一种铜蓝蛋白检测试剂盒的及其制备方法技术

本发明专利技术公开一种铜蓝蛋白检测试剂盒，包括试剂R1以及试剂R2；试剂R1中的组分如下：PBS缓冲溶液、氯化镁、海藻糖、曲拉通‑100、盐酸羟胺、叠氮化钠、PEG‑8000；试剂R2中的组分如下：PBS缓冲溶液、乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液、牛血清蛋白。本发明专利技术同时公开上述铜蓝蛋白检测试剂盒的制备方法如下：步骤A)、试剂R1的制备：在调配罐A中加入纯化水，依次将试剂R1各组分加入至调配罐中混料搅拌，调溶液的pH，利用微孔滤膜过滤既得；步骤B)、试剂R2的制备：在调配罐B中加入纯化水，依次将试剂R2各组分加入至调配罐B中，混料搅拌，调溶液的pH；利用微孔滤膜过滤既得。采用本发明专利技术公开的方案提高了检测效率，降低了临床疾病检测的成本。

【技术实现步骤摘要】
一种铜蓝蛋白检测试剂盒的及其制备方法
本专利技术涉及铜蓝蛋白检测试剂盒的制备方法，尤其涉及的是一种铜蓝蛋白检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
在尿液检测中，铜蓝蛋白含量检测是尿液检测的常规项目，通过检测尿液中铜蓝蛋白含量的情况能够判断临床上的一些疾病。具体而言，现有临床研究表明：尿液中的铜蓝蛋白含量是由人体肝脏功能、肾功能以及胆功能影响，具体而言，肝脏能够合成铜蓝蛋白，而胆道以及肾脏是分解、排屑铜蓝蛋白的主要方式，因此，检测尿液中铜蓝蛋白含量对于预防、诊断临床上的一些疾病具有重要的临床诊断意义。然而，目前临床上检测铜蓝蛋白结合力的主要方式仍旧采用较为传统的酶联免疫吸附法。上述检测手段不仅落后，且检测周期较长，检测的成本较高，不仅增加了临床检测的成本且降低了检测效率。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供了一种铜蓝蛋白检测试剂盒及其制备方法。本专利技术是通过以下技术方案解决上述技术问题的：一种铜蓝蛋白检测试剂盒，包括试剂R1以及试剂R2；所述试剂R1中的组分及浓度如下：所述试剂R2中的组分及浓度如下：PBS缓冲溶液35-60mmol/L乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.2-0.6％牛血清蛋白15-30mmol/L。优选地，所述试剂R1中的组分及浓度如下：优选地，所述试剂R1中的组分及浓度如下：优选地，所述试剂R2中的组分及浓度如下：<br>PBS缓冲溶液50mmol/L乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.4％牛血清蛋白22mmol/L。优选地，所述试剂R1的pH在7.2-8.5之间。优选地，所述试剂R2的pH在7.2-8.5之间。本专利技术同时公开上述铜蓝蛋白检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：步骤A)、试剂R1的制备：在调配罐A中加入纯化水，依次将PBS缓冲溶液、氯化镁、海藻糖、曲拉通-100、盐酸羟胺、叠氮化钠、PEG-8000加入至调配罐中混料搅拌，混料过程中调溶液的pH至7.8，混料搅拌至溶液澄清后，利用微孔滤膜过滤所得滤液为试剂R1；步骤B)、试剂R2的制备：在调配罐B中加入纯化水，依次将PBS缓冲溶液、乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液、牛血清蛋白加入至调配罐B中，混料搅拌至溶液澄清，调溶液的pH至7.8；将混料溶液利用微孔滤膜过滤所得滤液为试剂R2。优选地，所述乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液的制备方法如下：S1、取粒径为65nm和120nm的乳胶微球于MES缓冲溶液中，加入EDAC溶液混料均匀后于37℃条件下孵育1.5-2h，离心去除上清液后补加MES缓冲溶液中至体积不变，再次于37℃条件下孵育1.5-2h离心去除上清液后得乳胶溶液；S2、在步骤S1所得乳胶溶液的基础上，加入铜蓝蛋白抗体、聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物混料反应1-3h后，离心沉淀，将沉淀物分散在MES缓冲溶液中，于37℃条件下孵育1.5-2h后，离心，将沉淀物分散溶解在试剂R2中PBS缓冲体积总量二分之一的PBS缓冲溶液中，于2-8℃，封存36-45h后，既得乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液。本专利技术相比现有技术具有以下优点：本专利技术公开一种铜蓝蛋白检测试剂盒及其制备方法，通过本专利技术公开的技术方案成功制备得到一种铜蓝蛋白检测试剂盒。将本专利技术公开的铜蓝蛋白检测试剂盒应用与检测尿液中铜蓝蛋白含量，不仅能够快速高效的检测血液中铜蓝蛋白的含量，且本专利技术公开检测方法较为简单，能够快速的对尿液中铜蓝蛋白结合能力进行测试，提高了检测效率，降低了临床疾病检测的成本。具体实施方式下面对本专利技术的实施例作详细说明，本实施例在以本专利技术技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围不限于下述的实施例。实施例1铜蓝蛋白检测试剂盒铜蓝蛋白检测试剂盒包括试剂R1以及试剂R2；其中，试剂R1中的组分及浓度如下：试剂R2中的组分及浓度如下：PBS缓冲溶液35mmol/L乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.2％牛血清蛋白15mmol/L。实施例2铜蓝蛋白检测试剂盒所述试剂R1中的组分及浓度如下：所述试剂R2中的组分及浓度如下：PBS缓冲溶液60mmol/L乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.6％牛血清蛋白30mmol/L。实施例3铜蓝蛋白检测试剂盒所述试剂R1中的组分及浓度如下：试剂R2中的组分及浓度如下：PBS缓冲溶液50mmol/L乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.4％牛血清蛋白22mmol/L。实施例4铜蓝蛋白检测试剂盒的制备方法本实施例以实施例1中的试剂R1、试剂R2为制备原料，采用如下制备方法制备铜蓝蛋白检测试剂盒：步骤A)、试剂R1的制备：在调配罐A中加入纯化水，依次将PBS缓冲溶液、氯化镁、海藻糖、曲拉通-100、盐酸羟胺、叠氮化钠、PEG-8000加入至调配罐中混料搅拌，混料过程中调溶液的pH至7.8，混料搅拌至溶液澄清后，利用微孔滤膜过滤所得滤液为试剂R1；步骤B)、试剂R2的制备：在调配罐B中加入纯化水，依次将PBS缓冲溶液、乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液、牛血清蛋白加入至调配罐B中，混料搅拌至溶液澄清，调溶液的pH至7.8；将混料溶液利用微孔滤膜过滤所得滤液为试剂R2。上述乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液的制备方法如下：S1、取粒径为65nm和120nm的乳胶微球于MES缓冲溶液中，加入EDAC溶液混料均匀后于37℃条件下孵育2h，离心去除上清液后补加MES缓冲溶液中至体积不变，再次于37℃条件下孵育h离心去除上清液后得乳胶溶液；S2、在步骤S1所得乳胶溶液的基础上，加入铜蓝蛋白抗体、聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物混料反应3h后，离心沉淀，将沉淀物分散在MES缓冲溶液中，于37℃条件下孵育2h后，离心，将沉淀物分散溶解在PBS缓冲体积总量的二分之一内，于6℃，封存40h后，既得乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液。实施例5铜蓝蛋白检测试剂盒的制备方法本实施例以实施例2中的试剂R1、试剂R2为制备原料，采用如下制备方法制备铜蓝蛋白检测试剂盒：步骤A)、试剂R1的制备：在调配罐A中加入纯化水，依次将PBS缓冲溶液、氯化镁、海藻糖、曲拉通-100、盐酸羟胺、叠氮化钠、PEG-8000加入至调配罐中混料搅拌，混料过程中调溶液的pH至7.8，混料搅拌至溶液澄清后，利用微孔滤膜过滤所得滤液为试剂R1；步骤B)、试剂R2的制备：在调配罐B中加入纯化水，依次将PBS缓冲溶液、乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液、牛血清蛋白加入至调配罐B中，混料搅拌至溶液澄清，调溶液的pH至7.8；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1以及试剂R2；/n所述试剂R1中的组分及浓度如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1以及试剂R2；
所述试剂R1中的组分及浓度如下：



所述试剂R2中的组分及浓度如下：
PBS缓冲溶液35-60mmol/L
乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.2-0.6％
牛血清蛋白15-30mmol/L。


2.根据权利要求1所述的铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的组分及浓度如下：





3.根据权利要求2所述的铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中的组分及浓度如下：





4.根据权利要求1所述的铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的组分及浓度如下：
PBS缓冲溶液50mmol/L
乳胶包被铜蓝蛋白抗体溶液0.4％
牛血清蛋白22mmol/L。


5.根据权利要求1所述的铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的pH在7.2-8.5之间。


6.根据权利要求1所述的铜蓝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2的pH在7.2-8.5之间。


7.一种制备如权利要求1-6任意一项所述的铜蓝蛋白检测试剂盒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤A)、试剂R...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖爱平，刘猛，胡玉立，
申请(专利权)人：四川纳海川生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51