一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法，依次包括以下步骤：获取高原林蛙皮肤，然后在固定液中固定，再剪取得固定皮肤；将固定皮肤用二甲苯透明，然后浸入液体石蜡浸蜡，再包埋在石蜡中，最后；对冷藏后的皮肤进行切片，再贴片后烤片；将烤片用二甲苯洗片，然后用梯度乙醇进行洗片，最后用双蒸水洗片；将切片用苏木精染色，用清水洗净后再用伊红染色，最后用清水洗净，得高原林蛙皮肤石蜡切片。本发明专利技术制片过程操作简单便捷，可以快速的获取高原林蛙皮肤石蜡切片，且切片质量较好，光学显微镜下可以清晰的观察到皮肤组织结构形态，有效解决了切片质量较差、染色效果差和结构不完整的问题。

Preparation of paraffin section of skin of Rana altiplana

【技术实现步骤摘要】
一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法
本专利技术涉及切片制备
，具体涉及一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法。
技术介绍
高原林蛙(Ranakukunoris)是青藏高原特有的两栖类动物，已适应青藏高原高海拔缺氧、强紫外线的自然环境。皮肤作为两栖类动物抵御外来有害物质侵袭，调节渗透压、维持体内环境稳定的主要器官，对两栖类适应生态环境具有重要的意义。对两栖类皮肤结构的研究主要基于石蜡切片和H.E染色技术，目前国内外许多学者采用石蜡切片技术对两栖类动物皮肤结构做了大量的研究，但有关青藏高原东北部地区高原林蛙的研究还未见诸报道。且高原林蛙皮肤较薄，现有的石蜡切片技术很难切出符合要求的石蜡切片，操作复杂繁琐，所得切片质量较差，结构不完整，染色效果较差，无法清楚的观察其组织结构，为后续研究带来困难。
技术实现思路
针对现有技术中的上述不足，本专利技术提供了一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法，制片过程操作简单便捷，可以快速的获取高原林蛙皮肤石蜡切片，且切片质量较好，光学显微镜下可以清晰的观察到皮肤组织结构形态，有效解决了切片质量较差、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法，其特征在于，依次包括以下步骤：/n(1)获取高原林蛙皮肤，然后在固定液中固定20～26h，再剪取，得固定皮肤；/n(2)将步骤(1)所得固定皮肤用100vt％二甲苯透明1～3次，每次20～40min，然后浸入50～70℃的液体石蜡，浸蜡1～3次，每次5～7h，再包埋在石蜡中，最后在3～5℃温度下冷藏10～14h；/n(3)对步骤(2)冷藏后的皮肤进行切片，再贴片后在40～45℃温度下烤片22～26h；/n(4)将步骤(3)所得烤片用100vt％二甲苯洗片4～6min，然后用梯度乙醇进行洗片，每次洗片4～6min，最后用双蒸水洗片4～6min；/n(5)将...

【技术特征摘要】
1.一种高原林蛙皮肤石蜡切片的制备方法，其特征在于，依次包括以下步骤：
(1)获取高原林蛙皮肤，然后在固定液中固定20～26h，再剪取，得固定皮肤；
(2)将步骤(1)所得固定皮肤用100vt％二甲苯透明1～3次，每次20～40min，然后浸入50～70℃的液体石蜡，浸蜡1～3次，每次5～7h，再包埋在石蜡中，最后在3～5℃温度下冷藏10～14h；
(3)对步骤(2)冷藏后的皮肤进行切片，再贴片后在40～45℃温度下烤片22～26h；
(4)将步骤(3)所得烤片用100vt％二甲苯洗片4～6min，然后用梯度乙醇进行洗片，每次洗片4～6min，最后用双蒸水洗片4～6min；
(5)将步骤(4)所得切片用苏木精染色2～4min，用清水洗净后再用伊红染色4～6min，最后用清水洗净，得高原林蛙皮肤石蜡切片。


2.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：张湑泽，沈迎芳，彭飞，侯业茂，孙玉奇，
申请(专利权)人：青海民族大学，
类型：发明
国别省市：青海;63