一种利用CRISPR-Cas9条件性敲除肝脏HO-1基因动物模型的构建方法技术

本发明专利技术提供了一种利用CRISPR‑Cas9条件性敲除肝脏HO‑1基因动物模型的构建方法，属于基因工程技术领域，包括以下步骤：1)将sgRNA序列、Cas9基因序列和donor基因序列导入小鼠的受精卵中，得到含有打靶序列的F0代小鼠；2)将所述步骤1)得到的含有打靶序列的F0代小鼠与野生型小鼠杂交，得到含有打靶序列的杂合性小鼠；3)将所述步骤2)得到的含有打靶序列的杂合性小鼠与Alb‑Cre阳性小鼠杂交，得到敲除肝脏HO‑1基因动物模型。

【技术实现步骤摘要】
一种利用CRISPR-Cas9条件性敲除肝脏HO-1基因动物模型的构建方法
本专利技术属于基因工程
，尤其涉及一种利用CRISPR-Cas9条件性敲除HO-1基因动物模型的构建方法。
技术介绍
血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1，HO-1，Hmox1)是血红素代谢的起始酶和限速酶，主要功能是催化血红素产生胆红素、一氧化碳和游离铁，减轻血红素对细胞膜的直接损伤及其产生的氧自由基导致的细胞损伤。目前研究表明，HO-1表达增加为机体对抗氧化应激和脂质过氧化反应的一种保护机制，在氧中毒、脂多糖、缺血再灌注等多种肝损伤中发挥保护肝细胞、抗炎和抗纤维化作用。HO-1缺陷小鼠应激能力下降，可导致肝细胞发生炎症、坏死。采用胆碱蛋氨酸缺乏(methionine-cholinedeficient，MCD)饮食分别喂养C57BL/6J小鼠4周、8周诱导非酒精性脂肪性肝炎/肝纤维化模型，结果发现模型组小鼠肝组织中HO-1表达明显上调，表明在非酒精性脂肪性肝炎/肝纤维化中存在HO-1的激活，其表达和肝细胞的炎性坏死、纤维增生及细胞凋亡等密切相本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用CRISPR-Cas9条件性敲除肝脏HO-1基因动物模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)将sgRNA序列、Cas9基因序列和donor基因序列导入小鼠的受精卵中，得到含有打靶序列的F0代小鼠；/n2)将所述步骤1)得到的含有打靶序列的F0代小鼠与野生型小鼠杂交，得到含有打靶序列的杂合性小鼠；/n3)将所述步骤2)得到的含有打靶序列的杂合性小鼠与Alb-Cre阳性小鼠杂交，得到敲除肝脏HO-1基因动物模型。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用CRISPR-Cas9条件性敲除肝脏HO-1基因动物模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将sgRNA序列、Cas9基因序列和donor基因序列导入小鼠的受精卵中，得到含有打靶序列的F0代小鼠；
2)将所述步骤1)得到的含有打靶序列的F0代...

【专利技术属性】
技术研发人员：南月敏，杜静华，王荣琦，李冬冬，苑喜微，
申请(专利权)人：河北医科大学第三医院，
类型：发明
国别省市：河北;13