【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】定量的液体活检诊断系统与方法
本专利技术提供了基于简单的血液样品的定量的液体活检诊断系统和用于执行诊断分析的方法。所述系统提供了液体活检方法，该方法检测并识别源于患者血细胞中的血细胞亚群，包括稀有细胞，例如循环肿瘤细胞(CTC)，用于精确诊断癌症、疾病演变的早期检测和癌症患者管理。本专利技术利用选择性平面照明显微镜(SPIM)，为检测和分离个体CTC提供高灵敏度和特异性，取代现有的早期癌症检测方法的功效。分离的CTC可以分析它们的分子指纹，其可以导致基因异常与特定药物治疗相匹配。该系统允许离体观察活肿瘤细胞对治疗的响应。活细胞的这种观察为肿瘤学家提供了通过测试患者自身的细胞来优化治疗方案，然后给患者提供治疗，以期望提高疗效和减少对正常细胞的毒性的新的潜力。专利技术背景传统的实体组织活检是癌症诊断的金标准。然而，这些分析是静态的，并且需要固定和染色的样品，通过传统显微镜技术进行组织学分析。这限制了样品的尺寸和厚度，并且在动态条件下，没有提供更容易地取得样品和监测样品的机会。对于疾病进展和患者管理的持续监测，液体活检具有独特...
【技术保护点】
1.一种表征和定量血液样品中靶细胞的方法，该方法包括以下步骤：/n(a)从受试者获得血液样品，/n(b)通过以下步骤(i)到(vi)中的一个或多个步骤来制备样品，包括/n(i)离心以从血清层分离细胞层/n(ii)去除细胞层中的一层，/n(iii)在缓冲液中悬浮从步骤(b)(ii)中去除的层，/n(iv)纯化(b)(iii)的悬浮层，/n(v)固定(b)(iv)的纯化层，以及/n(vi)将(b)(v)的固定层免疫染色和/或荧光原位杂交(FISH)染色，/n(c)将制备好的样品从(b)置于选择性平面图像显微镜下，通过激光片光源在多个横截面扫描样品，以获得连续的横截面图像，/n(...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170627 US 62/525,3661.一种表征和定量血液样品中靶细胞的方法，该方法包括以下步骤：
(a)从受试者获得血液样品，
(b)通过以下步骤(i)到(vi)中的一个或多个步骤来制备样品，包括
(i)离心以从血清层分离细胞层
(ii)去除细胞层中的一层，
(iii)在缓冲液中悬浮从步骤(b)(ii)中去除的层，
(iv)纯化(b)(iii)的悬浮层，
(v)固定(b)(iv)的纯化层，以及
(vi)将(b)(v)的固定层免疫染色和/或荧光原位杂交(FISH)染色，
(c)将制备好的样品从(b)置于选择性平面图像显微镜下，通过激光片光源在多个横截面扫描样品，以获得连续的横截面图像，
(d)收集足够数量的连续的横截面图像，
(e)编译连续的横截面图像以生成合成图像，以及
(f)评估合成图像以表征和定量任何靶细胞的血液样品。
2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(c)的扫描是在激光片光的一个或多个所选择的激发频率下进行的。
3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(d)的收集涉及与步骤(c)的激光片光源正交的样品的荧光发射的检测。
4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(f)的合成图像是三维图像。
5.根据权利要求1所述的方法，其中(b)(i)或(b)(ii)的层是血沉棕黄层。
6.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(b)(iii)的缓冲液是磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(b)(V)的固定是在维持细胞结构的凝胶中，例如琼脂糖凝胶，或胶原凝胶，或聚丙烯酰胺凝胶。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物或鸟类。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者是人。
10.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶细胞被表征。
11.根据权利要求11所述的方法，其中所述靶细胞被定量。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶细胞为循环肿瘤细胞(CTC)。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶细胞是白细胞(WBC)亚群。
14.根据权利要求11所述的方法，其中所述白细胞(WBC)亚群是T-细胞。
15.一种用于定量和表征生物样品中靶细胞的系统，该系统包括：
(a)选择性平面照明显微镜
(b)样品固定装置，该样品固定装置用于容纳生物样品，
(c)检测器，该检测器用于收集从显微镜垂直(90度)反射到光学平面的光图像，
(d)计算机界面，以及
(e)计算机，该计算机用于编译光图像以生成三维图像。
16.根据权利要求15所述的系统，进一步地包括用于分析3-D图像以检测靶细胞的软件。
17.根据权利要求15或...
【专利技术属性】
技术研发人员：T·P·塔法斯，S·温弗里，
申请(专利权)人：定量癌症诊断有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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