一种超声分子探针及其制备方法技术

本发明专利技术涉及的一种超声分子探针，包括有脂质体纳米粒壳膜、包裹于壳膜内的液态氟碳以及壳膜表面携带的抗体，其特征在于：所述抗体为碳酸酐酶IX单抗，并且所述壳膜表面还携载有环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA，其中环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的序列为SEQ ID NO：1。本发明专利技术涉及的超声分子探针体积小，不仅能够穿透血管内皮间隙且能够靶向寻找肾癌细胞，还能够经超声辐照后使包裹在超声分子探针内的液态氟碳发生液气相变，产生微泡和空化效应，增强血流背向散射、提高超声显像结果，而且能够特异性结合靶细胞，促进具有抑癌效应的靶siCREB摄入，抑制肾癌细胞的生长。

【技术实现步骤摘要】
一种超声分子探针及其制备方法
本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种超声分子探针及其制备方法。
技术介绍
肾癌(简称为RCC)是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一，其发病率与死亡率近年来呈上升趋势，给患者的身心健康带来严重的危害。针对RCC发病率、死亡率较高及治疗效果较差等特点，RCC的早期诊断及有效的干预治疗显得尤为重要。临床上现有的影像学技术(如CT、超声及MRI等)及实验室肿瘤标志物筛查对于RCC的定性诊断、预后评价及转移复查均具有一定的难度。近年来，由传统医学影像技术和现代分子生物学相结合兴起的分子影像学技术，通过对超声分子探针的设计，凭借酶学激活、靶向分子结合等原理，使用表面修饰靶点、携带药物或基因的多功能分子探针，将基因表达、分子之间的信号传递过程以影像学方式直观显示，使得临床更好地了解疾病的发展特征，为RCC在分子或细胞水平的早期影像诊断及靶向精准治疗提供了新思路及手段。超声微泡作为一种内含气体的微米级超声造影剂，拥有较好的超声成像效果，目前已广泛应用于各种临床疾病的诊断(如声诺维SonoVue，平均直径约2.5本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种超声分子探针，包括有脂质体纳米粒壳膜、包裹于壳膜内的液态氟碳以及壳膜表面携带的抗体，其特征在于：所述抗体为碳酸酐酶IX单抗，并且所述壳膜表面还携载有环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA，其中环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的序列为SEQID NO：1。/n

【技术特征摘要】
1.一种超声分子探针，包括有脂质体纳米粒壳膜、包裹于壳膜内的液态氟碳以及壳膜表面携带的抗体，其特征在于：所述抗体为碳酸酐酶IX单抗，并且所述壳膜表面还携载有环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA，其中环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的序列为SEQIDNO：1。


2.根据权利要求1所述的超声分子探针，其特征在于，所述的环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的正义链序列为：5’-GUCUCCACAAGUCCAAACATT-3’，反义链序列为：5’-GUCUCCACAAGUCCAAACATT-3’。


3.根据权利要求1所述的超声分子探针，其特征在于，所述的环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的正义链序列为：5’-GGCAGACAGUUCAAGUCCAUG-3’，反义链序列为：5’-UGGACUUGAACUGUCUGCCCA-3’。


4.根据权利要求1所述的超声分子探针，其特征在于，所述的环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的正义链序列为：5’-UAAUUCCUUCAAUACCAUGCU-3’，反义链序列为：5’-CAUGGUAUUGAAGGAAUUAGA-3’。


5.一种制备如权利要求1-4任一项所述的超声分子探针的方法，其特征在于，包括以下步骤，
步骤一：制备脂质体纳米粒壳膜；
步骤二：将步骤一获得的脂质体纳米粒壳膜中加入液态氟碳，得到内部包裹有液态氟碳的脂质体纳米粒；
步骤三：在步骤二中获得的内部包裹有液态氟碳的脂质体纳米粒表面负载环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA，得到表面携载有环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的脂质体纳米粒；
步骤四：将步骤三获得的表面携载有环腺苷酸反应元件结合蛋白的siRNA的脂质体纳米粒与碳酸酐酶IX单抗进行酰胺反应，得到所述的超声分子探针。


6.根据权利要求5所述的制备超声分子探针的方法，其特征在于，步骤一中制备脂质体纳米粒壳膜的步骤为：
a、称取10mg的二棕榈酰磷脂酰胆碱、3-4mg的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-氨基交连物、2-4mg的3β-[N-(N',N'-二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇放入圆底烧瓶中；
b、加入4-6mL氯仿和1-2mL甲醇，混合溶解；
c、旋转水浴蒸发，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄帅帅，古丽米热·图尔贡，任雨，王雪，翁国斌，祝杭婕，
申请(专利权)人：宁波市鄞州区第二医院医共体，
类型：发明
国别省市：浙江;33