一种高CBD含量工业大麻的育种方法技术

本发明专利技术公开了一种高CBD含量工业大麻的育种及育苗方法，所述的育种方法包括：(1)高CBD含量工业大麻的亲本的选择：以CBD含量大于1％的工业大麻种子作为父本，以CBD：THC含量比例高于5的雌雄异株大麻DMG245作为母本；(2)高CBD含量工业大麻品系的培育：将筛选出的亲本进行杂交获得F1代；F1代自交，获得F2代；从F2代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F3代；将F3代自交，获得F4代；从F4代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F5代；将F5代自交，获得F6代，即得CBD含量为1.5％以上工业大麻品系。

【技术实现步骤摘要】
一种高CBD含量工业大麻的育种方法
本专利技术涉及工业大麻育种
，更具体地，涉及一种高含量CBD工业大麻的育种方法。
技术介绍
大麻是大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)1年生草本植物。工业大麻是指四氢大麻酚含量低于0.3％的大麻，也称为汉麻(hemp)，可作纤用、籽用、药用等。现在国内外广泛应用的大麻为工业大麻。大麻酚类化合物中药用价值最高的活性成分为四氢大麻酚和大麻二酚，两者为同分异构体，但活性作用有很大差异。大麻二酚是从大麻中提取的非精神活性成分，不会导致生理依赖，具有良好的耐受性，对神经疾病、癫痫、肿瘤、炎症、肝损伤、糖尿病、疼痛等多种疾病都表现出一定的治疗特性，在医药领域的重要性越发凸显。在允许使用工业大麻的国家中，实际上允许使用的是具有医疗作用的CBD(大麻二酚)，也即工业大麻。工业大麻中CBD含量越高价值越高。我国目前成熟的高CBD含量的工业大麻种子是云麻7号，CBD含量最高在1.3％，平均值在1％。杂交育种包括单杂交、复合杂交、回交等方法。单杂交即两个品种间的杂交(单交)用甲×乙表示，其杂种后代称为单交种，由于简单易行、经济，在生产上应用最广，一般主要是利用杂种第一代，如丰鲤、福寿鱼。回交即杂交后代继续与其亲本之一再杂交，以加强杂种世代某一亲本性状的育种方法。回交育种能把某一群体乙的一个或几个经济性状引入另一群体甲中。将回交子代选择的注意力集中在某个目标性状上，从而最终育成一个具有目标形状的新品种/品系。CN109673505A公开了一种工业大麻的杂交育种方法，以雌雄同株工业大麻DMG240为父本，以高大麻二酚含量的雌雄异株工业大麻DMG231为母本，得到F1代全雌型高大麻二酚工业大麻杂交种，命名为汉麻1号。汉麻1号平均CBD含量为3.60％，是云麻7号的CBD含量的3-4倍，平均THC含量为0.18％。CN109122306A公开了一种获得高大麻二酚含量工业大麻植株的方法，包括：当工业大麻实生苗植株初长到拔节期或灌浆期时，在植株茎尖上包裹或放置棉团，然后用甲基磺酸乙酯溶液滴于植株茎尖的棉团上，进行诱变反应；移去棉团，用NaS2O3溶液涂抹茎尖终止诱变反应，再用流水冲洗，作成长高度标记；待工业大麻植株从标记的部位向上长到获得生长高度时，取插穗进行扦插，待插穗生根后移栽，并按常规栽培管理；经甲基磺酸乙酯处理后成活的突变植株，对其进行性状稳定性验证后，从中筛选出大麻二酚CBD含量高的突变植株。然而，目前仍然需要寻找新的工业大麻品系，提高工业大麻花叶中CBD含量。
技术实现思路
本专利技术提供了一种高CBD含量工业大麻的育种方法，所述的方法包括：(1)高CBD含量工业大麻的亲本的选择：以CBD含量大于1％的工业大麻种子作为父本，以CBD：THC含量比例高于5的雌雄异株大麻DMG245作为母本；(2)高CBD含量工业大麻品系的培育，具体步骤如下：将上述筛选出的亲本进行杂交获得F1代；F1代自交，获得F2代；从F2代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F3代；将F3代自交，获得F4代；从F4代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F5代；将F5代自交，获得F6代，即得CBD含量稳定在1.5％以上的大麻品系。优选的，本专利技术所述的以CBD含量大于1％的工业大麻种子作为父本选择CBD含量大于1％的工业大麻云麻7号作为父本。优选的，本专利技术所述的雌雄异株大麻DMG245具有抗病抗虫、低毒、耐盐的特性。优选的，本专利技术所述的CBD含量的测定方法为HPLC法测定工业大麻花叶中CBD的含量。更优选的，所述的HPLC法中色谱柱为C18柱；所述的HPLC法中流动相甲醇-水(80：20)；所述的HPLC法中检测波长210nm；所述的HPLC法中流动相的流速为1ml/min；所述的HPLC法中样品的进样量为20μl。更优选的，所述的HPLC法中工业大麻花叶的处理方法包括：取工业大麻花叶粉碎，过筛，称取3g加入甲醇25ml，超声15min，冷却，用甲醇补重，过滤，取续滤液3ml置10ml量瓶中，加甲醇定容。本专利技术还提供了一种高CBD含量工业大麻的育苗方法，所述的方法包括：(1)获得高CBD含量工业大麻种子：以CBD含量大于1％的工业大麻种子作为父本，以CBD：THC含量比例高于5的雌雄异株大麻DMG245作为母本；将上述筛选出的亲本进行杂交获得F1代；F1代自交，获得F2代；从F2代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F3代；将F3代自交，获得F4代；从F4代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F5代；将F5代自交，获得F6代，即得CBD含量稳定在1.5％以上的大麻品系。(2)将育苗基质装入漂浮育苗盘中；(3)向步骤(2)的漂浮育苗盘中播种步骤(1)获得的工业大麻种子，然后覆盖育苗基质；(4)将步骤(3)的漂浮育苗盘放入育苗池中；(5)出苗后第3-5天炼苗；(6)出苗第9-11天追肥。优选的，所述的育苗基质包含草炭、珍珠岩、蛭石，三者的比例为2-4:1-3:1；更优选的，所述的育苗基质为将草炭、珍珠岩和蛭石按照3:2:1的比例混合所得。优选的，所述的育苗基质的水分含量控制为50％-70％(具体如，50％、60％、70％)。在本专利技术的一个实施方式中，所述的漂浮育苗盘为162孔漂浮育苗盘。在本专利技术的一个实施方式中，步骤(3)中的播种包括每孔播种1-5粒(如1、2、3、4、5粒)工业大麻种子。具体地，步骤(3)中播种后覆盖的育苗基质的厚度为1-2cm。具体地，步骤(3)中播种的种子为在播种前经过温水浸泡和消毒处理的饱满种子。在本专利技术的一个实施例中，所述的温水浸泡处理包括：在35-45℃温水浸泡4-5h。在本专利技术的一个实施例中，所述的消毒处理包括：采用杀菌剂溶液浸泡5-10min；所述的杀菌剂选自：多菌灵、波尔多液、百菌清、托布津、代森锌等中的一种或多种的组合；在本专利技术的一个实施例中，上述杀菌剂为多菌灵；在本专利技术的一个实施例中，所述的杀菌剂溶液为300-700倍(具体如，300、400、500、600、700倍)多菌灵溶液。具体地，步骤(3)还包括：对育苗盘中的育苗基质表面进行消毒处理的步骤，如采用杀菌剂溶液进行消毒处理；所述的杀菌剂选自：多菌灵、波尔多液、百菌清、托布津、代森锌等中的一种或多种的组合；在本专利技术的一个实施例中，所述的杀菌剂为百菌清；在本专利技术的一个实施例中，所述的杀菌剂溶液为600-1000倍(具体如，600、700、800、900、1000倍)百菌清溶液。在本专利技术的一个实施方式中，步骤(4)中的育苗池在放入漂浮育苗盘前预先进行水体消毒和病害预防以及施肥处理。具体地，所述的水体消毒和病害预防处理包括向育苗池水中施入杀菌剂溶液的步骤；上述杀菌剂选自本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高CBD含量工业大麻的育种方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)高CBD含量工业大麻的亲本的选择：以CBD含量大于1％的工业大麻种子作为父本，以CBD：THC含量比例高于5的雌雄异株大麻DMG245作为母本；/n(2)高CBD含量工业大麻品系的培育：/n将筛选出的亲本进行杂交获得F1代；/nF1代自交，获得F2代；/n从F2代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F3代；/n将F3代自交，获得F4代；/n从F4代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F5代；/n将F5代自交，获得F6代，即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种高CBD含量工业大麻的育种方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)高CBD含量工业大麻的亲本的选择：以CBD含量大于1％的工业大麻种子作为父本，以CBD：THC含量比例高于5的雌雄异株大麻DMG245作为母本；
(2)高CBD含量工业大麻品系的培育：
将筛选出的亲本进行杂交获得F1代；
F1代自交，获得F2代；
从F2代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F3代；
将F3代自交，获得F4代；
从F4代中选择CBD含量为1.5％以上的单株与DMG245母本回交，获得F5代；
将F5代自交，获得F6代，即得。


2.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述的高CBD含量工业大麻为CBD含量为1.5％以上工业大麻品系。


3.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，以CBD含量大于1％的工业大麻云麻7号作为父本。


4.根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，所述的CBD含量采用HPLC方法测定CBD。


5.根据权利要求4所述的育种方法，其特征在于，所述的HPLC法中色谱柱为C18柱；所述的HPLC法中流动相甲醇-水(80：20)；所述的HPLC法中检测波长210nm；所述的HPLC法中流动相的流速为1ml/min；所述的HPLC法中样品的进样量为20μl。


6.根据权利要求4所述的育种方法，其特征在于，所述的HPLC法中样品溶液的处...

【专利技术属性】
技术研发人员：张可，谭昕，陈越，王卫，田伟，施逢时，胡岂瑄，刘有贵，
申请(专利权)人：云南素麻生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53