【技术实现步骤摘要】
一种提取骨髓中蛋白质的方法
本专利技术涉及蛋白质提取
,尤其涉及一种提取骨髓中蛋白质的方法。
技术介绍
骨髓为存在于骨松质腔隙和长骨骨髓腔内,由多种类型的细胞和网状结缔组织构成,根据其结构不同分为红骨髓和黄骨髓,为柔软富有血液的组织。在对骨髓进行研究的过程中,涉及到对骨髓中蛋白质的提取,传统提取蛋白质的方法在应用到骨髓蛋白质的提取时,存在着操作麻烦、不便,以及不利于实现骨髓蛋白质的快速提取的问题。为此,我们提出了一种提取骨髓中蛋白质的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种提取骨髓中蛋白质的方法。为了实现上述目的,本专利技术采用了如下技术方案:一种提取骨髓中蛋白质的方法,包括以下步骤:S1:将骨髓组织收集至容器内,并放在0-10摄氏度的低温下进行骨髓组织内细胞的冷冻式灭杀;S2:向进行细胞灭杀后的骨髓组织中加入盐溶液,并使用破碎机进行破碎,破碎后形成骨髓浆液;S3:进一步的向骨髓浆液中加入碱性蛋白酶,待骨髓浆液的PH值 ...
【技术保护点】
1.一种提取骨髓中蛋白质的方法,其特征在于,包括以下步骤:/nS1:将骨髓组织收集至容器内,并放在0-10摄氏度的低温下进行骨髓组织内细胞的冷冻式灭杀;/nS2:向进行细胞灭杀后的骨髓组织中加入盐溶液,并使用破碎机进行破碎,破碎后形成骨髓浆液;/nS3:进一步的向骨髓浆液中加入碱性蛋白酶,待骨髓浆液的PH值处于8-10时,停止碱性蛋白酶的加入,进而获得可实现蛋白质浸提的骨髓蛋白质浸提液;/nS4:将步骤S3获得的骨髓蛋白质浸提液处在46-52摄氏度下进行浸提,浸提时间为40-60分钟,此时骨髓蛋白质浸提液中的蛋白质被浸出;/nS5:调节蛋白质被浸出的骨髓蛋白质浸提液呈酸性, ...
【技术特征摘要】
1.一种提取骨髓中蛋白质的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:将骨髓组织收集至容器内,并放在0-10摄氏度的低温下进行骨髓组织内细胞的冷冻式灭杀;
S2:向进行细胞灭杀后的骨髓组织中加入盐溶液,并使用破碎机进行破碎,破碎后形成骨髓浆液;
S3:进一步的向骨髓浆液中加入碱性蛋白酶,待骨髓浆液的PH值处于8-10时,停止碱性蛋白酶的加入,进而获得可实现蛋白质浸提的骨髓蛋白质浸提液;
S4:将步骤S3获得的骨髓蛋白质浸提液处在46-52摄氏度下进行浸提,浸提时间为40-60分钟,此时骨髓蛋白质浸提液中的蛋白质被浸出;
S5:调节蛋白质被浸出的骨髓蛋白质浸提液呈酸性,此时骨髓蛋白质浸提液中浸出的蛋白质实现沉淀析出;
S6:使用离心设备对步骤S5中沉淀析出蛋白质后的骨髓蛋白质浸提液进行10000-12000r/min的离心,在持续5-7分钟的离心后获得离心液,此时使用透析膜对离心液进行透析,即得到盐蛋白;
S7:对步骤S6获得的盐蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴柳松,冯永怀,彭志元,易呈风,蔡雨希,
申请(专利权)人:遵义医学院附属医院,
类型:发明
国别省市:贵州;52
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