高活性PET水解酶突变体及其应用制造技术

技术编号:23924904 阅读:89 留言:0更新日期:2020-04-24 23:36
本发明专利技术公开了高活性PET水解酶突变体及其应用。本发明专利技术提供了蛋白,为如下1)‑11)中任一种:1)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸,且将第251位的精氨酸突变丙氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;本发明专利技术利用结构分析及定点突变技术将原有PET水解酶(PETase)进行突变,得到8种突变体,改变原有PET水解酶活性较低的问题,有效提高PETase降解PET的活性,提升PETase的降解效果。PET是一个难以降解的不溶性高聚物,本发明专利技术8种突变体大大提高了PET塑料的降解效率,工业应用前景良好。

High activity pet hydrolase mutant and its application

【技术实现步骤摘要】
高活性PET水解酶突变体及其应用
本专利技术属于基因工程领域,尤其涉及高活性PET水解酶突变体及其应用。
技术介绍
塑料制品给人类生活带来了便利,但同时引起的白色污染已经严重威胁全球生态系统,仅2015年全球就产生了3.2亿吨塑料。其中聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethyleneterephthalate,PET)塑料占全球聚合物总量的18%,是白色污染的重要来源。PET由对苯二甲酸(TPA)和乙二醇(EG)通过酯键聚合而成,性质稳定不易分解,常用于矿泉水瓶、涤纶衣服和吸塑包装等产品。目前对塑料PET废弃物的处理方法主要有:填埋、焚烧以及回收利用等。填埋和焚烧虽然简单,但产生的废气、废水会对环境造成二次污染;回收利用由于回收成本的经济性和回收塑料的性能问题,导致现阶段回收利用率较低。而利用生物法(如酶降解或者微生物降解)将PET降解成组成分子,然后回收再利用才是真正的分解塑料,且是最理想的处理方法之一。此法不但解决了PET废弃物的问题,并且能够回收利用。在过去的十几年中,科学家已经从酯酶(esterase)、脂肪酶(lipase)和角本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白,为如下1)-11)中任一种:/n1)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸,且将第251位的精氨酸突变丙氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;/n2)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;/n3)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丝氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;/n4)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为甘氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶...

【技术特征摘要】
1.一种蛋白,为如下1)-11)中任一种:
1)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸,且将第251位的精氨酸突变丙氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
2)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丙氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
3)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为丝氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
4)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为甘氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
5)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为天冬氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
6)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为谷氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
7)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为精氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
8)所示的蛋白为将野生型PET水解酶第204位的天冬酰胺突变为色氨酸,其他位置的氨基酸残基不变,得到的具有PET水解酶活性的蛋白;
9)所示的蛋白由序列22第1-180位所示的氨基酸残基和1)-8)中任一种蛋白组成;
10)所示的蛋白为将1)-9)中任一种蛋白中除去突变位点外,其他氨基酸残基同源性大于99%以上、95%以上、90%以上、85%以上或者80%以上同源性,且具有PET水解酶活性的蛋白;
11)所示的蛋白为将1)-10)中任一种蛋白的氨基酸序列末端添加标签序列得到的具有PET水解酶活性的蛋白质。


2.根据权利要求1所述的蛋白,其特征在于:所述野生型PET水解酶来自Ideonellasakaie...

【专利技术属性】
技术研发人员:韩旭刘卫东郑迎迎高健商娜李倩韦泓丽黄建文陈纯琪郭瑞庭
申请(专利权)人:中国科学院天津工业生物技术研究所
类型:发明
国别省市:天津;12

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