一种培育抗逆杨树的基因工程方法技术

本发明专利技术属于植物育种领域，尤其是植物生物技术育种领域，具体涉及一种培育抗逆杨树的方法。本发明专利技术将不同调控途径的两种转录因子基因ckAREB和JERF36#构建到同一载体pBIJEAR上，实现了两个转录因子基因相对稳定的结合，以杨树优良品种凌丰2号杨作为受体材料，通过农杆菌介导进行多基因共转化研究，建立了高效稳定的遗传转化体系，获得转基因植株。通过分子、生理等实验研究，验证转基因杨树抗逆能力，从而获得了抗逆性显著提高的转基因杨树，为我国干旱、半干旱、盐碱地区培育更多和更优良的杨树新品种了奠定基础。

A genetic engineering method for cultivating stress resistant poplar

【技术实现步骤摘要】
一种培育抗逆杨树的基因工程方法
本专利技术属于植物育种领域，尤其是植物生物技术育种领域，具体涉及一种培育抗逆杨树的基因工程方法。
技术介绍
我国干旱、半干旱地区约占国土总面积的1/2，再加上林木基因资源和木本植物自身生物学特性的限制，能够用于困难地造林的林木品种十分缺乏，严重限制了当地的生态建设及经济建设的发展。因此，培育林木抗逆新品种已成为林木良种选育的重要趋势。杨树(PopulusL.)生长快、适应性强、木材用途广，在水土保持和维护生态环境方面发挥着重要作用，是我国绿化、造林和工业用材的重要树种，但现有大多数杨树品种抗旱性较差，难以在干旱地区发挥其高产潜力。相对于常规育种途径，基因工程育种不仅可以缩短育种周期，又可在基因水平上改造林木抗性遗传物质，提高了育种的目的性和可操作性，是加速林木改良的一个重要途径。长期以来，有关林木抗逆基因工程研究主要集中在具有重要性状功能基因的转化研究上。随着基因组学和功能基因组学的不断深入研究，人们发现，植物中许多抗逆性状是受多基因共同控制的，单个功能基因很难起到预期效果。因此，通过多个本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种培育抗逆杨树的方法，其包括以下步骤：/n(1)材料的选择；/n(2)抗逆转录因子双基因载体pBIJEAR的构建；/n(3)农杆菌介导的杨树叶片的遗传转化；/n(4)转基因植株的分子检测；和/n(5)温室移栽及抗逆性测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种培育抗逆杨树的方法，其包括以下步骤：
(1)材料的选择；
(2)抗逆转录因子双基因载体pBIJEAR的构建；
(3)农杆菌介导的杨树叶片的遗传转化；
(4)转基因植株的分子检测；和
(5)温室移栽及抗逆性测定。


2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(1)中所述的材料为未木质化和半木质化当年生枝条。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤(2)中所述的构建为将来源于番茄的乙烯应答响应元件(JERF36#)和柠条的ABA响应元件结合蛋白基因(ckAREB)构建到同一植物表达载体上，从而构建JERF36-ckAREB双基因植物表达载体(pBIJEAR)，实现抗逆调控基因相对稳定串联。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中步骤(3)中所述的遗传转化包括：
(1)叶片侵染；
(2)共培养；和
(3)选择培养。


5.根据权利要求4所述的方法，其中所述的叶片侵染为取生长健壮的无菌苗叶片垂直于叶脉切3-4个切口，放入叶片再生培养基中，预培养1-3天，取出预培养叶盘浸入转化菌液中，侵染10-15min，期间轻微震荡，确保叶片与菌液充分接触。


6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述的共培养为取出叶盘，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张冰玉，苏晓华，张伟溪，丁昌俊，武舒，钟姗辰，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院林业研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11