【技术实现步骤摘要】
一种将间充质干细胞转分化为精子的方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种将间充质干细胞转分化为精子的方法。
技术介绍
不孕不育症是全球性的医学和社会问题，全球约有10％-15％的育龄夫妻罹患不孕不育症，其中男性因素又占比约50％。世界卫生组织预言不育症、癌症、心血管疾病将成为21世纪危害人类健康最严重的三大疾病。近年来随着药物治疗的进展及辅助生育技术(Assistedreproductivetechology，ART)的推广与成熟，很多不孕不育夫妇圆了成为父母的梦想。然而，很多不育症的男性患者并没能得到根本上的治疗，同时还有相当一部分不育症患者无法通过传统的药物治疗或ART来解决生育问题，究其原因是这部分患者自身不能产生具有正常功能的生殖细胞或健全的单倍体精子细胞。因此，研究精子发生发展过程中相关分子的调控机制，寻找患者自身来源的间充质干细胞使其发育成有功能性的生殖细胞用于男性不育症的精准治疗，是目前男性不育治疗的研究热点。现有的研究结果已证明：间充质干细胞具有分化为男性生殖细胞的能力，目前多种...
【技术保护点】
1.一种将间充质干细胞转分化为精子的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n步骤一，将转录因子FOXO1通过转染的方式导入间充质干细胞，并对转染后的所述间充质干细胞进行培养；/n步骤二，培养得到稳转株后，将培养基换成诱导培养基继续进行诱导培养得到所述精子；/n其中，所述诱导培养基的配制方法为：基础培养基为DMEM/F-12，使用前添加15％FBS、2mM谷氨酰胺、0.1mM非必需氨基酸、0.1mM 2-巯基乙醇、10ng/ml白细胞抑制因子、10ng/ml胶质细胞源性神经营养因子、10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子、10ng/mL重组人干细胞因子和2μM视黄酸。/n
【技术特征摘要】
1.一种将间充质干细胞转分化为精子的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，将转录因子FOXO1通过转染的方式导入间充质干细胞，并对转染后的所述间充质干细胞进行培养；
步骤二，培养得到稳转株后，将培养基换成诱导培养基继续进行诱导培养得到所述精子；
其中，所述诱导培养基的配制方法为：基础培养基为DMEM/F-12，使用前添加15％FBS、2mM谷氨酰胺、0.1mM非必需氨基酸、0.1mM2-巯基乙醇、10ng/ml白细胞抑制因子、10ng/ml胶质细胞源性神经营养因子、10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子、10ng/mL重组人干细胞因子和2μM视黄酸。
2.根据权利要求1所述的一种将间充质干细胞转分化为精子的方法，其特征在于，将转录因子FOXO1通过慢病毒转染的方式导入所述间充质干细胞，包括如下步骤：
步骤一，计算每孔加入携带有FOXO1基因的慢病毒的添加量，然后将所述慢病毒加入含有间充质干细胞的培养基中，再添加促转染剂，进行转染；
步骤二，转染一段时间且细胞已较好地恢复后，去掉原培养基，换用筛选培养基进行筛选培养一段时间，获得稳定细胞株。
3.根据权利要求2所述的一种将间充质干细胞转分化为精子的方法，其特征在于，步骤一中所述促转染剂为聚凝胺。
4.根据权利要求2所述的一种将间充质干细胞转分化为精子的方法，其特...
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