一种间充质干细胞分泌素的制备方法技术

技术编号:24196363 阅读:83 留言:0更新日期:2020-05-20 11:07
本发明专利技术公开了一种间充质干细胞分泌素的制备方法,将间充质干细胞接种在培养基中,进行恒温培养,温度在37℃,在24~48h后,能够获得培养好的间充质干细胞悬液,将培养好的间充质干细胞悬液放到间充质干细胞培养基液中混合均匀,转入生物反应器中通过培养液对干细胞进行培养,静置培养通过向生物反应器中注入细胞培养基底液和磷酸盐缓冲液可以稀释生物反应器中的培养液,达到安全地持续刺激间充质干细胞细胞分泌蛋白的作用,从而能提高充质干细胞细胞分泌素的产量。

A preparation method of secretory hormone from mesenchymal stem cells

【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞分泌素的制备方法
本专利技术涉及分泌素的制备方法,尤其是涉及一种间充质干细胞分泌素的制备方法。
技术介绍
间充质干细胞是一种多能干细胞,它具有干细胞的所有共性,即自我更新和多向分化能力。在临床应用也最多,与造血干细胞联合应用,可以提高移植的成功率,加速造血重建。当患者接受大剂量化疗后,将间充质干细胞与造血干细胞一同输入,可明显加速患者血细胞恢复时间,且安全无不良反应。间充质干细胞临床应用于解决多种血液系统疾病,心血管疾病,肝硬化,神经系统疾病,膝关节半月板部分切除损伤修复,自身免疫性疾病等方面取得了重大突破,挽救了更多病患的生命。此外,间充质干细胞在神经系统修复及更多方面具有长远的发展前景。间充质干细胞是干细胞的一个研究分支,干细胞是一类具有自我复制和多向分化能力的细胞,它们可以不断地自我更新,并在特定条件下转变成为一种或多种构成人体组织或器官的细胞。干细胞是机体的起源细胞,是形成人体各种组织器官的始祖细胞。间充质干细胞不仅存在于骨髓中,也存在于骨骼肌、骨外膜和骨小梁中。由于它分化的组织类型十分广泛,因此临床应用价值不菲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间充质干细胞分泌素的制备方法,其特征在于:具体的包括以下步骤:/nS1:将间充质干细胞接种在培养基中,进行恒温培养,温度在37℃,在24~48h后,能够获得培养好的间充质干细胞悬液,将培养好的间充质干细胞悬液放到间充质干细胞培养基液中混合均匀,转入生物反应器中通过培养液对干细胞进行培养,静置培养;/nS2:生物反应器中培养2~5h后以30~50r/min的速度均匀搅拌1~2h,并在37℃的恒温状态下,内部气体含量为5%CO2和10%~20%O2的条件下培养10~20天,从而获得间充质干细胞基液,生物反应器内部环境压强恒定为一个标准大气压;/nS3:在生物反应器中将S1所得的干细胞以磷酸...

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞分泌素的制备方法,其特征在于:具体的包括以下步骤:
S1:将间充质干细胞接种在培养基中,进行恒温培养,温度在37℃,在24~48h后,能够获得培养好的间充质干细胞悬液,将培养好的间充质干细胞悬液放到间充质干细胞培养基液中混合均匀,转入生物反应器中通过培养液对干细胞进行培养,静置培养;
S2:生物反应器中培养2~5h后以30~50r/min的速度均匀搅拌1~2h,并在37℃的恒温状态下,内部气体含量为5%CO2和10%~20%O2的条件下培养10~20天,从而获得间充质干细胞基液,生物反应器内部环境压强恒定为一个标准大气压;
S3:在生物反应器中将S1所得的干细胞以磷酸缓冲液2~4次,然后向生物反应器中加入基础培养液DMDM/F12与磷酸缓冲液继续培养12~24h,收集生物反应器中的上清液,得到分泌素原液;
S4:获得的间充质干细胞分泌素原液经70μm孔径细胞滤器过滤后得滤液,然后将滤液1500g速度离心10分钟,取上清液,上清液通过冷冻干燥制得冻干粉末,即获得间充质干细胞分泌素。


2.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞分泌素的制备方法,其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员:阮光萍姚翔潘兴华庞荣清
申请(专利权)人:中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院
类型:发明
国别省市:云南;53

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