一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒。本发明专利技术克服了现有技术中使用剧毒试剂的缺点，采用氯酸钠‑硫酸溶液在110℃条件下消解血清样品，利用碘催化亚硝酸钠与硫氰酸铁的还原反应，测量Fe(SCN)

A non arsenic detection kit for iodine ion in micro serum samples

【技术实现步骤摘要】
一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒
本专利技术涉及一种微量血清样本中碘离子的检测试剂盒，尤其涉及一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒，属于检测

技术介绍
砷铈催化分光光度法为卫生行业标准(WS/T572-2017)，为我国各级碘缺乏病实验室所广泛采用。砷铈催化分光光度法仪器设备成本低，手工操作，操作步骤多。因采用动态分光光度法测定，实验室的洁净度、试剂质量、消解温度、反应温度、操作手法都对测定结果产生影响，误差来源广泛，须经专门培训才能掌握。现有的血清碘检测方法中使用的还原剂三氧化二砷(俗称砒霜)属于剧毒品，其购买、运输、储存、使用以及处理必须按照《剧毒化学品购买和公路运输许可证件管理办法》和《危险化学品安全管理条例》等规定办理，在实际操作中存在很多限制与不便。
技术实现思路
本专利技术克服了现有技术中的缺点，提供了一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒，采用氯酸钠-硫酸溶液在110℃条件下消解血清样品，利用碘催化亚硝酸钠与硫氰酸铁的还原反应，测量Fe(SCN)63-的浓度变化速度与碘含量成正比；精密控制反应温度和反应时间，测量剩余的Fe(SCN)63-的吸光度，碘含量与吸光度的对数成线性关系。现有血清碘定量测定方法存在试剂配制复杂、易污染、易分解、危险性试剂用量多、所需血清量较多的缺点。而本专利技术所研究的无砷血清碘检测试剂盒便于操作、利于携带、安全性高，适用于临床开展碘营养的检测。为了达到上述目的，本专利技术采用了以下技术手段：本专利技术提供一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒，包括以下试剂：(1)消解剂：氯酸钠-硫酸溶液，其中，氯酸钠浓度为0.4g/mL，硫酸浓度为2.7mol/L；(2)还原剂：硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液，其中，硫氰酸钾浓度为0.26g/L，亚硝酸钠浓度为8g/L，氯化钠浓度为30g/L；(3)氧化剂：硫酸铁铵-硝酸溶液，其中，硫酸铁铵浓度为0.019mol/L，硝酸浓度为4mol/L；(4)碘标准储备溶液，碘离子浓度为100mg/L。优选的，所述的氯酸钠-硫酸溶液是通过以下方法配置：先量取250mL蒸馏水于500mL容量瓶中，缓缓加入1gmol/L的硫酸250mL，混匀，放置冷却后定容，制成9.0mol/L的硫酸溶液；再量取200mL蒸馏水加入至500mL容量瓶中，加入200g氯酸钠，摇动放置，溶解，缓慢加入制备得到的9.0mol/L的硫酸150mL，混匀，定容。优选的，所述硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液是通过以下方法配置：先称取9.7g硫氰酸钾于1L棕色容量瓶中，定容，制成0.10mol/L的硫氰酸钾溶液；再称取8g亚硝酸钠和30g氯化钠于另一1L棕色容量瓶中，加入蒸馏水约600mL，摇匀，加入27.3mL制备得到的0.10mol/L硫氰酸钾溶液，定容。优选的，所述的硫酸铁铵-硝酸溶液是通过以下方法配置：称取5.0g硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2·12H2O]于1L棕色容量瓶中，加入200mL蒸馏水，加入16mol/L的硝酸250mL，定容。本专利技术还提供了上述试剂盒用于血清碘含量测定的方法，所述方法不用于疾病的诊断，包括以下步骤：(1)样品采集和保存使用一次性真空采血管采集适量血液于具塞离心管中，室温静置0.5h，于3000r/min离心5min，严密封口以防水分蒸发，得到血清样品；(2)样品前处理准备多支消解管于消解管架上作为标准系列管，用移液器分别加入或配置10μL不同浓度的碘标准溶液；再准备多支消解管作为样品管，用移液器分别加入10μL血清样品；然后用移液器分别向各消解管中加入50μL氯酸钠-硫酸溶液作为消解剂，混匀后置于130℃的血碘测定消解仪上消解120min，取下冷却至室温；(3)样品测定采用分光光度计测量法：用移液器分别向各消解管中加入200μL硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液作为还原剂，充分混匀后放置于超级水浴上于32.0℃保持15min，秒表计时，将标准系列管按碘浓度由高至低顺序排列，依顺序每管间隔相同时间，用移液器向各管加入50μL硫酸铁铵-硝酸溶液，立即混匀；然后测量蒸馏水的光强度；待最高碘浓度的标准系列管的反应时间达到15min，此时吸光度值大约达到0.10，将样品管插入光路，依顺序每管间隔相同时间，于460nm波长下，以蒸馏水作参比，测量吸光度值。(4)血清碘离子浓度计算以碘离子浓度为横坐标，吸光度值的对数为纵坐标得到直线回归方程，再根据血清样品所测吸光度值使用下式计算得到样品中的碘离子浓度：Cx(μg/L)＝a+bX；式中：A---吸光度；X---样本测量的pA值；X＝-lg(A)a---直线回归截距；b---直线回归斜率；最后将各样品管所计算出的碘离子浓度取平均值，即得到最终检测结果。优选的，步骤(1)中所述的氯酸钠-硫酸溶液中，氯酸钠浓度为0.4g/mL，硫酸浓度为2.7mol/L。优选的，步骤(1)中所述的氯酸钠-硫酸溶液是通过以下方法配置：先量取250mL蒸馏水于500mL容量瓶中，缓缓加入1gmol/L的硫酸250mL，混匀，放置冷却后定容，制成9.0mol/L的硫酸溶液；再量取200mL蒸馏水加入至500mL容量瓶中，加入200g氯酸钠，摇动放置，溶解，缓慢加入制备得到的9.0mol/L的硫酸150mL，混匀，定容。优选的，步骤(2)中准备至少6只消解管作为所述的标准系列管，碘标准溶液的浓度分别为：250μg/L、200μg/L、150μg/L，100μg/L、50μg/L和0μg/L，用于制作直线回归方程。优选的，步骤(2)中准备至少3只消解管作为所述的样品管，用于多次测量取平均值。优选的，步骤(2)中所述的硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液中，硫氰酸钾浓度为0.26g/L，亚硝酸钠浓度为8g/L，氯化钠浓度为30g/L。优选的，步骤(2)中所述的硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液是通过以下方法配置：先称取9.7g硫氰酸钾于1L棕色容量瓶中，定容，制成0.10mol/L的硫氰酸钾溶液；再称取8g亚硝酸钠和30g氯化钠于另一1L棕色容量瓶中，加入蒸馏水约600mL，摇匀，加入27.3mL制备得到的0.10mol/L硫氰酸钾溶液，定容。优选的，步骤(2)中所述的硫酸铁铵-硝酸溶液中，硫酸铁铵浓度为0.019mol/L，硝酸浓度为4mol/L。优选的，步骤(2)中所述的硫酸铁铵-硝酸溶液是通过以下方法配置：称取5.0g硫酸铁铵[FeNH4(SO4)212H2O]于1L棕色容量瓶中，加入200mL蒸馏水，加入16mol/L的硝酸250mL，定容。优选的，步骤(3)中每管间隔的时间为30s。本专利技术还提供了上述试剂盒在个体碘营养评价中的应用，不用于疾病的诊断。本专利技术所应用的原理：采用氯酸钠-硫酸溶液在110℃条件下消解血清样品，利用碘催化亚硝酸钠与硫氰酸铁的还原反应，测量Fe(SCN)6本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：/n(1)消解剂：氯酸钠-硫酸溶液，其中，氯酸钠浓度为0.4g/mL，硫酸浓度为2.7mol/L；/n(2)还原剂：硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液，其中，硫氰酸钾浓度为0.26g/L，亚硝酸钠浓度为8g/L，氯化钠浓度为30g/L；/n(3)氧化剂：硫酸铁铵-硝酸溶液，其中，硫酸铁铵浓度为0.019mol/L，硝酸浓度为4mol/L；/n(4)碘标准储备溶液，碘离子浓度为100mg/L。/n

【技术特征摘要】
1.一种微量血清样本中碘离子的无砷检测试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：
(1)消解剂：氯酸钠-硫酸溶液，其中，氯酸钠浓度为0.4g/mL，硫酸浓度为2.7mol/L；
(2)还原剂：硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液，其中，硫氰酸钾浓度为0.26g/L，亚硝酸钠浓度为8g/L，氯化钠浓度为30g/L；
(3)氧化剂：硫酸铁铵-硝酸溶液，其中，硫酸铁铵浓度为0.019mol/L，硝酸浓度为4mol/L；
(4)碘标准储备溶液，碘离子浓度为100mg/L。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的氯酸钠-硫酸溶液是通过以下方法配置：先量取250mL蒸馏水于500mL容量瓶中，缓缓加入18mol/L的硫酸250mL，混匀，放置冷却后定容，制成9.0mol/L的硫酸溶液；再量取200mL蒸馏水加入至500mL容量瓶中，加入200g氯酸钠，摇...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘颖，卜野，田春园，纪春磊，史梦琪，李昕，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：黑龙;23