【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于分化间充质干细胞的方法
本专利技术涉及用于间充质干细胞(MSC)的扩增和/或分化的方法,涉及MSC衍生的细胞和细胞群体,并且涉及包含此类细胞和细胞群体的产品、方法和用途。
技术介绍
能够经历成骨分化的干细胞、定向于成骨分化的细胞或具有骨形成能力的细胞的移植是治疗骨相关疾病的有前途的途径,特别是当治疗需要产生新骨组织时。先前已经将间充质干细胞(MSC)用于治疗骨疾患(Gangji等,2005ExpertOpinBiolTher5:437-42)。然而,尽管可以移植这种相对未分化的干细胞,但它们不定向成骨细胞谱系,因此相当大比例的这种移植的干细胞可能最终不能有助于形成所需的骨组织。此外,这种干细胞的量通常不令人满意。WO2007/093431涉及一种体外扩增分离的MSC的方法,其产生显示成骨细胞表型的细胞。在所述方法中,在血清或血浆和碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)存在下培养人MSC。WO2009/087213涉及用于从人MSC体外或离体获得骨原细胞、成骨细胞或成骨细胞表型细胞的方法,其包括使所述 ...
【技术保护点】
1.从间充质干细胞(MSC)获得MSC衍生的细胞的方法,包括使MSC在体外或离体与成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、转化生长因子β(TGFβ)和浓度至少为0.01IU/ml的肝素或其衍生物或类似物接触。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171020 EP 17197605.31.从间充质干细胞(MSC)获得MSC衍生的细胞的方法,包括使MSC在体外或离体与成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、转化生长因子β(TGFβ)和浓度至少为0.01IU/ml的肝素或其衍生物或类似物接触。
2.根据权利要求1所述的方法,包括以下步骤:
(a)在包含FGF-2、TGFβ和浓度为至少0.01IU/ml的肝素或者其衍生物或类似物的培养基中培养从受试者的生物样品中回收的MSC;
(b)去除非贴壁物质,并在含有FGF-2、TGFβ和浓度至少为0.01IU/ml的肝素或其衍生物或类似物的培养基中进一步培养贴壁细胞,从而获得所述MSC衍生的细胞。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中TGFβ选自TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、以及它们的混合物;优选地,其中TGFβ是TGFβ1。
4.用于从MSC获得具有改善的移植特性的MSC衍生的细胞的方法,该方法包括尺寸减小步骤,其中所述尺寸减小步骤的特征在于使MSC或MSC衍生的细胞在体外或离体与浓度为至少0.01IU/ml的肝素或其衍生物或类似物接触。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中:
-肝素或其衍生物或类似物的浓度为至少0.05IU/ml,优选约0.1IU/ml;和/或
-肝素或肝素衍生物或其类似物,选自未分级的肝素(UFH);低分子量肝素(LMWH),如依诺肝素(enoxaparin)、达肝素(dalteparin)、那屈肝素(nadroparin)、亭扎肝素(tinzaparin)、舍托肝素(certoparin)、瑞肝素(reviparin)、阿地肝素(ardeparin)、帕肝素(parnaparin)、贝米肝素(bemiparin)或其混合物;类肝素(heparinoid),比如硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素、硫酸软骨素、硫酸acharan、硫酸角质素或其混合物,如达那肝素(danaparoid);肝素盐;类肝素盐;肝素片段;类肝素片段;和它们的混合物。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中悬浮液中至少60%的所述MSC衍生的细胞具有等于或小于25μm的直径(D60≤25μm),和其中悬浮液中至多5%的所述MSC衍生的细胞具有大于35μm的直径。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中所述MSC衍生的细胞是骨成软骨细胞谱系,优选成骨细胞谱系。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中另外使所述MSC或MSC衍生的细胞接触...
【专利技术属性】
技术研发人员:S彼得里,XM阮,E巴斯蒂亚内利,S埃纳,PY拉吕埃勒,I泰特加特,
申请(专利权)人:骨治疗股份公司,
类型:发明
国别省市:比利时;BE
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