一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明专利技术使用纯化后的兔抗BPV VP2蛋白多克隆抗体作为捕获抗体，使用由保藏号为:CGMCC No.18896的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与BRV、PRV、PEDV和TGEV均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对病毒的最低检出量为3.125×10

A double antibody sandwich ELISA kit for detection of bovine parvovirus and its application

【技术实现步骤摘要】
一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用
本专利技术涉及一株牛细小病毒VP2蛋白单克隆抗体，还涉及利用该单克隆抗体建立的用于牛细小病毒检测的双抗体夹心ELISA方法及试剂盒。本专利技术属于生物

技术介绍
牛细小病毒(Bovineparvovirus，BPV)是细小病毒科(Parvoviridae)细小病毒亚科(Parvovirinae)牛犬细小病毒属(Bocavirus)，主要分为两种BPV-1和BPV-2。牛细小病毒病是一种接触性传染病，主要导致妊娠母牛流产、死胎，犊牛主要表现为肠炎腹泻。感染牛细小病毒对母牛生殖器官及犊牛的呼吸器官、消化器官有较大影响。有研究报道，对BPV感染的牛群进行病毒分离鉴定和血清学调查，结果表明这些牛群中BPV感染发病率较高。1961年，Abinantiden和Warfield从患腹泻病犊牛的粪便和健康犊牛的消化器官中分离出细小病毒。因其具有血细胞吸附性能，故称其为血细胞吸附肠炎病毒，最初牛细小病毒感染是在美国发现的。1973年，日本稻叶等从发热、下痢的育成牛群中分离出了与HADEN不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分泌抗牛细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述的杂交瘤细胞株命名为2B5，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏号为:CGMCC No.18896。/n

【技术特征摘要】
1.一种分泌抗牛细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述的杂交瘤细胞株命名为2B5，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏号为:CGMCCNo.18896。


2.一种抗牛细小病毒VP2蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌产生。


3.权利要求1所述的杂交瘤细胞株在制备检测或诊断牛细小病毒感染试剂中的用途。


4.权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测或诊断牛细小病毒感染试剂中的用途。


5.一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括权利要求2所述的单克隆抗体以及兔抗牛细小病毒VP2蛋白多克隆抗体，其中所述的单克隆抗体作为检测抗体，兔抗牛细小病毒VP2蛋白多克隆抗体作为捕获抗体。


6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括酶标二抗、封闭液、稀释液、洗涤液、显色液以及终止液。


7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述的酶标二抗为HRP标记的山羊抗小鼠IgG，所述的封闭液是将5g脱脂乳定容于100mLPBS缓冲液中后得到；所述的稀释液是将2.93gNaHCO3、1.5gNa2CO3、定容于1L去离子水中，pH调至9.6后得到；所述的洗涤液是将0.2gKH2PO4、2.9gNa2HPO4·12H2O、8.0g氯化钠、0.2gKCl、0....

【专利技术属性】
技术研发人员：乔薪瑗，李一经，徐义刚，唐丽杰，王丽，姜艳平，崔文，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙;23