一种基于RT-qPCR诊断结核性溃疡的PCR引物组合、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于RT‑qPCR诊断结核性溃疡的PCR引物组合、试剂盒及其应用。并具体公开了CXCL9基因、CXCL10基因在制备诊断结核性溃疡的产品中的应用；还公开了针对结核性溃疡RT‑qPCR诊断的CXCL9基因和CXCL10基因的PCR引物；还公开了PCR引物组合及应用(以U6为内参基因，基于RT‑qPCR技术检测CXCL9基因和/或CXCL10基因表达水平)：当待检血浆中CXCL9的2

PCR primer combination, kit and its application in the diagnosis of tuberculous ulcer based on RT-qPCR

【技术实现步骤摘要】
一种基于RT-qPCR诊断结核性溃疡的PCR引物组合、试剂盒及其应用
本专利技术属于分子生物学
，具体涉及一种用于诊断结核性溃疡的PCR引物组合、试剂盒及其应用。
技术介绍
结核性溃疡(Tuberculouslymphadenitis)是指结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)、牛分枝杆菌和卡介苗(BCG)经各种传播路径侵犯机体局部组织，引起病灶周围软组织、皮下及皮肤的坏死，最终液化破溃所形成的创面，属于肺外结核，约占全部肺外结核的30％～40％，是临床最为常见的一种特异性感染性创面。早期诊断，及时干预是结核病控制的有效手段，然而由于分枝杆菌的数量、毒力、传播途径、发病方式及机体免疫力不同，患者的临床表现、发病部位、皮损形态各异，结核性溃疡的诊断存在相当难度。目前临床上诊断结核性溃疡以脓液抗酸杆菌培养及创面组织病理学检查为金标准，辅以γ-干扰素(IFN-γ)释放试验、结核菌素皮肤试验、结核抗体检测等检测手段。但实际应用中脓液抗酸杆菌培养阳性率极低且培养周期较长；创面组织病理学检查属于有创本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于RT-qPCR诊断结核性溃疡的PCR引物组合，其特征在于，包括检测CXCL9基因的PCR引物、CXCL10基因的PCR引物和U6基因的PCR引物，其中，CXCL9基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，CXCL10基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述CXCL9基因的PCR引物为SEQ ID NO.3所示的CXCL9-F和SEQ ID NO.4所示的CXCL9-R，CXCL10基因的PCR引物为SEQ ID NO.5所示的CXCL10-F和SEQ ID NO.6所示的CXCL9-R，U6基因的PCR引物为SEQ IDNO.7所示的U6-F和SEQ ID NO.8所...

【技术特征摘要】
1.一种基于RT-qPCR诊断结核性溃疡的PCR引物组合，其特征在于，包括检测CXCL9基因的PCR引物、CXCL10基因的PCR引物和U6基因的PCR引物，其中，CXCL9基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，CXCL10基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，所述CXCL9基因的PCR引物为SEQIDNO.3所示的CXCL9-F和SEQIDNO.4所示的CXCL9-R，CXCL10基因的PCR引物为SEQIDNO.5所示的CXCL10-F和SEQIDNO.6所示的CXCL9-R，U6基因的PCR引物为SEQIDNO.7所示的U6-F和SEQIDNO.8所示的U6-R。


2.权利要求1所述的PCR引物组合在制备结核性溃疡诊断产品中的应用，其特征在于，所述产品包括以U6基因作为内参基因，通过RT-qPCR检测血浆样本中CXCL9基因和/或CXCL10基因的表达水平来诊断结核性溃疡的产品。


3.CXCL9基因、CXCL10基因在制备诊断结核性溃疡的产品中的应用，其特征在于，所述产品包括以U6基因作为内参基因，通过RT-qPCR检测血浆样本中CXCL9基因和/或CXCL10基因的表达水平来诊断结核性溃疡的产品，所述CXCL9基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述CXCL10基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


4.一种结核性溃疡诊断试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的CXCL9基因的PCR引物CXCL9-F/CXCL9-R和U6基因的PCR引物U6-F/U6-R，通过RT-qPCR检测血浆样本中CXCL9基因的表达水平来诊断结核性溃疡。


5.根据权利要求4所述的结核性溃疡诊断试剂盒，其特征在于：以U6基因作为内参基因，通过RT-qPCR检测CXCL9基因的表达水平以诊断结核性溃疡...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄子慧，顾宏伟，钱佳燕，张国英，刘万里，施金土，李欣，王旭，朱群，朱敏，颜延凤，陈磊垚，赵璟，张晓阳，孙佳玥，陈晓钰，
申请(专利权)人：南京市中西医结合医院，
类型：发明
国别省市：江苏;32