C-P串联表达重组蛋白及其基因、制备方法、应用、C肽检测试剂盒技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别涉及一种C‑P串联表达重组蛋白及其基因、制备方法、应用、C肽检测试剂盒。该C‑P串联表达重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。本发明专利技术使用体外合成C‑P多肽或选择人C‑P的氨基酸对应的核酸序列进行重组表达，在制备/表达之前将C‑P氨基酸对应序列串联后表达出融合两分子C‑P氨基酸的串联C‑P蛋白，制备之后其C‑P的稳定性得到显著提高。

C-P tandem expression of recombinant protein and its gene, preparation method, application, C-peptide detection kit

【技术实现步骤摘要】
C-P串联表达重组蛋白及其基因、制备方法、应用、C肽检测试剂盒
本专利技术涉及生物
，特别涉及一种C-P串联表达重组蛋白及其基因、制备方法、应用、C肽检测试剂盒。
技术介绍
C肽(C-P)是胰岛β细胞的分泌产物，它与胰岛素有一个共同的前体—胰岛素原。一个分子的胰岛素原在特殊的作用下，裂解成一个分子的胰岛素和一个分子的C肽，因此在理论上C肽和胰岛素是等同分泌的，血中游离的C肽生理功能尚不很清楚，但C肽不被肝脏破坏，半衰期较胰岛素明显为长，故测定C肽水平更能反应β细胞合成与释放胰岛素功能。对已经用胰岛素治疗的病人，体内产生的胰岛素抗体可干扰胰岛素测定；同时现在采用的放免法测定胰岛素，也分辨不出是内生的还是外源性胰岛素，给了解β细胞的功能带来困难，而C肽与胰岛素之间有相当稳定的比例关系，且不受胰岛素抗体的干扰，注射的外源性胰岛素又不含C肽，所以测定血中C肽水平，可以反映内生胰岛素的水平，即可了解β细胞的功能。检测C肽对糖尿病预防和治疗具有重要的临床意义：(1)测定C肽，有助于糖尿病的临床分型，有助于了解患者的胰岛功能。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种C-P串联表达重组蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种C-P串联表达重组蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNO：5所示。


2.编码权利要求1所述C-P串联表达重组蛋白的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO：6所示。


3.权利要求1所述C-P串联表达重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括：以SEQIDNO：6所示基因为模板，使用SEQIDNO：7和SEQIDNO：9所示的引物组进行PCR扩增，扩增产物经过BamHI和NotI双酶切后，构建到C-P-F1/R2-pet32a中，筛选阳性克隆菌，提取质粒后导入表达宿主细胞，经IPTG诱导表达出目的蛋白，经纯化后获得C-P串联表达重组蛋白。

【专利技术属性】
技术研发人员：赵巧辉，李桂林，徐延伟，付光宇，
申请(专利权)人：郑州伊美诺生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41