一种提取母乳中乳清蛋白的纯化制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域工艺，尤其涉及一种从天然母乳中提取纯化总乳清蛋白的方法，具体涉及一种应用离子交换色谱技术制备母乳总乳清蛋白的方法。具体涉及膜分离、低温高速离心、等电点沉淀去除酪蛋白、离子交换色谱精制及浓缩干燥过程。本发明专利技术以母乳为原料，采用膜分离、低温高速离心、等电点沉淀制成乳清溶液，利用中低压纯化系统通过离子交换色谱进行精制制备进一步去除高丰度的酪蛋白等成分。通过本发明专利技术制备的乳清蛋白干燥粉末溶解度佳、纯度较高；生产过程中具有制备工艺操作简单、效率高等优势。

Purification and preparation of whey protein from human milk

【技术实现步骤摘要】
一种提取母乳中乳清蛋白的纯化制备方法
本专利技术涉及生物
工艺，尤其涉及一种从天然母乳中提取纯化总乳清蛋白的方法，具体涉及一种应用离子交换色谱技术制备母乳总乳清蛋白的方法。
技术介绍
母乳含有新生儿在生长发育过程中所必需的全部营养物质，对新生儿的生长及健康发育具有重要的作用。母乳中蛋白质分为酪蛋白和乳清蛋白等，乳清蛋白和酪蛋白比例，在泌乳期前40天大约是80:20~70:30，在泌乳期40天以后大约60:40～50:50。乳清蛋白是去除酪蛋白后，分离出来的乳清中所含有的蛋白质。乳清蛋白中存在较多对机体具有调控和免疫作用的免疫球蛋白。乳清蛋白作为母乳中最主要的成分之一，对婴幼儿的健康成长具有非常重要的作用。因此，利用蛋白质组学的方法对乳清蛋白进行深入研究，能够全面并深入了解乳清蛋白，利用蛋白质组学技术研究乳清蛋白有利于对疾病的预防与治疗，对婴幼儿的健康发育具有重要的意义。然而，由于母乳中存在多种高丰度蛋白（如酪蛋白等）以及脂类、乳糖等，会干扰周围低丰度蛋白的表达与鉴别，同时会降低电泳结果的重复性和分辨率。如何尽量减少或避免高本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取母乳中乳清蛋白的纯化制备方法，其特征在于，步骤如下：/n（1）预处理：通过膜分离及低温高速离心脱脂，用0.5-1M乙酸调pH至4.6-4.8等电点沉淀除去脱脂乳中的酪蛋白，得到澄清的乳清溶液；/n（2）将乳清溶液上样到用电导率为0-10mS/cm的pH4.0-5.0的缓冲液平衡的离子交换色谱柱上，流速为150-500cm/h；上样完毕用电导率为0-10mS/cm的pH4.0-5.0的缓冲液冲洗色谱柱待280nm吸收值至基线，使用10-90mS/cm的pH4.0-5.0的缓冲液线性梯度洗脱，洗脱体积为10-50倍柱体积，峰收集各馏分，经SDS-PAGE纯度检测合格的馏分合并后浓缩干燥...

【技术特征摘要】
1.一种提取母乳中乳清蛋白的纯化制备方法，其特征在于，步骤如下：
（1）预处理：通过膜分离及低温高速离心脱脂，用0.5-1M乙酸调pH至4.6-4.8等电点沉淀除去脱脂乳中的酪蛋白，得到澄清的乳清溶液；
（2）将乳清溶液上样到用电导率为0-10mS/cm的pH4.0-5.0的缓冲液平衡的离子交换色谱柱上，流速为150-500cm/h；上样完毕用电导率为0-10mS/cm的pH4.0-5.0的缓冲液冲洗色谱柱待280nm吸收值至基线，使用10-90mS/cm的pH4.0-5.0的缓冲液线性梯度洗脱，洗脱体积为10-50倍柱体积，峰收集各馏分，经SDS-PAGE纯度检测合格的馏分合并后浓缩干燥成粉末，即得到精制乳清蛋白。


2.根据权利要求1所述一种提取母乳中乳清蛋白的纯化制备方法，其特征在于，步骤（1）所使用的膜分离系统为0.22-0.65μm或500-1000kD截留分子量的膜分离膜，过滤完后用纯化水进行洗滤，收集截留液及透过液；截留液在2-8℃、8000-10000rpm超速离心后，去除上层脂肪...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，叶贤龙，肖思佳，闫竟宇，郭志谋，张华林，
申请(专利权)人：泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32