治疗下肢缺血性疾病的干细胞治疗剂及其用途制造技术

本发明专利技术涉及治疗下肢缺血性疾病的干细胞治疗剂及其用途。一方面涉及细胞治疗组合物在制备用于治疗下肢缺血性疾病的药剂中的用途，所述细胞治疗组合物中包括：脐带间充质干细胞、氯化钠、和水。另一方面涉及包含如下组分的细胞治疗组合物：脐带间充质干细胞、氯化钠、和水。该细胞治疗组合物制法如下：将氯化钠等物料加入水中溶解，任选地对该溶液进行除菌，获得制剂的基质；将预先制得的间充质干细胞混悬于该基质中，分装，即得。本发明专利技术方法呈现如说明书所述优异技术效果，例如，本发明专利技术所得组合物在细胞复苏时呈现优良的细胞复苏性能，细胞经历复苏过程的活力以及复苏后细胞的存活稳定性方面，显著高于现有技术方案。

Stem cell therapeutics for the treatment of lower extremity ischemic diseases and its application

【技术实现步骤摘要】
治疗下肢缺血性疾病的干细胞治疗剂及其用途
本专利技术属于医药生物
，涉及治疗和/或预防急性和/或慢性下肢缺血性疾病的干细胞治疗剂，还涉及该干细胞治疗剂用于治疗和/或预防急性和/或慢性下肢缺血性疾病的用途，以及涉及将所述干细胞治疗剂用于治疗和/或预防急性和/或慢性下肢缺血性疾病方法。特别是涉及使用干细胞治疗下肢缺血性疾病的方法和组合物。
技术介绍
下肢缺血性疾病是一种常见疾病，严重影响病人的生活质量、肢体存活甚至危及生命。下肢缺血性疾病是指由各种原因导致的下肢动脉狭窄或闭塞、血流灌注不足，从而导致下肢出现间歇性跛行(intermittentclaudication，IC)、溃疡、坏疽等缺血表现的一类疾病。最常见的导致下肢缺血性疾病的原因是动脉硬化造成的下肢动脉硬化闭塞症(lowerextremitiesarteriosclerosisobliterans，LEAO)，除此之外还包括其他非动脉硬化性的原因，如下肢动脉栓塞、血栓闭塞性脉管炎、主动脉狭窄、下肢动脉肌纤维发育不良、大动脉炎、结节性多动脉炎，永存坐骨动脉、腘动脉压迫综合征、腘动脉外膜本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.细胞治疗组合物在制备用于治疗下肢缺血性疾病的药剂中的用途，所述细胞治疗组合物中包括：脐带间充质干细胞、磷脂酰丝氨酸、氯化钠、和水。/n

【技术特征摘要】
1.细胞治疗组合物在制备用于治疗下肢缺血性疾病的药剂中的用途，所述细胞治疗组合物中包括：脐带间充质干细胞、磷脂酰丝氨酸、氯化钠、和水。


2.根据权利要求1的用途，其特征在于：
所述磷脂酰丝氨酸的质量体积百分数为0.1％～0.3％；
所述磷脂酰丝氨酸的质量体积百分数为0.15％～0.25％；
所述磷脂酰丝氨酸的质量体积百分数为0.2％；
所述间充质干细胞的密度为2×107个/mL～5×107个/mL；
所述间充质干细胞的密度为3×107个/mL；
所述氯化钠的质量体积百分数为0.8％～1.0％；
所述氯化钠的质量体积百分数为0.9％。


3.根据权利要求1的用途，其特征在于：
其中还包含氯化镁；
所述氯化镁的质量体积百分数为0.05％～0.1％；
所述氯化镁的质量体积百分数为0.08％；
其中还包含乙二胺四乙酸钙钠；
所述乙二胺四乙酸钙钠的质量体积百分数为0.02％～0.05％；
所述乙二胺四乙酸钙钠的质量体积百分数为0.03％；
细胞治疗组合物中磷脂酰丝氨酸的质量体积百分数为0.1％、间充质干细胞的密度为3×107个/mL、氯化钠的质量体积百分数为0.9％；
细胞治疗组合物中磷脂酰丝氨酸的质量体积百分数为0.2％％、间充质干细胞的密度为5×107个/mL、氯化钠的质量体积百分数为0.9％；
细胞治疗组合物中磷脂酰丝氨酸的质量体积百分数为0.3％、间充质干细胞的密度为5×107个/mL、氯化钠的质量体积百分数为0.9％；
细胞治疗组合物中包含：脐带间充质干细胞4×107个/mL、磷脂酰丝氨酸0.2％、氯化钠0.9％、氯化镁0.08％、乙二胺四乙酸钙钠0.03％和注射用水；
细胞治疗组合物中包含：脐带间充质干细胞2×107个/mL、磷脂酰丝氨酸0.3％、氯化钠0.8％、氯化镁0.1％、乙二胺四乙酸钙钠0.02％和注射用水；
细胞治疗组合物中包含：脐带间充质干细胞5×107个/mL、磷脂酰丝氨酸0.1％、氯化钠1.0％、氯化镁0.05％、乙二胺四乙酸钙钠0.05％和注射用水；
细胞治疗组合物中包含：脐带间充质干细胞3×107个/mL、磷脂酰丝氨酸0.2％、氯化钠0.9％、氯化镁0.08％、乙二胺四乙酸钙钠0.04％和注射用水；
细胞治疗组合物中包含：脐带间充质干细胞3.5×107个/mL、磷脂酰丝氨酸0.25％、氯化钠0.9％、氯化镁0.075％、乙二胺四乙酸钙钠0.035％和注射用水；
所述间充质干细胞为原代～第十代的间充质干细胞；
所述的间充质干细胞的获取方法包括如下步骤：
(1)脐带组织贴壁处理：取细胞培养平皿，将组织块平铺于平皿中，每个平皿中的组织块数量维持在5-20块，使组织块风干2-50分钟直至组织贴在平皿上；
(2)脐带组织培养：沿平皿边缘慢慢加入间充质干细胞培养基至组织淹没即可；将平皿放进CO2浓度为5％的37℃培养箱进行培养，培养至第3-7天时将平皿从培养箱取出，补加适量间充质干细胞培养基；在第9-11天时将平皿中的培养基移出，加入适量新鲜的间充质干细胞培养基，继续培养；在第11-13天时清除所有脐带组织块并继续培养；此后每1-3天进行一次全换液；
(3)细胞传代：当平皿内的贴壁细胞融合率达到50-70％时，使用消化酶TrypLEExpress使贴壁细胞脱离平皿底部；离心，去除上清液，加入间充质干细胞培养基重新悬浮细胞，再接种于T25细胞培养瓶进行传代并进行扩增培养；此后每1-3天换液一次，直至融合率达到70-90％后，即得脐带间充质干细胞；必要时进行传代和/或在液氮中冻存以备用；必要时对所得间充质干细胞的以下项目中的一项或多项进行检测：细胞活性、细胞污染、遗传病、HLA-ABC/DR配型。


4.根据权利要求1的用途，其特征在于：
所述细胞治疗组合物是按照包括如下步骤的方法制备得到的：
将磷脂酰丝氨酸和氯化钠(以及任选的氯化镁和/或任选的乙二胺四乙酸钙钠)加入水中溶解，任选地对该溶液进行除菌，获得制剂的基质；
将预先制得的间充质干细胞混悬于该基质中，分装，即得，
进一步的，
所述细胞治疗组合物制备过程中，所述制剂的基质是通过选自下列的方式除菌的：过滤除菌、热压灭菌；
所述细胞治疗组合物制备过程是在无菌条件下进行的；
所述细胞治疗组合物制备过程中，在与间充质干细胞混和前所述基质的温度低于25℃；
所述细胞治疗组合物制备过程中，在温度低于25℃条件下将所述基质与间充质干细胞混和；
所述细胞治疗组合物制备过程中所述分装是将配制得到的细胞治疗组合物分装到预充注射器中，尤其是分装到一次性使用的预充注射器中；和/或
所述细胞治疗组合物制备过程中所述预充式注射器的针筒材质为高分子聚合物(例如聚丙烯)、活塞材质为橡胶。


5.用于治疗下肢缺血性疾病的细胞治疗组合物，该组合物中包括：脐带间充质干细胞、磷脂酰丝氨酸、氯化钠、和水。

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【专利技术属性】
技术研发人员：肖海蓉，许晓椿，刘冰，
申请(专利权)人：博雅干细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32