可用于市售食品的环境雌激素的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种可用于市售食品的环境雌激素的测定方法，所述多种环境雌激素包括双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4‑己基苯酚和雌三醇，方法步骤包括基质分散固相萃取和气相色谱分离分析。经测试实际样品，本研究方法适用于多种类型的食品，能准确的体现食品中雌激素实际残留情况。

Determination of environmental estrogens for commercial food

【技术实现步骤摘要】
可用于市售食品的环境雌激素的测定方法
本专利技术涉及环境雌激素的测定方法，具体涉及一种食品中多种环境雌激素的测定方法。
技术介绍
环境雌激素(environmentalestrogens，EEs)是指一类进入机体后，具有干扰体内正常内分泌物质的合成、释放、运输、结合、代谢等过程，激活或抑制内分泌系统的功能，从而破坏维持机体稳定性和调控作用的化合物，包括人工合成化合物及植物天然雌激素，属于环境雌激素(environmentalendocrinediscruptors，EEDs)中的一类。越来越多的野生动物和实验室的证据表明，双酚A(bisphenolA，BPA)、烷基酚、雌二醇、己烯雌酚等均具有明显的环境雌激素效应，属于典型的环境雌激素。这些物质对近年来男性睾丸癌和前列腺癌发病率的上升、精子数量的减少；女性乳腺癌、子宫癌发病率的增加；雄性动物的雌性化和免疫功能的改变；以及鸟类、鱼类和哺乳动物生育率的下降、部分生态系统中动物雌雄比例失调等具有不容忽视的作用。在生态系统循环过程中，难以避免地会使得各类食品残留有环境雌激素，这些环境雌激素在人们摄入食品时进入人体，对人体造成伤害，故对食品中的环境雌激素进行检测，具有急迫的需要。现有技术中，对环境雌激素的检测方法主要是高效液相色谱法，少有采用气相色谱法，并且采用气相色谱法时，也多采用质谱作为检测器，仪器成本较高。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种可用于市售食品的环境雌激素的测定方法，测定方法简单、准确而且灵敏度高。r>本专利技术的目的是这样实现的：一种可用于市售食品的环境雌激素的测定方法，所述多种环境雌激素包括双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇。测定步骤如下：(1)提取称取均质样品，置于离心管中，加入甲酸乙腈溶液和氯化钠(样品为固体时，还加入适量水)，涡旋混匀，离心，取上清液到另一离心管中，加入PSA、硅胶、NH2和无水硫酸钠，涡旋混合，离心，取上清液，浓缩，复溶，过滤，定容，得待测液；(2)检测SPB-50色谱柱(30m×0.25mm，0.25μm)；载气：氮气；进样口温度：250℃；升温程序：初始柱温为70℃，以40℃/min升至180℃，保持2min，以5℃/min升至230℃。进一步的，提取步骤具体为：称取均质样品2.0g，置于50mL离心管中，加入15mL甲酸乙腈溶液和1g氯化钠(样品为固体时，还加入10mL水)，涡旋混匀1min，离心5min，取上清液到另一离心管中，加入50mgPSA、20mg硅胶、100mgNH2和1g无水硫酸钠，涡旋混合1min，离心5min，取上清液，浓缩，复溶，过滤，定容，得待测液；进一步的，食品为牛奶。进一步的，所述甲酸乙腈溶液中甲酸的浓度为0.1％。进一步的，离心条件为8000r/min。进一步的，浓缩步骤采用氮气吹扫的方法进行。进一步的，过滤步骤采用0.45μm微孔滤膜。进一步的，色谱条件还包括：载气流速：1.0ml/min；进样方式：分流进样，分流比20:1；进样体积：1μL；FID检测器温度250℃。为了完善和补充原有的环境雌激素测定方法，本申请采用气相色谱法建立了食品中多种环境雌激素的测定方法。实验结果表明，该方法净化效果良好，具有较好的灵敏度、回收率和重现性，适用于市售食品中环境雌激素的检测。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：(1)本专利技术在样品前处理时采用基质分散固相萃取法，操作简单方便，可以有效地提取食品样品中的双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇；(2)本专利技术中色谱条件能同时对上述6种雌激素进行有效分离，分析时间短，效率高。附图说明图1为实施例1的色谱图；图中：1～6依次为双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇。具体实施方式下面结合附图对本专利技术作进一步说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换，均落入本专利技术保护范围。萃取溶剂的选择根据待测组分的极性与溶解性特征，比较了甲醇、丙酮、乙腈的效果，实验发现，乙腈的回收率最高。色谱柱的选择比较了SPB-1、SPB-50、SPB-608三种不同极性的色谱柱，实验发现，SPB-50能对6种雌激素进行有效分离。实施例1采用本专利技术所述方法检测食品中6种雌激素的含量。仪器：Agilent6890N气相色谱仪，配有火焰离子化检测器(FID)，TB-114型分析天平，SPB-50色谱柱。标准品：双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇(纯度均>99.0％)；甲酸、乙腈(色谱纯)。待测化妆品：牛奶。前处理过程：称取均质样品2.0g，置于50mL离心管中，加入15mL0.1％甲酸乙腈溶液和1g氯化钠(样品为固体时，还加入10mL水)，涡旋混匀1min，8000r/min离心5min，取上清液到另一离心管中，加入50mgPSA、20mg硅胶、100mgNH2和1g无水硫酸钠，涡旋混合1min，8000r/min离心5min，取上清液，氮气吹扫浓缩，复溶，0.45μm微孔滤膜过滤，定容，得待测液；取1μL上述洗脱液注入气相色谱仪检测，测定色谱图；气相色谱条件如下：SPB-50色谱柱(30m×0.25mm，0.25μm)；载气：氮气；进样口温度：250℃；升温程序：初始柱温为70℃，以40℃/min升至180℃，保持2min，以5℃/min升至230℃；载气流速：1.0ml/min；进样方式：分流进样，分流比20:1；进样体积：1μL；FID检测器温度250℃。样品的色谱图如图1所示。综上，本专利技术提供的食品中6种雌激素的含量测定方法，样品前处理简便、高效，能有效提取出食品中的双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇，并进行了有效的色谱分离。经测试实际样品，本研究方法适用于多种类型的食品，能准确的体现食品中雌激素实际残留情况。以上所述仅为本专利技术的优选实施例，不能认定本专利技术的具体实施只局限于这些说明。对于本专利技术所属
的相关技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，其中所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可用于市售食品的环境雌激素的测定方法，其特征在于，步骤如下：/n所述多种环境雌激素包括双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇；/n测定步骤如下：/n(1)提取/n称取均质样品，置于离心管中，加入甲酸乙腈溶液和氯化钠(样品为固体时，还加入适量水)，涡旋混匀，离心，取上清液到另一离心管中，加入PSA、硅胶、NH

【技术特征摘要】
1.一种可用于市售食品的环境雌激素的测定方法，其特征在于，步骤如下：
所述多种环境雌激素包括双酚A、壬基酚、辛基酚、乙烯雌酚、2,4-己基苯酚和雌三醇；
测定步骤如下：
(1)提取
称取均质样品，置于离心管中，加入甲酸乙腈溶液和氯化钠(样品为固体时，还加入适量水)，涡旋混匀，离心，取上清液到另一离心管中，加入PSA、硅胶、NH2和无水硫酸钠，涡旋混合，离心，取上清液，浓缩，复溶，过滤，定容，得待测液；
(2)检测
SPB-50色谱柱(30m×0.25mm，0.25μm)；载气：氮气；进样口温度：250℃；升温程序：初始柱温为70℃，以40℃/min升至180℃，保持2min，以5℃/min升至230℃。


2.权利要求1所述的一种可用于市售食品的环境雌激素的测定方法，其特征在于，提取步骤具体为：称取均质样品2.0g，置于50mL离心管中，加入15mL甲酸乙腈溶液和1g氯化钠(样品为固体时，还加入10mL水)，涡旋混匀1min，离心5min，取上清液到另一离心管中，加入50mgPSA、20mg硅胶、1...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄志豪，
申请(专利权)人：黄志豪，
类型：发明
国别省市：广东;44