多巴胺修饰的明胶微球、制备方法及其在作为细胞微载体方面的应用技术

一种基于微流控技术制备的高均一性多巴胺修饰的明胶微球、制备方法及其在作为细胞微载体方面应用，属于材料科学技术领域。本发明专利技术通过光刻技术与等离子刻蚀方法构筑Y字形微通道，通过微流体液滴技术制备高均一性明胶微球，将明胶微球置于多巴胺Tris‑HCl缓冲溶液中，利用多巴胺碱性条件下自我聚合为聚多巴胺性质，使明胶表面形成高黏附聚多巴胺涂层。该方法操作简单，不涉及复杂昂贵的制备技术。相对于传统裸漏的明胶表面，经多巴胺处理后的明胶微球能很好地促进神经细胞的黏附与分化，这对于提高细胞移植后存活率，后期组织治疗效果具有深远意义。

Dopamine modified gelatin microspheres, preparation methods and their application as cell microcarriers

【技术实现步骤摘要】
多巴胺修饰的明胶微球、制备方法及其在作为细胞微载体方面的应用
本专利技术属于材料科学
，具体涉及一种基于微流控技术制备的高均一性多巴胺修饰的明胶微球、制备方法及其在作为细胞微载体方面应用。该微载体基于多巴胺超黏附性，实现了细胞高运载效率，进一步促进了神经前体细胞的分化与功能表达。
技术介绍
帕金森综合症是一种常见的神经系统退行性疾病，主要由腹侧中脑多巴胺神经元坏死引起。相关研究表明，将多巴胺神经元注入到患者中脑，能起到明显的治疗效果，显著提高患者的运动能力。但由于细胞在移植过程中，细胞处于游离状态及注射过程中针头剪切力的存在，会极大降低细胞在组织中存活率。目前经临床审批通过的神经元绝大多数是由胚胎干细胞悬浮分化诱导所得，其自身增殖分化过程均为悬浮状态，不贴附于材料，这进一步增加了移植难度。因此，开发一种可注射、促进神经元黏附、提高其体内存活率的微凝胶是研究人员需要解决的首要问题。微流控技术是将数十到数百个微米级孔道集成，向其注入少量液体，对其进行系统的操控和控制，微流体液滴是基于微流控技术，构筑“Y、T、十字”等微结构孔道本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多巴胺修饰的明胶微球的制备方法，其步骤如下：/n(1)4-(二甲氨基)吡啶与甲基丙烯酸甘油酯修饰的明胶预聚体的制备：将8～15g明胶与1～2g的4-(二甲氨基)吡啶溶于40～60℃、80～150mL的二甲基亚砜中，待充分溶解后，在N

【技术特征摘要】
1.一种多巴胺修饰的明胶微球的制备方法，其步骤如下：
(1)4-(二甲氨基)吡啶与甲基丙烯酸甘油酯修饰的明胶预聚体的制备：将8～15g明胶与1～2g的4-(二甲氨基)吡啶溶于40～60℃、80～150mL的二甲基亚砜中，待充分溶解后，在N2保护的环境下向其中加入3～5mL的甲基丙烯酸缩水甘油酯，反应60～80小时后取出倒入渗析带，在30～50℃下去离子水渗析2～4天，将得到的渗析液冻干后放入-90～-70℃环境保存，得到4-(二甲氨基)吡啶与甲基丙烯酸甘油酯修饰的明胶预聚体；
(2)微流体液滴芯片制备：微流体液滴芯片经基片处理、旋涂光刻胶、紫外掩模版曝光、等离子刻蚀、聚二甲基硅氧烷翻模、孔道键合等步骤制备得到；孔道结构由水相入口及水相输运孔道、油相入口及两条对称分布在水相输运孔道两侧、距离水相输运孔道最大平行距离为6～8mm的油相输运孔道、液滴出口及液滴输运孔道三部分组成，其中水相入口与油相入口距离为8～10mm，水相入口与液滴出口距离为2～3cm，单条油相输运孔道与水相输运孔道交叉处的夹角为60°，油相入口、水相入口和液滴出口在同一直线上，孔道高度为50～100μm；水相输运孔道为宽度100～200μm，长度6～8mm的直线型孔道；油相输运孔道为宽度100～200μm，长度2～3cm的折线型孔道；液滴输运孔道为宽度300～500μm，长度3～4cm的正弦曲线型孔道；
(3)将步骤(1)所获得的明胶预聚体与光引发剂2959溶于磷酸缓冲溶液(PBS)中，质量分数分别为5～10％与0.5～1％，作为水相从微流体液滴芯片的水相入口通入，流速为200μL～1000μL/h；将油相从油相入口通入，流速为400μL/h～2000μL/h；液体通入后，水相与油相在孔道交叉处相遇进而发生微乳化，水相被油相切割形成微米级液滴，经液滴输运孔道由液滴出口流出，得到明胶预聚体微球；
(4)将步骤(3)得到的明胶预聚体微球经紫外光灯曝光3min～5min后，依次经矿物油、含有TWEEN20的PBS溶液、PBS溶液清洗，然后加入到多巴胺的Tri-HCl缓冲溶液中浸泡12h～72h，取出后再经PBS溶液充分清洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：张俊虎，唐晓铎，孙漪涵，杨柏，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22