一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法。本发明专利技术克服了现有方法中使用剧毒试剂的缺点，采用氯酸钠‑硫酸溶液在110℃条件下消解血清样品，利用碘催化亚硝酸钠与硫氰酸铁的还原反应，测量Fe(SCN)

A non arsenic detection method of iodine ion in micro serum samples for individual iodine nutrition evaluation

【技术实现步骤摘要】
一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法
本专利技术涉及一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的检测方法，特别涉及一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法，属于检测

技术介绍
我国发布的血清碘标准检验方法《WS/T572-2017血清中碘的测定-砷铈催化分光光度法》，该方法为酸消解-砷铈催化分光光度法，该法测定前需对样品加氯酸钠及浓高氯酸消解剂做130℃热消解120min的前处理，消解过程有较多游离氯气等刺激气体逸出需通风排毒设备，其分析速度较慢，光度测定操作需严格的控制砷铈反应温度和反应时间。另一方面，该方法使用剧毒试剂三氧化二砷(俗称砒霜)。由于目前公安部门强化了对采购剧毒试剂资质的严格审查和限制，造成应用砷铈催化光度标准方法所需的三氧化二砷试剂在相当一部分实验室难于获得；且应用该方法后，含砷废液若未经专门处理有对环境污染的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有方法中使用剧毒试剂的缺点，从而提供一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法，采用氯酸钠-硫酸溶液在110℃条件下消解血清样品，利用碘催化亚硝酸钠与硫氰酸铁的还原反应，测量Fe(SCN)63-的浓度变化速度与碘含量成正比；精密控制反应温度和反应时间，测量剩余的Fe(SCN)63-的吸光度，碘含量与吸光度的对数成线性关系。该方法的建立可进一步满足群众逐渐增加的了解碘营养水平的需求，为碘缺乏病防治监测和碘营养评价的血清碘检测增添有力的方法手段，具有重要的公共卫生现实意义和实际应用价值。为了达到上述目的，本专利技术采用了以下技术手段：本专利技术提供一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法，所述方法不用于疾病的诊断，包括以下步骤：(1)样品采集和保存使用一次性真空采血管采集适量血液于具塞离心管中，室温静置0.5h，于3000r/min离心5min，严密封口以防水分蒸发，得到血清样品；(2)样品前处理准备多支消解管于消解管架上作为标准系列管，用移液器分别加入或配置10μL不同浓度的碘标准溶液；再准备多支消解管作为样品管，用移液器分别加入10μL血清样品；然后用移液器分别向各消解管中加入50μL氯酸钠-硫酸溶液作为消解剂，混匀后置于110℃的血碘测定消解仪上消解120min，取下冷却至室温；(3)样品测定采用分光光度计测量法：用移液器分别向各消解管中加入200μL硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液作为还原剂，充分混匀后放置于超级水浴上于32.0℃保持15min，秒表计时，将标准系列管按碘浓度由高至低顺序排列，依顺序每管间隔相同时间，用移液器向各管加入50μL硫酸铁铵-硝酸溶液，立即混匀；然后测量蒸馏水的光强度；待最高碘浓度的标准系列管的反应时间达到15min，此时吸光度值大约达到0.10，将样品管插入光路，依顺序每管间隔相同时间，于460nm波长下，以蒸馏水作参比，测量吸光度值。(4)血清碘离子浓度计算以碘离子浓度为横坐标，吸光度值的对数为纵坐标得到直线回归方程，再根据血清样品所测吸光度值使用下式计算得到样品中的碘离子浓度：Cx(μg/L)＝a+bX；式中：A---吸光度；X---样本测量的pA值；X＝-lg(A)a---直线回归截距；b---直线回归斜率；最后将各样品管所计算出的碘离子浓度取平均值，即得到最终检测结果。优选的，步骤(1)中所述的氯酸钠-硫酸溶液中，氯酸钠浓度为0.4g/mL，硫酸浓度为2.7mol/L。优选的，步骤(1)中所述的氯酸钠-硫酸溶液是通过以下方法配置：先量取250mL蒸馏水于500mL容量瓶中，缓缓加入18mol/L的硫酸250mL，混匀，放置冷却后定容，制成9.0mol/L的硫酸溶液；再量取200mL蒸馏水加入至500mL容量瓶中，加入200g氯酸钠，摇动放置，溶解，缓慢加入制备得到的9.0mol/L的硫酸150mL，混匀，定容。优选的，步骤(2)中准备至少6只消解管作为所述的标准系列管，碘标准溶液的浓度分别为：250μg/L、200μg/L、150μg/L、100μg/L、50μg/L和0μg/L，用于制作直线回归方程。优选的，步骤(2)中准备至少3只消解管作为所述的样品管，用于多次测量取平均值。优选的，步骤(2)中所述的硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液中，硫氰酸钾浓度为0.26g/L，亚硝酸钠浓度为8g/L，氯化钠浓度为30g/L。优选的，步骤(2)中所述的硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液是通过以下方法配置：先称取9.7g硫氰酸钾于1L棕色容量瓶中，定容，制成0.10mol/L的硫氰酸钾溶液；再称取8g亚硝酸钠和30g氯化钠于另一1L棕色容量瓶中，加入蒸馏水约600mL，摇匀，加入27.3mL制备得到的0.10mol/L硫氰酸钾溶液，定容。优选的，步骤(2)中所述的硫酸铁铵-硝酸溶液中，硫酸铁铵浓度为0.019mol/L，硝酸浓度为4mol/L。优选的，步骤(2)中所述的硫酸铁铵-硝酸溶液是通过以下方法配置：称取5.0g硫酸铁铵[FeNH4(SO4)212H2O]于1L棕色容量瓶中，加入200mL蒸馏水，加入16mol/L的硝酸250mL，定容。优选的，步骤(3)中每管间隔的时间为30s。本专利技术所应用的原理：采用氯酸钠-硫酸溶液在110℃条件下消解血清样品，利用碘催化亚硝酸钠与硫氰酸铁的还原反应，测量Fe(SCN)63-的浓度变化速度与碘含量成正比；精密控制反应温度和反应时间，测量剩余的Fe(SCN)63-的吸光度，碘含量与吸光度的对数成线性关系。2Fe(SCN)63-+2I-→2Fe2++12SCN-+I2I2+NO2-+2OH-→2I-+NO3-+H2O相较于现有技术，本专利技术的有益效果在于：1L中分别含有10g/LNaCl、、200mg/LK+、200mg/LCa2+、200mg/LMg2+、、1.5mg/LFe2+、1.5mg/LZn2+、1.5mg/LCu2+、0.05mg/LHg2+、2g/L甘氨酸、10g/L葡萄糖、100mg/L抗坏血酸、时，均不干扰测定。线性范围0～250μg/L，相关系数r≥0.999；取样量为10μL，检测限4.7μg/L；精密度：测定低、中、高3种不同碘含量的血清样品，其批内变异系数(CV)分别为0.5％、0.9％、0.7％(n＝6)，批间变异系数(CV)分别为1.0％、0.3％、0.5％(n＝6)，；准确度：测定低、中、高3种不同碘含量的血清样品，平均加标回收率分别为100.8％、101.5％、103.1％(n＝3)，总平均回收率101.8％(范围99.6％～108.5％)。本测定方法精密、准确，重现好，所需仪器操作简单易行，适用于疾病防控、临床诊断及科研工作中血清碘的测定。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法，所述方法不用于疾病的诊断，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)样品采集和保存/n使用一次性真空采血管采集适量血液于具塞离心管中，室温静置0.5h，于3000r/min离心5min，严密封口以防水分蒸发，得到血清样品；/n(2)样品前处理/n准备多支消解管于消解管架上作为标准系列管，用移液器分别加入或配置10μL不同浓度的碘标准溶液；再准备多支消解管作为样品管，用移液器分别加入10μL血清样品；然后用移液器分别向各消解管中加入50μL氯酸钠-硫酸溶液作为消解剂，混匀后置于110℃的血碘测定消解仪上消解120min，取下冷却至室温；/n(3)样品测定/n采用分光光度计测量法：用移液器分别向各消解管中加入200μL硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液作为还原剂，充分混匀后放置于超级水浴上于32.0℃保持15min，秒表计时，将标准系列管按碘浓度由高至低顺序排列，依顺序每管间隔相同时间，用移液器向各管加入50μL硫酸铁铵-硝酸溶液，立即混匀；然后测量蒸馏水的光强度；待最高碘浓度的标准系列管的反应时间达到15min，此时吸光度值大约达到0.10，将样品管插入光路，依顺序每管间隔相同时间，于460nm波长下，以蒸馏水作参比，测量吸光度值。/n(4)血清碘离子浓度计算/n以碘离子浓度为横坐标，吸光度值的对数为纵坐标得到直线回归方程，再根据血清样品所测吸光度值使用下式计算得到样品中的碘离子浓度：Cx(μg/L)＝a+bX；/n式中：/nA---吸光度；/nX---样本测量的pA值；X＝-lg(A)/na---直线回归截距；/nb---直线回归斜率；/n最后将各样品管所计算出的碘离子浓度取平均值，即得到最终检测结果。/n...

【技术特征摘要】
1.一种用于个体碘营养评价的微量血清样本中碘离子的无砷检测方法，所述方法不用于疾病的诊断，其特征在于，包括以下步骤：
(1)样品采集和保存
使用一次性真空采血管采集适量血液于具塞离心管中，室温静置0.5h，于3000r/min离心5min，严密封口以防水分蒸发，得到血清样品；
(2)样品前处理
准备多支消解管于消解管架上作为标准系列管，用移液器分别加入或配置10μL不同浓度的碘标准溶液；再准备多支消解管作为样品管，用移液器分别加入10μL血清样品；然后用移液器分别向各消解管中加入50μL氯酸钠-硫酸溶液作为消解剂，混匀后置于110℃的血碘测定消解仪上消解120min，取下冷却至室温；
(3)样品测定
采用分光光度计测量法：用移液器分别向各消解管中加入200μL硫氰酸钾-亚硝酸钠-氯化钠溶液作为还原剂，充分混匀后放置于超级水浴上于32.0℃保持15min，秒表计时，将标准系列管按碘浓度由高至低顺序排列，依顺序每管间隔相同时间，用移液器向各管加入50μL硫酸铁铵-硝酸溶液，立即混匀；然后测量蒸馏水的光强度；待最高碘浓度的标准系列管的反应时间达到15min，此时吸光度值大约达到0.10，将样品管插入光路，依顺序每管间隔相同时间，于460nm波长下，以蒸馏水作参比，测量吸光度值。
(4)血清碘离子浓度计算
以碘离子浓度为横坐标，吸光度值的对数为纵坐标得到直线回归方程，再根据血清样品所测吸光度值使用下式计算得到样品中的碘离子浓度：Cx(μg/L)＝a+bX；
式中：
A---吸光度；
X---样本测量的pA值；X＝-lg(A)
a---直线回归截距；
b---直线回归斜率；
最后将各样品管所计算出的碘离子浓度取平均值，即得到最终检测结果。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的氯酸钠-硫酸溶液中，氯酸钠浓度为0.4g/mL，硫酸浓度为2.7mol/L。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的氯酸钠-硫酸溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘颖，田春园，卜野，纪春磊，史梦琪，李昕，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：黑龙;23