灰树花新菌株制造技术

本发明专利技术涉及一株灰树花新菌株，保藏编号为：CGMCC No.18143，所述灰树花新菌株与亲本菌株相比，具有单产量高、生物学效率高、子实体多糖含量高，耐高浓度CO

A new strain of Grifola frondosa

【技术实现步骤摘要】
灰树花新菌株
：本专利技术涉及一株灰树花新菌株，属于食用菌

技术介绍
：灰树花Grifolafrondosa(Dicks.)Gray是一种珍稀食、药两用菌，具有独特的口感风味和高效的医疗保健效果。癌症目前是威胁我国居民健康的重大疾病之一，在城市地区是首位的死亡原因。我国癌症发病率呈逐年上升趋势，寻求有效的癌症预防措施迫在眉睫。二十一世纪是大健康产业飞速发展的时期，人们越来越重视通过日常饮食预防疾病的产生。灰树花[Grifolafrondosa(Dicks.)Gray]又名栗子蘑、舞茸(日本)等，是一种珍稀食、药两用菌，其肉质脆嫩，味如鸡丝，富含蛋白质、维生素、矿物质以及多糖、甾醇、生物碱、三萜等多种生物活性物质。灰树花多糖是所有真菌生物活性物质中抗肿瘤活性最强的，对小鼠S180实体瘤的抑制率为98％，肿瘤完全消退的小鼠为7/10。灰树花多糖被开发成药品和保健品用于癌症的治疗已有20多年。灰树花被日本人誉为“真菌之王，抗癌奇葩”，最早进行灰树花人工栽培的是日本人伊藤一雄，日本在20世纪70年代开始商业化栽培，现已实现工厂化、周年化生产，处于世界领先水平，北美也有报道，国内以浙江和河北为主，在福建、山东、黑龙江、四川、北京、云南等地区都有了规模化栽培，主要是“小拱棚仿野生栽培法”和“菌棒式栽培及覆土二次出菇”的传统栽培模式，工厂化生产尚未规模化。目前，国内灰树花栽培菌种主要来自野生驯化或日本引进，存在着适应性差、抗杂菌能力弱、转化率低等不足，不能直接用于工厂化生产，更为主要的问题是，目前的菌种存在CO2耐受差的问题。灰树花是属于对气态CO2敏感的品种，高浓度CO2可导致原基不分化或形成畸形菇，造成减产甚至绝产。由于灰树花栽培过程中对湿度要求高，但工厂化生产时主要以通风换气的方式降低CO2浓度，过于频繁通风换气会导致湿度急剧下降，湿度和CO2浓度的协调对菇房设施设备和环境参数的优化组合提出很高的要求，因此灰树花工厂化生产尚未规模化，急需选育能耐受高浓度CO2的工厂化专用新品种。长期以来，由于食用菌产业发展面临的严峻压力，育种目标多注重产量因素，忽视了功能性指标。灰树花多糖具高效的医疗保健效果，选育高多糖的工厂化专用品种，提高品种的功能效应，对满足国民营养健康需求，加快推进食用菌供给侧结构优化和品种换代改良具有重大意义。孙培龙等(2001)采用硫酸蒽酮法测定的灰树花子实体多糖含量为3.5％，曹秀明等(2019)采用水提醇沉法提取的木屑栽培的灰树花子实体多糖含量为4.2867％，灰树花子实体多糖含量较低。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株单产量高、生物学效率高、子实体多糖含量高、耐高浓度CO2的灰树花新菌株86(T5Q9)。一株灰树花Grifolafrondosa(Dicks.)Gray新菌株86(T5Q9)，该菌株已经于2019年7月11日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCCNo.18143。本专利技术涉及灰树花新菌株86(T5Q9)的形态特征如下：子实体朵型大，分枝多，重叠成覆瓦状，菇形紧凑，朵长14.6～21cm，朵宽11.1～18cm，朵高6.7～11.2cm；菌盖匙形至扇形，表面灰黑色，有放射状条纹，边缘薄成波状，肉质，菌盖长26.49～34.42mm，宽18.99～25.25mm；菌肉白色，厚1.2～1.93mm；菌盖背面布满白色菌管，长0.5～0.96mm，管口多角形；菌柄白色，粗短充实，不正圆柱形，长4.39～7.13mm，宽3.14～6.35mm；孢子卵形至椭圆形，无色，光滑，4.39～5.21×5.27～6.31μm。上述灰树花新菌株86(T5Q9)的栽培方法，具体步骤如下：1)液体菌种的制备将活化的灰树花新菌株86(T5Q9)，接种到真菌液体培养基中，25℃下，140～160r·min-1培养14～16d，制得液体菌种；2)菌菇栽培制备培养基料包，然后灭菌，待培养基料包温度降至25℃以下，使用步骤1)制备的液体菌种进行接种，接种量为(8～11)mL/kg，封好口，置于培养室20～25℃恒温避光培养，相对湿度为60～70％，培养40～50d后，菌丝长满菌袋且生理成熟变浓白后，转入出菇室进行出菇管理，在菌包上割口，出菇室内温度18～20℃，湿度90～95％，白天光照强度200～500lx，夜间无光照，CO2浓度在1000mL/m3以下，培养至采收；所述步骤2)中培养基的组成按重量份计：棉籽壳30～45份、栗木屑35～45份、麸皮10～20份、红糖1～2份、石膏1～2份，补水至含水量达60～65％，pH自然。根据本专利技术优选的，步骤1)中的活化培养基为PDA加富培养基，所述培养基组成为：土豆200g/L、麸皮10g/L、酵母粉2g/L、磷酸二氢钾1g/L、无水硫酸镁1g/L、蛋白胨3g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L，余量水。进一步优选的，步骤1)中的液体培养基为不加琼脂的PDA加富培养基。根据本专利技术优选的，步骤1)中的活化培养温度为25～28℃，培养时间为14～16d。根据本专利技术优选的，步骤2)中培养基的组成按重量份计：棉籽壳42份、栗木屑40份、麸皮16份、红糖1份、石膏1份，补水至含水量达65％，pH自然。根据本专利技术优选的，步骤2)中培养基料包是使用聚丙烯袋(18cm×35cm)，每袋装料1.2kg，料高19cm，袋口套环制得，灭菌条件为121℃，2h。进一步优选的，步骤2)中培养基料包的接种量为8.5mL/kg。根据本专利技术优选的，步骤2)中割口方式为在菌袋壁上选取菌丝浓密处割“∨”形口出菇，每边长3cm，割口朝上。根据本专利技术优选的，步骤2)中的采收时间为子实体长到七成熟，即菌盖呈扇形，形成管孔时采收。本专利技术的有益效果与现有技术相比，本专利技术涉及的灰树花新菌株86(T5Q9)的优点：1、单产量高，灰树花新菌株86(T5Q9)的平均单产量比亲本菌株梯灰1号提高74.50％，比亲本菌株庆灰151提高20.53％。2、生物学效率高，灰树花新菌株86(T5Q9)的生物学效率比亲本菌株梯灰1号提高22％，比亲本菌株庆灰151提高8.78％。3、子实体多糖含量高，灰树花新菌株86(T5Q9)的子实体多糖含量比亲本菌株梯灰1号提高33.52％，比亲本菌株庆灰151提高11.52％。4、耐高浓度CO2，在出菇房通风不良，CO2浓度高的环境条件下，灰树花新菌株86(T5Q9)比亲本菌株梯灰1号和庆灰151原基分化好，灰树花新菌株86(T5Q9)的平均单产量分别是亲本菌株梯灰1号和庆灰151的2倍。附图说明图1灰树花新菌株86(T5Q9)的平板菌落照片；图2亲本菌株庆灰151的平板菌落照片；图3亲本菌株梯灰1号的平板菌落照片；图4灰树花新菌株86(T5Q9)出菇子实体照片；图5亲本菌株梯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株灰树花Grifola frondosa(Dicks.)Gray新菌株86(T5Q9)，于2019年7月11日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCC No.18143。/n

【技术特征摘要】
1.一株灰树花Grifolafrondosa(Dicks.)Gray新菌株86(T5Q9)，于2019年7月11日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCCNo.18143。


2.权利要求1所述灰树花新菌株86(T5Q9)的栽培方法，其特征在于，具体步骤如下：
1)液体菌种的制备：将活化的灰树花新菌株86(T5Q9)，接种到真菌液体培养基中，25℃下，140～160r·min-1培养14～16d，制得液体菌种；
2)菌菇栽培：制备培养基料包，然后灭菌，待培养基料包温度降至25℃以下，使用步骤1)制备的液体菌种进行接种，接种量为(8～11)mL/kg，封好口，置于培养室20～25℃恒温避光培养，相对湿度为60～70％，培养40～50d后，菌丝长满菌袋且生理成熟变浓白后，转入出菇室进行出菇管理，在菌包上割口，出菇室内温度18～20℃，湿度90～95％，白天光照强度200～500lx，夜间无光照，CO2浓度在1000mL/m3以下，培养至采收；
所述步骤2)中培养基的组成按重量份计：棉籽壳30～45份、栗木屑35～45份、麸皮10～20份、红糖1～2份、石膏1～2份，补水至含水量达60～65％，pH自然。


3.如权利要求2所述栽培方法，其特征在于，步骤1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢红艳，宫志远，黄春燕，万鲁长，韩建东，李瑾，姚强，杨鹏，任海霞，王艳，
申请(专利权)人：山东省农业科学院农业资源与环境研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37