生物降解性化合物、脂质粒子、含有脂质粒子的组合物、及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用下述式(1)表示的化合物。Q‑CHR

Biodegradable compounds, lipid particles, compositions containing lipid particles, and kits

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生物降解性化合物、脂质粒子、含有脂质粒子的组合物、及试剂盒
本专利技术涉及具有在细胞内降解的结构的生物降解性化合物、和含有其的脂质粒子。另外，本专利技术还涉及含有该脂质粒子的、用于递送核酸之类的活性剂的组合物及试剂盒。
技术介绍
正在研究各种用于疾病治疗的脂质体。脂质体为由脂质构成的具有纳米级粒径的微胶囊，其内部可以内包各种化合物等，另外生物适合性等也优异，因此对于将治疗药、活性剂选择性递送到生物体内的目标部位而言为理想的材料。在这种目的之下，通常使用平均粒径为100nm以上的大单室脂质体(LUV)，关于构成其膜的材料，已开发出各种材料。这种脂质体可由单一脂质构成。这种情况下，例如脂质使用的是具有头部和键合于头部的疏水部的磷脂，该脂质缔合而形成膜，构成可以内包活性剂等的微胶囊。但是，为了对脂质体赋予优异特性，通常使用脂质混合物来构成脂质体。并且，该脂质混合物含有生物降解性优异的脂质、抑制所形成的脂质体的聚集的脂质、具有抑制内包物漏出的效果的脂质、具有膜融合效果的脂质等的组合。并且，为了进一步提高脂质体的特性，对各脂质进行了研究。例如，对于专门用于基因导入的面向医疗的脂质体而言，优选满足高生物降解性、高生物适合性、高活性剂导入性及低细胞毒性，期望可以构成这种脂质体的脂质。作为这种脂质，已开发了各种化合物，所适用的生物体的状态、想要治疗的疾病也多种多样。希望根据这些条件增加可选择的脂质种类。另外，寻求可以构成具有超过以往脂质体的特性的脂质体的脂质。现有技术文献专利文献专利文献1：日本专利第5893611号专利文献2：日本专利第6093710号
技术实现思路
专利技术要解决的课题针对上述问题，本实施方式提供作为可构成脂质体的脂质的新颖的化合物、使用其的脂质粒子、以及组合物及试剂盒。用于解决问题的手段本实施方式的化合物，其特征在于，如下述式(1)所示，Q-CHR2(1)(式中，Q为含有2个以上叔氮、不含氧的含氮脂肪族基团，R分别独立地为C12～C24的脂肪族基团，至少一个R在其主链中或侧链中含有选自由-C(＝O)-O-、-O-C(＝O)-、-O-C(＝O)-O-、-S-C(＝O)-、-C(＝O)-S-、-C(＝O)-NH-及-NH-C(＝O)-组成的组中的连接基团LR)。另外，实施方式的脂质粒子的特征在于，其含有上述化合物。另外，实施方式的组合物的特征在于，其含有上述脂质粒子和载体。另外，实施方式的试剂盒含有包含上述脂质粒子、和将上述脂质粒子导入细胞的导入剂的组合物。附图说明图1为示出实施例及比较例的、对Jurkat细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图2为示出实施例及比较例的、对MCF-7细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图3为示出实施例及比较例的、对Huh-7细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图4为示出实施例的、对Jurkat细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图5为示出实施例的、对外周血单个核细胞(PBMC)使用脂质粒子时的酶活性的图。图6为示出实施例及比较例的、使用脂质粒子对Jurkat细胞导入RNA时的RNA表达量的图。图7为示出用于比较实施例4-1和实施例4-2的、对MCF-7细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图8为示出用于比较实施例4-1和实施例4-2的、对Huh-7细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图9为示出用于比较实施例4-1和实施例4-2的、对Jurkat细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图10为示出用于比较实施例4-2和实施例4-3的、对MCF-7细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。图11为示出用于比较实施例4-2和实施例4-3的、对Huh-7细胞使用脂质粒子时的酶活性的图。具体实施方式[定义]本实施方式中，在使用～表示数值范围时，只要没有特别限定则这些含有两个端点、并且单位相同。例如，10～25摩尔％表示10摩尔％以上且25摩尔％以下。本实施方式中，“Cx～Cy”及“Cx”等记载表示分子或取代基中的碳数。例如，C1～C6烷基表示具有1以上且6以下的碳的烷基。另外，本实施方式中，卤代烷基是指烷基中的1个以上的氢被氟等卤素取代而成的基团，例如，氟代芳基是指芳基中的1个以上的氢被氟取代而成的基团。本实施方式中，只要没有特别限定则烷基是指：从烷烃的任意的碳上除去一个氢而成的一价基团。并且，烷基这一术语包括直链状或支链状烷基。另外，环烷基是指含有环状结构的烷基。将环状结构上取代有直链状或支链状烷基的基团也称为环烷基。另外，烯基是指：从烯烃的任意的碳上除去一个氢而成的一价基团。另外，烃基是指：1价或2价以上的含有碳及氢、且根据需要含有氧或氮的基团。并且，脂肪族基团为不含芳香环的烃基，可以取链状、支链状或环状中的任一种结构，另外可以为它们的组合。另外，只要没有特别限定则脂肪族基团可以含有不饱和键。进一步地，只要没有特别限定则脂肪族基团可以含有氮、氧、硫、硒、氟、氯、溴等杂原子。另外，脂肪族基团可以为1价基团，也可以为多价基团。另外，芳香族烃基含有芳香环，且根据需要具有脂肪族烃基作为取代基。另外，叔氮是指键合有3个碳的氮。因此，叔氮构成具有供电子性的叔胺结构。[生物降解性脂质化合物]实施方式的化合物为适合作为构成脂质体的脂质的化合物。并且，其疏水部具有生物降解性基团，作为生物降解性脂质化合物起作用。并且，其头部不含阳离子性基团，具有在应用于生物体时可抑制与细胞内的蛋白质结合、毒性低的特征。另外，当脂质体由该脂质化合物构成时，脂质体的表面不为阳离子性，因此对细胞的损伤性降低，核酸等活性剂的导入率提高。这种脂质化合物如下述通式(1)所示。以下有时将式中的Q称为头部、将R称为疏水性基团。Q-CHR2(1)(式中，Q为含有2个以上叔氮、不含氧的含氮脂肪族基团，R分别独立地为C12～C24的脂肪族基团，至少一个R在其主链中或侧链中含有选自由-C(＝O)-O-、-O-C(＝O)-、-O-C(＝O)-O-、-S-C(＝O)-、-C(＝O)-S-、-C(＝O)-NH-及-NH-C(＝O)-组成的组中的连接基团LR)实施方式的化合物的一个特征是头部Q含有2个以上叔氮且不含氧。可以在不损害实施方式的效果的范围内还含有构成未取代氨基、季铵等的氮，优选不含该叔氮以外的氮。另外，头部Q不含氧。因此，头部Q中不含氧基、羟基、羧基、烷氧基、羧化物(carboxylato)等结构。另外，头部Q也可以含有离子性基团，但优选不含极性基团的中性基团。优选的Q的一例可以用下述通式(1-Q)表示。RQ12N-(CRQ22)q1-NRQ1-(CRQ22)q2-＊(1-Q)(式中，RQ1分别独立地为烷基，RQ2分别独立地为氢或烷基，RQ1及RQ2中的任意两个可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化合物，其特征在于，用下述式(1)表示，/nQ-CHR

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180821 JP 2018-1549551.一种化合物，其特征在于，用下述式(1)表示，
Q-CHR2(1)
式中，Q为含有2个以上叔氮、不含氧的含氮脂肪族基团，
R分别独立地为C12～C24的脂肪族基团，至少一个R在其主链中或侧链中含有选自由-C(＝O)-O-、-OC(＝O)-、-O-C(＝O)-O-、-S-C(＝O)-、-C(＝O)-S-、-C(＝O)-NH-及-NH-C(＝O)-组成的组中的连接基团LR。


2.根据权利要求1中记载的化合物，其中，所述Q用下述式(1-Q)表示，
RQ12N-(CRQ22)q1-NRQ1-(CRQ22)q2-*(1-Q)
式中，RQ1分别独立地为烷基，
RQ2分别独立地为氢或烷基，
RQ1及RQ2中的任意两个可以键合而形成含氮脂环，q1为1～4的数，
q2为0～4的数，
*表示与-CHR2的键合位置。


3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中，所述Q为下述所示的结构中的任一者，



式中，*表示与-CHR2的键合位置。


4.根据权利要求1～3中任一项所述的化合物，其中，所述R用下述式(1-R)表示，
-LR1-C(＝O)-O-LR2(1-R)
式中，LR1为亚烷基，LR2为烯基。


5.根据权利要求4所述的化合物，其中，所述LR1及所述LR2分别用下述式(1-R1)及(1-R2)表示，
-(CH2)r1-(1-R1)
-CH2-CH＝CH-(CH2)r2-H(1-R2)
式中，r1为1～10的数，r2为1～10的数。


6.根据权利要求5所述的化合物，其中，所述r1为4～8的数。


7.根据权利要求1～6中任一项所述的化合物，其中，所述R中所含的、最长的分子链为8个原子以上。


8.根据权利要求1～7中任一项所述的化合物，其用下述式(1-01)～(1-21)表示，











9.一种脂质粒子，其含有权利要求1～8中任一项所述的化合物。


10.根据权利要求9所述的脂质粒子，其还含有下述化合物，
所述化合物用下述式(2)表示，并且在结构中含有至少一个选自由羧酸酯键、硫代羧酸酯键、二硫代羧酸键、酰胺键、氨基甲酸酯键、羧基二氧键及脲键组成的组中的生物降解性基团，
P-[X-W-Y-W’-Z]2(2)
式中，P为在主链中含有1个以上醚键的亚烷基氧基，
X分别独立地为含有叔胺结构的2价连接基，
W分别独立地为C1～C6亚烷基，
Y分别独立地为选自由单键、醚键、羧酸酯键、硫代羧酸酯键、硫代酯键、酰胺键、氨基甲酸酯键及脲键组成的组中的2价连接基，W’分别独立为单键或C1～C6亚烷基，
Z分别独立地为脂溶性维生素残基、甾醇残基或C12～C22脂肪族烃基。


11.根据权利要求10所述的脂质粒子，其中，所述P含有3～8个碳及1～2个氧。


12.根据权利要求10或11所述的脂质粒子，其中，所述X分别独立地选自由甲基亚氨基、1,2-吡咯烷二基及1,3-吡咯烷二基组成的组。


13.根据权利要求10～12中任一项所述的脂质粒子，其中，所述Z为脂溶性维生素残基或甾醇残基。


14.根据权利要求9～13中任一项所述的脂质粒子，其还含有形成膜的脂质和能减少聚集的脂质。


15.根据权利要求14所述的脂质粒子，其中，所述形成膜的脂质选自由1,2-二油酰基-sn-丙三醇-3-磷脂酰乙醇胺(DOPE)、1,2-硬脂酰基-sn-丙三醇-3-磷脂酰乙醇胺(DSPE)、1,2-二棕榈酰基-sn-丙三醇-3-磷脂酰胆碱(DPPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-丙三醇-3-磷脂酰胆碱(POPC)、1,2-二-O-十八烷基-3-三甲基...

【专利技术属性】
技术研发人员：石原美津子，赤星英一，内藤胜之，野崎绘美，猿渡冴子，
申请(专利权)人：株式会社东芝，
类型：发明
国别省市：日本;JP