含除赖氨酸以外的氨基酸。


9.根据权利要求1所述的ADC，其中所述抗EGFR抗体为人类化抗体。


10.根据权利要求2所述的ADC，其中所述抗E...

【专利技术属性】
技术研发人员：E雷利，M安德森，
申请(专利权)人：艾伯维公司，
类型：发明
国别省市：美国;US