高效液相色谱法检测破囊壶菌中角鲨烯的方法技术

本发明专利技术公开了高效液相色谱法检测破囊壶菌中角鲨烯的方法，包括如下步骤：(1)角鲨烯标准曲线的建立；(2)从破囊壶菌发酵液中提取角鲨烯：将破囊壶菌放入M4培养基中发酵培养，菌液离心，去上清，灭菌水洗，冻干，冻干菌体加入氯仿的甲醇溶液，匀质机破碎，氮吹干，加入NaOH溶液，涡旋，60℃水浴；取出，冷却至室温，加入正己烷萃取，上层萃取液为角鲨烯粗提待测样品；(3)使用高效液相色谱对所述角鲨烯粗提待测样品进行检测，得到峰面积，代入回归方程，得到角鲨烯含量；本发明专利技术样品的分析时间短，角鲨烯峰与其他杂质峰得到很好分离，出峰时间早，检测效率高，且灵敏度高，准确性好，是一种简便、快速、准确、环保的检测方法。

【技术实现步骤摘要】
高效液相色谱法检测破囊壶菌中角鲨烯的方法
本专利技术涉及破囊壶菌的高附加值活性产物的检测
，特别是涉及一种高效液相色谱法检测破囊壶菌中角鲨烯的方法。技术背景角鲨烯(squalene,C30H50)是一种生物合成的全反式三萜类化合物，属于一种不饱和烃。是一种天然的抗氧化剂。角鲨烯的生理功能与其抗氧化能力密切相关。具有一定的抗紫外线的能力，可以降低机体的氧化损伤。有研究表明，角鲨烯可以降低细胞中胆固醇的含量，并且可以对心脏起到保护作用，加强心肌膜的稳定，保护心肌膜免受氧化损伤。角鲨烯还可以有效降低致癌物质的毒性，能有效的抑制结肠癌、皮肤癌和胃癌的扩散。被广泛的应用于食品、医药和化妆品领域。目前，角鲨烯主要来源是深海鲨鱼，而深海鲨鱼是珍贵的保护动物，生态环境破坏限制了角鲨烯的生产和使用。随着角鲨烯使用的日益广泛，天然来源角鲨烯受到资源限制。而化学合成角鲨烯的技术的复杂性和不稳定性，都无法满足庞大的市场需求。近几年来，关于利用微藻生产角鲨烯的研究逐渐增多，在所有的微藻种群中，异养型的破囊壶菌(Thraustochytrids)具有高产本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效液相色谱法检测破囊壶菌中角鲨烯的方法，其特征是包括如下步骤：/n(1)角鲨烯标准曲线的建立：以正己烷为溶剂，分别配制浓度为5mg/mL，1mg/mL，0.5mg/mL，0.25mg/mL，0.125mg/mL，0.0625mg/mL，0.03125mg/mL的角鲨烯标准溶液；使用高效液相色谱仪对所述溶液进行检测，以角鲨烯浓度mg/ml为横坐标，以峰面积UV.S为纵坐标，得到角鲨烯浓度与峰面积的线性回归方程；回归方程为：y＝42390x，R

【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法检测破囊壶菌中角鲨烯的方法，其特征是包括如下步骤：
(1)角鲨烯标准曲线的建立：以正己烷为溶剂，分别配制浓度为5mg/mL，1mg/mL，0.5mg/mL，0.25mg/mL，0.125mg/mL，0.0625mg/mL，0.03125mg/mL的角鲨烯标准溶液；使用高效液相色谱仪对所述溶液进行检测，以角鲨烯浓度mg/ml为横坐标，以峰面积UV.S为纵坐标，得到角鲨烯浓度与峰面积的线性回归方程；回归方程为：y＝42390x，R2＝0.9984；建立标准曲线；
(2)从破囊壶菌发酵液中提取角鲨烯：将破囊壶菌放入M4培养基中发酵培养3天，收集菌液以8000-12000r/min，离心3-5min，除去上清，用灭菌水洗2-3遍，冻干机-50℃冻干2...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪光义，汪伟骏，张爱卿，刘璐，叶会科，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12