一种葫芦砧木种子双处理消毒方法技术

本发明专利技术属于种植业病害防治技术领域，具体涉及一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，包括如下步骤：将葫芦砧木湿种子称重后，倒入预先配制的磷酸三钠溶液中，浸泡20‑30min后取出，清洗并干燥后，接着将其放入恒温恒湿设备中，设置温度为75℃，干热灭菌70‑72h，即得完全灭活CGMMV病毒的葫芦砧木种子。该方法创造性的对两种消毒方法进行筛选改进和整合，并应用在同一批葫芦砧木种子，经过实验明确了两种消毒方法结合时可发挥最大作用的干热处理温度及药剂溶液浓度，能够完全灭活种传CGMMV病毒。

A double treatment disinfection method of cucurbit rootstock seeds

【技术实现步骤摘要】
一种葫芦砧木种子双处理消毒方法
本专利技术属于种植业病害防治
，具体涉及一种葫芦砧木种子双处理消毒方法。
技术介绍
西瓜、甜瓜在我国水果生产中占据主要地位，具有重要经济价值。但随着产区种植面积的不断扩大、种植年限的增加，由于土传病害导致的作物减产、投入增加等问题突出。嫁接是克服土壤连作障碍、防治土传病害最有效的栽培措施之一，随着嫁接栽培的普及，国内嫁接栽培面积也在不断扩大。葫芦砧木种子是嫁接西瓜甜瓜的主要砧木，但近几年由于葫芦砧木携带绿斑驳花叶病毒(CGMMV)，导致西瓜甜瓜嫁接后病毒病频发，严重影响西瓜甜瓜的生产，给种植业带来巨大的经济损失。现有种子药剂处理方法较多，但针对CGMMV的药剂消毒方法的有效性和杀毒率未进行评定。处理方法之一的药剂处理主要是对种子表皮或内表皮所带病毒有效，对种胚所带病毒无效，另一种干热处理方法虽然有效，但在不同温度条件下病毒灭火比例未明确，是否完全灭活种传CGMMV病毒未知，也未经实践检验。现在国内种子公司和科研院所主要是通过加工阶段72-73℃干热处理或次氯酸钙、王铜、磷酸三钠或苏纳米药剂处理解决种子带毒问题，但无论是药剂处理还是干热处理都不能完全杀灭葫芦砧木种子携带的CGMMV病毒，经过处理的种子嫁接后仍会出现病毒病爆发的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决现有技术中存在的上述问题，提出了一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，该方法创造性的对两种消毒方法进行筛选改进和整合，并应用在同一批葫芦砧木种子，经过实验明确了两种消毒方法结合时可发挥最大作用的干热处理温度及药剂溶液浓度，能够完全灭活种传CGMMV病毒。本专利技术的技术方案是：一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，包括如下步骤：将葫芦砧木湿种子称重后，倒入预先配制的磷酸三钠溶液中，浸泡20-30min后取出，清洗并干燥后，接着将其放入恒温恒湿设备中，设置温度为75℃，干热灭菌70-72h，即得完全灭活CGMMV病毒的葫芦砧木种子。进一步的，所述磷酸三钠溶液的配制方法为：称取200g的磷酸三钠药剂，加入2kg水中，充分搅拌溶解后得到重量比为10％的磷酸三钠溶液。进一步的，当所述磷酸三钠药剂的质量为200g时，水加入量为2kg，此时湿种子称量的重量为1kg。进一步的，所述干热灭菌的时间为72h。进一步的，所述清洗的方法为：采用清水洗涤，至洗出的水为中性时即止。进一步的，所述干燥的方法可以为阳光下晾晒，也可采用烘箱快速干燥。进一步的，所述湿种子的来源为：葫芦砧木结果后取籽，即刻淘洗，将种子洗净后即得。本专利技术的有益效果：本专利技术综合利用磷酸三钠处理工艺和干热处理，实现种子无病毒生产，通过实验明确了种子药剂处理中处理效果最佳的TSP处理方法，并依托最新改良型干热处理设备，提高了干热处理温度，并证明75℃条件下处理72h为最有效的参数，同时进行设备内部种子加湿，摒弃了传统自然吸湿1-2周的操作方法，提高了处理效率。具体实施方式下面将结合具体实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下，所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。为了进一步理解本专利技术，下面结合实施例对本专利技术进行详细说明。实施例一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，包括如下步骤：葫芦砧木结果后取籽，将取得的种子即刻洗净，称取1kg湿种子，备用；称取200g磷酸三钠药剂加入2kg水中，配制成重量比为10％的磷酸三钠溶液，将备用的湿种子倒入配制好的10％磷酸三钠溶液中浸泡20-30min，浸泡后取出用水洗净，至洗出的水的PH值为7左右即可；接着将洗净的湿种子放入恒温恒湿设备中，设置温度为75℃，干热灭菌72h，即得完全灭活CGMMV病毒的葫芦砧木种子。试验例(一)药剂处理：包括以下步骤：(1)制备：接种绿斑驳花叶病毒的葫芦砧木结果后，将其种子取出，根据取籽得到的湿种子重量，以一定质量的水和药剂配制合适浓度的灭菌用溶液，共分为如下五组，各组湿种子及药剂和水的质量数如下表所示：(2)浸种：将湿种子放入上述灭菌用溶液中充分搅拌20-30min，然后取出种子，用水清洗，直至洗出的水的PH值达到7左右为止，用离心脱水机将种子脱水甩干。(3)晾晒：将清洗完种子进行阳光下晾晒，直至种子含水量低于7.5％。(4)将步骤(1)中进行不同处理的种子各取4份，每份100粒，4份重复进行芽率检测，检测结果如下表所示：由上表中的数据比较可知，各处理组所得到的种子的芽率无明显差别。(5)对步骤(1)中进行不同处理种子进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测：黄瓜绿斑驳花叶病毒检测用购于英国Adgen公司的试剂盒进行活体检测，各处理样品检测OD值与阴性对照OD值的比值大于2时，该样品为阳性，否则为阴性。将各处理组的种子取200粒进行检测，步骤为：先将各组取出的种子播种在穴盘中，采集前两片真叶，50片为一个样本，一次处理8个样本，进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测，检测结果见下表：结果表明磷酸三钠浸泡种子效果最好，灭菌比例37.5％，说明生产取籽后进行磷酸三钠浸泡处理是可行和有效的。(二)干热处理：包括以下步骤：(1)对步骤(一)中经过磷酸三钠组处理的种子继续进行不同温度处理试验，在预处理阶段，处理1和处理2在温度35℃，相对湿度8％下处理24h；温度50℃，相对湿度5％下处理24h；处理阶段，处理1温度72℃，处理2温度75℃，同样在相对湿度2％下处理72h；处理后阶段，温度50℃，相对湿度15％下处理6h，温度35℃，相对湿度30％下处理6h，以未干热处理的带病毒葫芦砧木种子作为对照，具体干热处理参数如下表所示：注：上述检测处理采用的处理设备来自青岛优百粒种子处理设备有限公司，型号：HBL-THS-408。(2)对干热处理种子进行芽率检测，检测方法和步骤同步骤(一)药剂处理，检测结果见下表：上述实验数据表明，干热处理后种子在经过后期回湿后对芽率没有明显影响。(3)对不同处理种子进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测，检测方法和步骤同步骤(一)药剂处理，检测结果见下表：由上表的实验数据可知，处理2的条件：75℃温度条件下处理72h，可完全灭活种传CGMMV病毒。综上可知，在生产取籽阶段进行磷酸三钠药剂处理，结合加工阶段进行75℃干热处理，可完全灭活CGMMV病毒，在葫芦砧木种子生产中具有决定性意义。上述说明仅为本专利技术的优选实施例，并非是对本专利技术的限制，凡在本专利技术的内容范围内所做出的任何修改、等同替换、改型等，均应包含在本专利技术的专利保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，其特征在于，包括如下步骤：/n将葫芦砧木湿种子称重后，倒入预先配制的磷酸三钠溶液中，浸泡20-30min后取出，清洗并干燥后，接着将其放入恒温恒湿设备中，设置温度为75℃，干热灭菌70-72h，即得完全灭活CGMMV病毒的葫芦砧木种子。/n

【技术特征摘要】
1.一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，其特征在于，包括如下步骤：
将葫芦砧木湿种子称重后，倒入预先配制的磷酸三钠溶液中，浸泡20-30min后取出，清洗并干燥后，接着将其放入恒温恒湿设备中，设置温度为75℃，干热灭菌70-72h，即得完全灭活CGMMV病毒的葫芦砧木种子。


2.根据权利要求1所述的一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，其特征在于，所述磷酸三钠溶液的配制方法为：称取200g的磷酸三钠药剂，加入2kg水中，充分搅拌溶解后得到重量比为10％的磷酸三钠溶液。


3.根据权利要求2所述的一种葫芦砧木种子双处理消毒方法，其特征在于，当所述磷酸三钠药剂的质量为200g时，水...

【专利技术属性】
技术研发人员：周玉忠，王忠全，夏世龙，李彦辉，张学玲，陈金发，
申请(专利权)人：青岛优百粒种子处理设备有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37