一种皮肤紫外损伤细胞模型、建立方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种皮肤紫外损伤细胞模型、建立方法及应用，属于细胞模型建立技术领域，所述皮肤紫外损伤细胞模型的建立方法包括：(1)表皮细胞的培养；(2)紫外辐照损伤表皮细胞：紫外辐照对数生长期的表皮细胞；(3)细胞检测。所述应用为皮肤紫外损伤细胞模型在鉴定皮肤紫外损伤修复效果中的应用。本方法所建立的皮肤紫外损伤细胞模型，不需要实验动物参与，建模成本低，对于皮肤紫外损伤应激反应更加灵敏，能够在分子生物学水平上探讨皮肤紫外损伤，能够为模拟皮肤紫外实验的进行以及修复皮肤紫外药物的筛选和验证提供条件。

A cell model of skin UV damage, its establishment and Application

【技术实现步骤摘要】
一种皮肤紫外损伤细胞模型、建立方法及应用
本专利技术涉及细胞模型建立
，特别是涉及一种皮肤紫外损伤细胞模型、建立方法及应用。
技术介绍
人体皮肤受到紫外线的照射，会引起皱纹、弹性下降、松弛、DNA损伤甚至产生黑色素瘤的问题，特别是肤色较浅的人，紫外线对其伤害更为严重。其中，中波紫外线UVB生物学效应最高，是引起皮肤损伤的重要波段。正常生长情况下，皮肤细胞的生成与死亡保持平衡状态，当其受到UVB紫外辐照干扰，细胞自身不能修复损伤，引起细胞凋亡，导致晒斑、光老化，甚至皮肤癌的发生。研究表明人脸部衰老80％是由于太阳辐射，表现为皮肤粗糙、失去弹性、色素沉积、产生褶皱等。人永生化表皮角质细胞(HaCaT细胞)是非肿瘤来源的人正常皮肤永生化角质形成的细胞，和正常人细胞的生理特点与增殖分化特征十分相似，具有培养条件简单、易于增殖、并能大规模培养的优点。因此，本专利技术采用HaCaT细胞建立损伤模型模拟皮肤受UVB辐照的损伤过程。目前国内外尚无以HaCaT细胞为对象建立的用以鉴定皮肤紫外损伤修复效果的细胞模型专利。因此，需要一种方便、精本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种皮肤紫外损伤细胞模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)表皮细胞的培养；/n(2)紫外辐照损伤表皮细胞：紫外辐照对数生长期的表皮细胞，得到紫外辐照损伤表皮细胞；/n(3)细胞检测：将步骤(2)中的紫外辐照损伤表皮细胞按不同的辐照时间进行培养，培养完成后取出细胞培养皿，检测表皮细胞紫外辐照损伤指标,测定细胞的相对存活率。/n

【技术特征摘要】
1.一种皮肤紫外损伤细胞模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)表皮细胞的培养；
(2)紫外辐照损伤表皮细胞：紫外辐照对数生长期的表皮细胞，得到紫外辐照损伤表皮细胞；
(3)细胞检测：将步骤(2)中的紫外辐照损伤表皮细胞按不同的辐照时间进行培养，培养完成后取出细胞培养皿，检测表皮细胞紫外辐照损伤指标,测定细胞的相对存活率。


2.根据权利要求1所述的一种皮肤紫外损伤细胞模型的建立方法，其特征在于，所述表皮细胞为人永生化表皮角质细胞，即HaCaT细胞。


3.根据权利要求2所述的一种皮肤紫外损伤细胞模型的建立方法，其特征在于，HaCaT细胞的培养过程为：取冻存的HaCaT细胞，放置于37℃水浴锅解冻，随后转移至装有完全培养基的离心管中，离心、沉淀重悬后转移至细胞培养皿中，置于37℃，5％CO2的二氧化碳培养箱培养。


4.根据权利要求3所述的一种皮肤紫外损伤细胞模型的建立方法，其特征在于，所述完全培养基的成分为含10％胎牛血清的D...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄九九，刘伟，何俊湘，蔡雪妍，廖思艺，林瑞松，
申请(专利权)人：华南农业大学，广州美斛健生物技术有限公司，广州市博藤贸易有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44