一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法技术

本发明专利技术属于分子生物学技术领域，具体涉及一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法。本发明专利技术根据兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的保守基因序列设计的特异性引物，并进一步优化建立了适宜于快速准确进行兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌检测的多重PCR扩增方法。该方法可特异性地检测出混合感染的兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌，检测成本低、效率高，适用于相关临床病例的快速诊断及流行病学调查。

A multiplex PCR method for the detection of Klebsiella pneumoniae, Salmonella and Bordetella in rabbits

【技术实现步骤摘要】
一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法
本专利技术涉及分子生物学领域
，具体涉及一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法。
技术介绍
兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌均为革兰氏阴性菌，血清型多且宿主范围广，给养殖业带来严重的危害和巨大损失，同时也危及公共卫生安全。兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的常用检测方法有传统分离鉴定、免疫学方法、分子生物学方法等。传统分离鉴定、免疫学方法检测过程费时费力，且灵敏度较低。PCR应用已较为广泛，随着多种细菌性疾病混合感染情况的日益加重，多重PCR检测方法得到快速发展和应用，该技术检测成本低、效率高，可真正实现快速核酸检测。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术的目的是提供一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供一种用于检测兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的遗传标记物，其具有SEQIDNO.7-NO.9所示的序列。...

【技术保护点】
1.一种用于检测兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的遗传标记物，其特征在于，其具有SEQ ID NO.7-NO.9所示的序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的遗传标记物，其特征在于，其具有SEQIDNO.7-NO.9所示的序列。


2.用于特异性扩增权利要求1所述的遗传标记物的PCR引物对，其特征在于，所述PCR引物对的核苷酸序列分别如SEQIDNO.1-NO.6所示。


3.权利要求2所述的PCR引物对在制备检测兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的试剂盒中的应用。


4.一种检测兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求2所述的PCR引物对。


5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有：2×TaqPCRMasterMix、模板、ddH2O。


6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的工作程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s；55℃退火30s；72℃延伸40s，30个循环；72℃延伸10min。


7.一种检测兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄兵，马秀丽，姜亦飞，李玉峰，于可响，刘存霞，胡峰，郭效珍，史玉颖，刘玉山，
申请(专利权)人：山东省农业科学院家禽研究所山东省无特定病原鸡研究中心，
类型：发明
国别省市：山东;37