一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系及其制备方法技术

一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系，血小板载药体系指大鼠血小板载药体系，是mPEG‑PCL修饰阿托伐醌、PEG修饰纳米金与大鼠血小板的混合物即Ato‑Au@Plt；所述靶向肿瘤，提高放疗敏感性所述的血小板载药体系采用血小板为载体，实现体内长循环及肿瘤微环境靶向释放药物，提高肿瘤的放疗敏感性。本发明专利技术通过肿瘤微环境激活血小板载体，发生变形、聚集、靶向肿瘤释放药物；释放的药物能够抑制肿瘤细胞氧化磷酸化，解决乏氧，同时与纳米金协同作用，提高肿瘤对放疗的敏感性，继而提高放疗治疗效果。

A platelet drug delivery system targeting tumor and improving radiotherapy sensitivity and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系及其制备方法
本专利技术具体涉及一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性，继而提高放疗治疗效果的载药体系。
技术介绍
尽管目前已有多种抗肿瘤药物上市，但是由于肿瘤靶向性不佳，肿瘤内蓄积能力较差，使得抗肿瘤效果不尽如人意。如何高效地将抗肿瘤药物递送入肿瘤，提高药物在肿瘤部位的浓度，降低其在正常组织中的浓度，成为制药领域研究的热点。放疗几乎适用于所有的肿瘤，但治疗效果不尽相同，其中肿瘤细胞的含氧量直接影响了放疗的敏感性。放疗增敏是提高放疗效果、减少副作用的有效做法。放疗增敏剂及解决肿瘤乏氧能够起到提高放疗敏感性的良好效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是，为了解决现有技术中存在的缺陷，提供一种能够实现肿瘤靶向释药、提高放疗敏感性的新药物及制备方法。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种实现肿瘤靶向释药、提高放疗敏感性药物(Ato-Au@PLT)。本专利技术还提供了上述血小板载药体系的制备方法。本专利技术还提供了上述血小板载药体系在放疗抗肿瘤方面的应用。本专利技术的技术方案：一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系，血小板载药体系指大鼠血小板载药体系，是mPEG-PCL修饰阿托伐醌、PEG修饰纳米金与大鼠血小板(也可以是其它血小板)的混合物；所述靶向肿瘤，提高放疗敏感性的所述血小板载药体系指采用大鼠血小板为载体，实现体内长循环及肿瘤微环境靶向释放药物，提高肿瘤的放疗敏感性。所述靶向肿瘤、提高放疗敏感性的所述血小板载药体系的粒径为1664±27nm。所述大鼠血小板载药体系即Ato-Au@Plt的粒径激活后从1664nm逐步变小，最终粒径为46.47nm。所述靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系的制备方法，包括以下步骤：(1)血小板的提取：经过收集、分离、抑制活化等步骤，获得血细胞载体；(2)阿托伐醌的预处理：对阿托伐醌进行疏水改性；(3)血小板包载阿托伐醌及纳米金：将步骤(1)制备的大鼠血小板包裹纳米金及步骤(2)得到的阿托伐醌，得到大鼠血小板载药体系Ato-Au@PLT。所述步骤(1)中血小板的收集、分离、抑制活化等步骤制备血小板载体具体步骤如下：(1)SPF级SD大鼠，10％水合氯醛溶液，按0.3mL/kg体质量行腹腔注射麻醉，三线定位确定穿刺位点，使用采血针采血，利用采血管负压收集血液。(2)为了分离血小板，将血液和血浆样品在室温下以100g离心20分钟以分离红细胞和白细胞。(3)将得到的血小板以100g离心20分钟以除去剩余的血细胞。将含有1mMEDTA和2mM前列腺素E1(PGE1，SigmaAldrich)的PBS缓冲液加入到纯化的血细胞中以防止血小板活化。(4)通过在室温下以800g离心20分钟沉淀血小板，之后弃去上清液并将血小板重悬于含有1mMEDTA的PBS中并与蛋白酶抑制剂(Pierce)混合。所述的制备方法步骤(2)中：取mPEG-PCL与阿托伐醌，质量比2：1，将阿托伐醌溶解于DMSO，再分散在纯水中，加入mPEG-PCL，搅拌0.5h。所述的制备方法步骤(3)：将PEG溶解于纯水中，并按体积比1：1与纳米金溶液混合，旋转搅拌0.5h。对阿托伐醌进行疏水改性及纳米金提高稳定性后与血小板混合，超声80W15分钟。所述靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系在制备治疗肿瘤方面的应用。本专利技术提供抑制肿瘤细胞线粒体呼吸药物及肿瘤增敏剂纳米金采用血小板包载；肿瘤微环境激活血小板载体，发生变形、聚集、靶向肿瘤释放药物；释放的药物能够抑制肿瘤细胞氧化磷酸化，解决乏氧，同时与纳米金协同作用，提高肿瘤对放疗的敏感性，继而提高放疗治疗效果。采用本专利技术实现体内长循环，药物释放实现肿瘤微环境响应释放，靶向肿瘤，抑制肿瘤细胞氧化磷酸化，解决乏氧，提高纳米金的放疗增敏效果，继而提高放疗治疗效果。本专利技术相比现有技术具有以下效果：提高药物的肿瘤靶向性：药物经过血小板包载后，能够正常在血液中循环，不会被血液清楚；当到达肿瘤部位，载药血小板会被激活，从而聚集、释放内容药物，达到体内长循环及靶向释放药物的目的。提高放疗敏感性：放疗是氧依赖性的治疗方法，乏氧会大大降低放疗的效果。本研究中采用抑制肿瘤细胞的氧化磷酸化，减少对氧气的消耗，更加有效地降低肿瘤的氧消耗，从而解决肿瘤乏氧；同时增加了纳米金，提高放疗增敏作用，达到了良好的效果。减少放疗副作用：放疗效果低下，往往采用提高放疗剂量的方法，但这样副作用比较大。本研究中解决了放疗效果低下的根本原因，使得放疗效果大大提高，从而能够在低剂量下达到杀伤肿瘤细胞的放疗效果，也减少了放疗对正常组织的损伤。为低剂量放疗提高数据积累：本研究中提出的靶向肿瘤、提高放疗敏感性的治疗策略，有望能够为现有的临床试验提供理论依据和实验室数据。也为提高肿瘤治疗效果提供一个新思路。附图说明图1为本专利技术Ato-Au@Plt血小板靶向肿瘤、解决乏氧提高肿瘤放射治疗效果示意图。图中，(A)血小板靶向肿瘤纳米粒子Ato-Au@Plt的制备过程；(B)Ato-Au@Plt靶向肿瘤过程：Ato-Au@Plt在血管内循环，在肿瘤微环境中，血小板被激活、集聚；(C)Ato-Au@Plt在肿瘤微环境中聚集、释放内容物；(D)Ato干扰线粒体电子传递，解决乏氧；图2为本专利技术Ato-Au@Plt的激活过程。图中，(A-C)SEM表征图，依次是激活开始、激活中、激活后；(D)Ato-Au@Plt的激活前后的DLS粒径分布图；(E、F)Ato-Au@Plt激活过程中，上清中内容物释放百分比；图3为本专利技术Ato-Au@Plt的体内靶向结果。图中，(A)Ato-Au@Plt主要是集聚在肿瘤部位。Ato-AuNPs直接静脉注射后，很快就集聚在肝脏部位被清除。(B)Ato-Au@Plt组在肝脏和肿瘤组织中出现富集；而Ato-AuNPs组仅在肝脏中出现富集；图4为本专利技术Ato-Au@Plt抑制细胞呼吸作用结果。图中，(A)溶液溶解氧监测示意图；(B)给药24h后，溶解氧剩余百分比；(C)溶解氧—时间变化曲线；(D)给药6h激活Ato-Au@Plt溶解氧变化曲线图；(E)激活与非激活Ato-Au@Plt给药后细胞数量柱状图。图5为本专利技术Ato-Au@Plt给药后荷瘤小鼠瘤体积变化及生存情况。图中，(A)给药方案；(B)体积变化曲线；(C)肿瘤重量变化曲线；(D)生存率变化曲线。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。本专利技术靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系的具体制备过程如下：1.血小板的制备(1)SPF级SD大鼠，10％水合氯醛溶液，按0.3mL/kg体质量行腹腔注射麻醉，三线定位确定穿刺位点，使用采血针采血，利用采血管负压收集血液。(2)为了分离血小板，将血液和血浆样品在室温下以100g离心20分钟以分离红细胞和白细胞。(3)将得到的血小板以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系，其特征在于：血小板载药体系指大鼠血小板载药体系，是mPEG-PCL修饰阿托伐醌、PEG修饰纳米金与大鼠血小板的混合物即Ato-Au@Plt；所述靶向肿瘤，提高放疗敏感性所述的血小板载药体系采用血小板为载体，实现体内长循环及肿瘤微环境靶向释放药物，提高肿瘤的放疗敏感性。/n

【技术特征摘要】
1.一种靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系，其特征在于：血小板载药体系指大鼠血小板载药体系，是mPEG-PCL修饰阿托伐醌、PEG修饰纳米金与大鼠血小板的混合物即Ato-Au@Plt；所述靶向肿瘤，提高放疗敏感性所述的血小板载药体系采用血小板为载体，实现体内长循环及肿瘤微环境靶向释放药物，提高肿瘤的放疗敏感性。


2.根据权利要求1所述的靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系，其特征在于：所述靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系粒径为1664±27nm。


3.根据权利要求2所述的靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系，其特征在于：所述血小板载药体系Ato-Au@Plt的粒径激活后从1664nm逐步变小，最终粒径为46.47nm。


4.权利要求1至3任一所述靶向肿瘤、提高放疗敏感性的血小板载药体系的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)血小板的提取：经过收集、分离、抑制活化等步骤，获得血细胞载体；
(2)阿托伐醌的预处理：对阿托伐醌进行疏水改性；
(3)血小板包载阿托伐醌及纳米金：将步骤(1)制备的血小板包裹纳米金及步骤(2)得到的阿托伐醌，得到血小板载药体系Ato-Au@PLT。


5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中收集、分离、抑制活化等步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡勇，夏栋林，罗星谕，蒋炜，张超，
申请(专利权)人：南京大学射阳高新技术研究院，
类型：发明
国别省市：江苏;32