【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统及应用
本专利技术属于生物
,涉及一种基因编辑方法,尤其涉及一种基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统及其应用。
技术介绍
核糖核酸(RibonucleicAcid,RNA),是存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体,在生命过程中发挥至关重要的作用,主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达,是遗传信息向表型转化过程中的桥梁。表观转录组学(Epitranscriptomics)是近来兴起的热门领域之一,主要研究RNA所携带的化学修饰对基因表达的影响。迄今为止,在RNA上已发现了一百多种化学修饰。这些修饰大量分布在非编码RNA,特别是rRNA,tRNA和snRNA上,为ncRNA在翻译与剪接中发挥正常功能所必需。其中m6A(N6-methyladenosine)及A-to-I(inosine)是最常见的两种RNA修饰方式,这些修饰也分布在真核生物mRNA上,影响mRNA的代谢与功能。特别是伴随着许多mRNA修饰酶(Writer)、去修饰酶(Eraser)和修饰识别 ...
【技术保护点】
1.一种基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统,其特征在于,所述系统包括靶向元件、编辑效应元件和向导元件;/n其中,所述靶向元件包含刺激响应蛋白A和失活型Cas13酶(dCas13),所述编辑效应蛋白包括刺激响应蛋白B和RNA编辑效应蛋白;/n所述刺激响应蛋白A与刺激响应蛋白B在刺激作用下相互结合,刺激消失后解除结合。/n
【技术特征摘要】
1.一种基于CRISPR-Cas13的RNA编辑系统,其特征在于,所述系统包括靶向元件、编辑效应元件和向导元件;
其中,所述靶向元件包含刺激响应蛋白A和失活型Cas13酶(dCas13),所述编辑效应蛋白包括刺激响应蛋白B和RNA编辑效应蛋白;
所述刺激响应蛋白A与刺激响应蛋白B在刺激作用下相互结合,刺激消失后解除结合。
2.根据权利要求1所述的RNA编辑系统,其特征在于,所述刺激包括光刺激、化学刺激或磁场刺激;
优选地,所述光刺激的光包括蓝光、紫外光、近红外或绿光中的任意一种;
优选地,当所述刺激为光刺激时,所述刺激响应蛋白A和刺激响应蛋白B为光敏蛋白;
所述光敏蛋白包括CIB1或其截短体CIBN、CRY2或其截短体CRY2PHR、pMag、nMag、Lov2、PhyB、PIF3、BphP1、PpsR2、Q-PAS1、UVR8或COP1中的任意一种或至少两种的组合。
3.根据权利要求1或2所述的RNA编辑系统,其特征在于,所述失活型Cas13酶包括dCas13a、dCas13b或dCas13d中的任意一种或至少两种的组合;
优选地,所述Cas13酶为dCas13b。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的RNA编辑系统,其特征在于,所述RNA编辑效应蛋白包括去甲基化酶或甲基化酶中的任意一种;
优选地,所述去甲基化酶包括FTO或ALKBH5去甲基化酶中的任意一种;
优选地,所述甲基化酶包括M3M14甲基化转移酶结构域;
优选地,所述向导元件为Cas13b向导RNA。
5.根据权利要求1-4中任一...
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