原位杂交滴片方法技术

本发明专利技术涉及一种原位杂交滴片方法，包括：a)提供用于承载细胞的载体以及待滴片的细胞悬液样本母液；b)向所述载体上滴加第一滴细胞悬液样本c)待所述第一滴细胞悬液样本在所述载体上基本铺展均匀、且其溶剂基本挥发完全后，在所述第一滴细胞悬液样本滴加位置处滴加下一滴细胞悬液样本；如此操作直至完成第n滴细胞悬液样本的滴加，n为≥2的整数；其中，所述第一滴细胞悬液样本至所述第n滴细胞悬液样本的滴加方式均为：将控制按钮处于非按压状态的移液器的吸液嘴插入所述细胞悬液样本母液液面下蘸取0.5μl～2μl的样本并将其放液至所述载体上。

In situ hybridization drop method

【技术实现步骤摘要】
原位杂交滴片方法
本专利技术涉及生物实验
，具体而言，涉及一种原位杂交滴片方法。
技术介绍
目前原位杂交(insituhybridization，ISH)实验室在进行细胞的ISH样本制作时，滴片主要以吸管滴片法和普通加样枪滴片法为主。吸管滴片法要求细胞悬液多，吹打混匀后，用3ml吸管吸取一定体积的悬液，一滴(约50μl)或多滴滴在防脱玻片上(检测1个项目)，待扩散均匀至晾干；普通加样枪滴片法是针对悬液不太少的标本(≥200μl)，用200μl加样枪吹打混匀之后，吸取一定体积的悬液(约50μl)多次一小滴(约10μl)滴在防脱玻片上(检测1个项目)，待扩散均匀至晾干。市面上有多孔玻片，包含10或12个单独的孔，常规性用于少量固定细胞样本的观察。与普通的标准显微镜玻片比，因为细胞被局限于相对较小的表面区域里，因此可以在FISH观察中提供更合适的细胞密度，同时由于细胞数下降，也节约了探针的用量。然而，对于某些样本中丰度很低的样本——例如浆细胞样本——细胞经离心富集后细胞沉淀肉眼不可见，通常只加1滴固定液(约50μl)调成悬液用于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种原位杂交滴片方法，其特征在于，包括：/na)提供用于承载细胞的载体以及待滴片的细胞悬液样本母液；/nb)向所述载体上滴加第一滴细胞悬液样本；/nc)待所述第一滴细胞悬液样本在所述载体上基本铺展均匀、且其溶剂基本挥发完全后，在所述第一滴细胞悬液样本滴加位置处滴加下一滴细胞悬液样本；如此操作直至完成第n滴细胞悬液样本的滴加，n为≥2的整数；/n其中，所述第一滴细胞悬液样本至所述第n滴细胞悬液样本的滴加方式均为：将控制按钮处于非按压状态的移液器的吸液嘴插入所述细胞悬液样本母液液面下蘸取0.5μl～2μl的样本并将其放液至所述载体上。/n

【技术特征摘要】
1.一种原位杂交滴片方法，其特征在于，包括：
a)提供用于承载细胞的载体以及待滴片的细胞悬液样本母液；
b)向所述载体上滴加第一滴细胞悬液样本；
c)待所述第一滴细胞悬液样本在所述载体上基本铺展均匀、且其溶剂基本挥发完全后，在所述第一滴细胞悬液样本滴加位置处滴加下一滴细胞悬液样本；如此操作直至完成第n滴细胞悬液样本的滴加，n为≥2的整数；
其中，所述第一滴细胞悬液样本至所述第n滴细胞悬液样本的滴加方式均为：将控制按钮处于非按压状态的移液器的吸液嘴插入所述细胞悬液样本母液液面下蘸取0.5μl～2μl的样本并将其放液至所述载体上。


2.根据权利要求1所述的原位杂交滴片方法，其特征在于，n为≤20的整数。


3.根据权利要求1所述的原位杂交滴片方法，其特征在于，所述细胞悬液样本中感兴趣的细胞的密度≤12cells/μl。


4.根据权利要求1所述的原位杂交滴片方法，其特征在于，所述吸液嘴插入所述细胞悬液样本液面下1mm～3mm处以蘸取样本。...

【专利技术属性】
技术研发人员：李珂，高东艳，王晓燕，边巴央宗，
申请(专利权)人：上海金域医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31