用于预防或治疗以成纤维细胞异常增殖及细胞外基质沉积为特征的疾病的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及用于预防或治疗以成纤维细胞异常增殖及细胞外基质沉积为特征的疾病的组合物和方法。本发明专利技术提供了用于预防或治疗以在受治疗者的组织中异常的成纤维细胞增殖和细胞外基质沉积为特征的疾病、病状或病理过程的组合物和方法。该方法包括施用治疗量的包括具有氨基酸序列YARAAARQARAKALARQLGVAA(SEQ ID NO：1)的多肽或其功能等同物，和药学上可接受的载体的药物组合物。

Compositions and methods for preventing or treating diseases characterized by abnormal proliferation of fibroblasts and deposition of extracellular matrix

【技术实现步骤摘要】
用于预防或治疗以成纤维细胞异常增殖及细胞外基质沉积为特征的疾病的组合物和方法本申请为分案申请，原申请的申请日为2012年4月12日，申请号为201280027012.2(PCT/US2012/033368)，专利技术名称为“用于预防或治疗以成纤维细胞异常增殖及细胞外基质沉积为特征的疾病、病状或病程的组合物和方法”。相关申请的交叉参考本申请要求题名为“用于治疗或预防气道或肺组织疾病的组合物和方法”的美国临时申请No.61/474,370(2011年4月12日提交)的优先权权益，该申请的内容通过引用全部并入本文。政府资助的声明本专利技术是在给予莫伊莱麦屈克斯公司(MoeraeMatrix，LLC)小型企业创新研究(SBIR)资助的政府支持下完成的。政府在本专利技术中享有一定的权利。
本专利技术属于细胞和分子生物学、多肽和治疗方法的使用领域。
技术介绍
1.伤口愈合和纤维化的机制术语“伤口愈合”是指身体修复其任何组织的损伤的过程，特别是那些由物理方法和连续性中断引起的创伤。伤口愈合的响应经常被描述为具有三个不同的阶段——损伤、炎症和修复。一般来说，身体对损伤的炎症反应对于维持生物体的健康和完整性至关重要。如果其发生错误，它可以导致组织的破坏。阶段Ⅰ：损伤由包括但不限于自身免疫性或变态反应、环境颗粒物、感染或机械损伤的因素造成的损伤通常导致正常组织结构的中断、启动愈合反应。受损的上皮细胞和内皮细胞必须更换以分别地维持屏障功能和完整性并防止血液流失。对内皮细胞的急性损伤导致炎性介质的释放和抗纤溶凝血级联的开始，以血小板和富含纤维蛋白质的凝块暂时堵塞受损的血管。例如，与慢性阻塞性肺病(COPD)患者和对照患者相比，特发性肺纤维化(IPF)患者的肺组织匀浆、上皮细胞或支气管肺泡灌洗液中含有更高水平的血小板分化因子，X盒结合蛋白质-1，这表明凝块形成反应被持续激活。此外，凝血酶(转换纤维蛋白原为纤维蛋白所需的丝氨酸蛋白酶)也在几个肺纤维化病状的肺和肺泡内腔隙很容易地检测到，进一步证实凝血途径的激活。凝血酶也可以直接激活成纤维细胞，增加增殖和促进成纤维细胞分化为胶原蛋白产生肌成纤维细胞。对气道上皮细胞特别是肺泡细胞的损伤，可以引起类似的抗纤溶级联并导致间质水肿、急性炎症的区域和上皮细胞从基底膜的分离。血小板召集、脱粒和凝块的形成迅速进展为伴随通透性增加的血管收缩的阶段，使白细胞外渗(白细胞从毛细血管移动到其周围的组织)并直接召集到受损部位。形成实质组织的位于上皮细胞和内皮细胞下的细胞外基质的基底膜，阻止直接进入受损的组织。为了破坏这一物理屏障，锌依赖的肽链内切酶，也被称为基质金属蛋白酶(MMP)，劈开一种或多种细胞外基质成分以允许细胞的溢出物进入和离开受损部位。具体来说，MMP-2(明胶酶A，N型胶原酶)和MMP-9(明胶酶B，IV型胶原酶)把基底膜的两种重要成分N型胶原蛋白和明胶劈开。最近的研究发现，MMP-2和MMP-9上调，突显出在纤维化病状中组织破坏和再生过程是常见的。MMP的活性受包括转录调节、酶原调节和MMP的特定组织抑制剂的多种机制控制。MMP和各种抑制机制之间的平衡可以调节炎症并确定愈合反应过程中胶原蛋白沉积的净额。使用MMP-2-/-、MMP-9-/-和MMP-2-/-MMP-9-/-双基因敲除小鼠的过敏性气道炎症和重塑模型的先前研究表明MMP-2和MMP-9对于炎性细胞的成功外出和清除出发炎的组织并进入空域是需要的。在缺失这些MMP的情况下，细胞被困在的肺实质内而不能移动到空域，而导致致命的窒息。阶段Ⅱ：发炎一旦接近组织损伤的部位已经实现，趋化因子梯度就召集炎症细胞。在具有细胞碎片的急性损伤部位和被吞噬细胞清除的坏死区域观察到嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞。早期召集嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞提供炎症细胞因子和趋化因子可以有助于局部TGF-β与IL-13的积累。继最初的炎症细胞的刺激和波动，炎症细胞的晚期召集可以协助吞噬作用、清除细胞碎片以及控制过度的细胞增殖，这些合起来可以有助于正常的愈合。晚期的炎症可以起抗纤维化作用，并可能对于成功消退伤口愈合反应是需要的。例如，晚期的富含吞噬性巨噬细胞的炎症谱协助清除成纤维细胞，除了IL-10的分泌调节性T细胞，抑制局部趋化因子的产生和TGF-β，可以防止过度的成纤维细胞活化。刺激或病原体的性质往往决定了随之而来的炎症反应的特征。例如，像病原体相关分子模式(PAMP)的外源性刺激由病原体识别受体(如Toll样受体和NOD样受体(在调节炎症和细胞凋亡反应上具有多种功能的胞质蛋白))识别，并影响天然细胞对入侵的病原体的反应。内源性危险信号也可以影响局部的天然细胞并协调炎症级联反应。炎症反应的性质极大地影响常驻性组织细胞和随后的炎症细胞。炎症细胞本身也通过分泌趋化因子、细胞因子和生长因子进一步传播炎症。许多细胞因子参与整个伤口愈合和纤维化反应，具有在各种条件下激活的特定群体的基因。例如，哮喘患者中的慢性过敏性气道疾病通常与升高的2型辅助性T细胞(Th2)的相关的细胞因子(包括但不限于，白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-13(IL-13)、和白细胞介素-9(IL-9))相关联，而慢性阻塞性肺病和肺纤维化疾病(如特发性肺纤维化)患者更常出现促炎性细胞因子谱(包括但不限于，白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)和血小板衍生生长因子(PDGF))。这些细胞因子已被证明具有显著的促纤维化作用，通过募集、活化和增殖成纤维细胞、巨噬细胞和肌成纤维细胞发挥作用。阶段Ⅲ：组织修复和收缩伤口愈合的闭合阶段由富含纤维蛋白(纤维状蛋白质聚合以形成在伤口部位形成凝块的“网格”)的支架形成引导的协调安排的细胞重组、伤口收缩、闭合和再上皮化组成。阐明在该创伤修复阶段涉及的过程的大多数研究来自皮肤创面的研究和体外系统。来源于肌成纤维细胞的胶原蛋白及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)形成临时性细胞外基质，与巨噬细胞、血小板和来源于成纤维细胞的纤维连接蛋白形成纤维蛋白支架。总的来说，这些结构通常被称为肉芽组织。从特发性肺纤维化患者分离的初级成纤维细胞或肺泡巨噬细胞比对照成纤维细胞产生显著更多的纤维连接蛋白和α-SMA，表明升高的成纤维细胞的活化状态。据报道，接受类固醇治疗的IPF患者与未接受治疗的IPF患者具有相似的来源于巨噬细胞的纤维连接蛋白水平升高。因此，类似于类固醇的抗IL-13介导的肌成纤维细胞分化，来源于巨噬细胞的纤维连接蛋白的释放也似乎抵抗类固醇治疗，提供了类固醇治疗可以无效的另一种原因。从动物模型看，由于在博莱霉素施用之后与它们的野生型对应物相比，具有特定纤维连接蛋白(EDA)的额外III型结构域缺失的小鼠出现显著减少的纤维化，所以纤维连接蛋白似乎是肺纤维化的发展所需要的。除纤维本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物组合物在制造药物中的用途，所述药物被配制成通过吸入递送至受试者的肺组织以用于治疗发展为肺功能丧失的肺组织损伤，肺损伤包括以下中的一者或多者：与正常健康对照受试者相比，在肺间质中细胞外基质蛋白异常沉积，其中，所述细胞外基质蛋白是胶原蛋白；在所述肺中异常促进成纤维细胞增殖；在所述肺中异常诱导肌成纤维细胞分化，和/或异常促进肌成纤维细胞附着到细胞外基质，/n其中，所述药物组合物包括治疗量的氨基酸序列为YARAAARQARAKALARQLGVAA(SEQ IDNO:1)的多肽或其功能等同物，和其药学上可接受的载体，/n其中，所述功能等同物为氨基酸序列为FAKLAARLYRKALARQLGVAA(SEQ ID NO:3)的多肽；或氨基酸序列为KAFAKLAARLYRKALARQLGVAA(SEQ ID NO:4)的多肽；或氨基酸序列为YARAAARQARAKALARQLAVA(SEQ ID NO:5)的多肽；或氨基酸序列为YARAAARQARAKALARQLGVA(SEQ ID NO:6)的多肽；或氨基酸序列为HRRIKAWLKKIKALARQLGVAA(SEQ ID NO:7)的多肽，并且/n其中，与对照赋形剂相比，所述治疗量对减少以下中的一者或多者是有效的：/n(1)所述肺中纤维化病灶的形成；/n(2)所述肺中胶原蛋白积累；或/n(3)所述肺中胶原蛋白沉积的发展。/n...

【技术特征摘要】
20110412 US 61/4743701.一种药物组合物在制造药物中的用途，所述药物被配制成通过吸入递送至受试者的肺组织以用于治疗发展为肺功能丧失的肺组织损伤，肺损伤包括以下中的一者或多者：与正常健康对照受试者相比，在肺间质中细胞外基质蛋白异常沉积，其中，所述细胞外基质蛋白是胶原蛋白；在所述肺中异常促进成纤维细胞增殖；在所述肺中异常诱导肌成纤维细胞分化，和/或异常促进肌成纤维细胞附着到细胞外基质，
其中，所述药物组合物包括治疗量的氨基酸序列为YARAAARQARAKALARQLGVAA(SEQIDNO:1)的多肽或其功能等同物，和其药学上可接受的载体，
其中，所述功能等同物为氨基酸序列为FAKLAARLYRKALARQLGVAA(SEQIDNO:3)的多肽；或氨基酸序列为KAFAKLAARLYRKALARQLGVAA(SEQIDNO:4)的多肽；或氨基酸序列为YARAAARQARAKALARQLAVA(SEQIDNO:5)的多肽；或氨基酸序列为YARAAARQARAKALARQLGVA(SEQIDNO:6)的多肽；或氨基酸序列为HRRIKAWLKKIKALARQLGVAA(SEQIDNO:7)的多肽，并且
其中，与对照赋形剂相比，所述治疗量对减少以下中的一者或多者是有效的：
(1)所述肺中纤维化病灶的形成；
(2)所述肺中胶原蛋白积累；或
(3)所述肺中胶原蛋白沉积的发展。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺损伤是辐射诱导的纤维化。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺损伤是特发性肺纤维化。


4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺损伤由施用博莱霉素引起。


5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺损伤由变态反应、环境颗粒物吸入、吸烟、细菌性感染、病毒性感染、对受治疗者肺部的机械损伤、肺移植排斥、自体免疫性疾病、遗传性疾病或其组合引起。


6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺损伤包括所述肺组织中的炎症。


7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述炎症是急性炎症或慢性炎症。


8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述炎症由选自肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的至少一种细胞因子介导。


9.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺损伤包括与正常健康对照受试者的组织中促分裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2(MK2)或促分裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶3(MK3)的活性相比所述组织中促...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛西娅兰德，科琳布罗菲，
申请(专利权)人：莫伊莱麦屈克斯公司，
类型：发明
国别省市：美国;US