鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其标准图谱技术

本发明专利技术属于中药制剂分析领域，具体涉及一种复方中药鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其HPLC标准指纹图谱，该方法包括制备供试品溶液、确立HPLC色谱条件及制作HPLC标准指纹图谱。本发明专利技术同时公开了用该方法得到的鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱，该指纹图谱有20个共有峰。本发明专利技术质量检测方法操作简单、稳定性好、重现性高，所得指纹图谱特征峰多，通过标准指纹图谱共有峰的比较，可对鼻渊通窍颗粒的质量进行全面评价，有利于稳定产品质量，确保临床用药的安全性、有效性。

HPLC fingerprint of BiYuanTongQiao granules

【技术实现步骤摘要】
鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其标准图谱
本专利技术属于中药制剂分析领域，具体涉及一种复方中药鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其HPLC标准指纹图谱。技术背景鼻渊通窍颗粒产品处方由辛夷、苍耳子(炒)、麻黄、白芷、薄荷、藁本、黄芩、连翘、野菊花、天花粉、地黄、丹参、茯苓、甘草等十四味中药精致而成，具有疏风清热，宣肺通窍的功效。用于急鼻渊(急性鼻窦炎)属外邪犯肺证，症见前额或颧骨部压痛，鼻塞时作，流涕粘白或粘黄，或头痛，或发热，苔薄黄或白，脉浮。鼻渊通窍颗粒产品处方在中医治疗鼻病的古方-苍耳子散的基础上加味而成，本方中麻黄、白芷、苍耳子、辛夷、藁本辛温解表，宣肺通窍，其中白芷、苍耳子、辛夷、藁本为治鼻炎的要药，具有较好的改善鼻塞的作用；薄荷、野菊花疏散风热，抗菌抗病毒；天花粉、黄芩、连翘清热解毒、消肿排脓，减轻炎症；生地黄凉血解热毒；丹参活血化瘀，改善炎症部位的微循环；茯苓利水消肿，减少炎症渗出物(鼻涕)的生成，诸药配伍，共奏疏风清热、宣肺通窍、清热解毒、止痛排脓之功。鼻渊通窍颗粒于2003年获得新药证书(中药三类新药)和药品注册批件，为国内独家生产，具有处方、工艺、用途等核心技术的自主知识产权。目前在国内市场普遍用于急性鼻窦炎的长期治疗，临床应用表明其疗效确切，对治疗慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、中耳炎发挥了重要作用。在2015版《中华人民共和国药典》一部中新增鼻渊通窍颗粒质量控制方法主要包括鉴别和含量测定，鉴别项采用薄层层析法分别鉴别制剂中的辛夷、麻黄、白芷、黄芩、连翘和丹参药材，含量测定项以HPLC测定麻黄中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量。从处方组成可以发现，鼻渊通窍颗粒由辛夷、苍耳子(炒)、麻黄、白芷、薄荷、藁本、黄芩、连翘、野菊花、天花粉、地黄、丹参、茯苓、甘草14味中药制成，但其质量标准仅用薄层层析法鉴定其中6味原料药材，和以HPLC检测麻黄中的两个指标性成分的含量，以此来控制鼻渊通窍颗粒的质量不够全面、准确。中药指纹图谱作为一项质量控制技术，能够较为全面的控制药品的质量，具有系统性，整体性特点。目前，以指纹图谱控制鼻渊通窍颗粒的质量，国内外尚未见专利公开及文献报道。本专利技术公开了一种鼻渊通窍颗粒指纹图谱的建立方法，以及用该方法制作的鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱，在用相似度进行评价的情况下，可用其标准指纹图谱对鼻渊通窍颗粒的质量进行全面地评价和控制，从而保证了产品质量的稳定性及临床用药的有效性和安全性。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有鼻渊通窍颗粒质量控制方法的不足，提供一种鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及用该方法所得的HPLC标准指纹图谱。其特点是将鼻渊通窍颗粒制备成供试品溶液，经过HPLC分离检测，获得鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱，从而为鼻渊通窍颗粒的内在质量和真伪鉴别提供可靠依据。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的：一种鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：1)供试品溶液制备取鼻渊通窍颗粒，加入纯化水，超声处理，冷却，过滤，即得供试品溶液。2)HPLC色谱分析对步骤1)中得到的供试品溶液进行HPLC色谱分析，记录色谱图。3)标准指纹图谱制作优选地，步骤1)中超声处理时间为10-50min；步骤2)中HPLC色谱分析条件为：AgilentEdipseXDB-C18柱，流动相A为甲醇，流动相B为0.05％-0.2％磷酸溶液，采用梯度洗脱，检测波长310nm，流速1.0ml/min，柱温30℃。更优选地，步骤1)中超声处理时间为30min；步骤2)中流动相B为0.1％磷酸溶液。优选地，步骤2)所述梯度洗脱方法为：上述述鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》软件进行相似度评价。上述指纹图谱的获得为取10个或10个以上批次鼻渊通窍颗粒按步骤1)制备供试品，步骤2)进行HPLC色谱分析，步骤3)制作标准指纹图谱。上述标准指纹图谱有20个共有峰，所述峰的相对保留时间tR依次分别为：0.145，0.266，0.294，0.371，0.389，0.408，0.441，0.534，0.594，0.657，0.683，0.812，0.932，1.000，1.060，1.097，1.113，1.155，1.203，1.232。一种鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)供试品溶液制备取鼻渊通窍颗粒，加入纯化水，超声处理30min，冷却，过滤，即得供试品溶液。2)HPLC色谱分析，对步骤1)中得到的供试品溶液进行HPLC色谱分析，HPLC色谱分析条件为：AgilentEdipseXDB-C18柱，流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸溶液，采用梯度洗脱，检测波长310nm，流速1.0ml/min，柱温30℃。记录色谱图。3)标准指纹图谱制作按步骤2)中色谱条件对鼻渊通窍颗粒供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱。其中，步骤1)精密称取鼻渊通窍颗粒1.0g，置具塞锥形瓶中，准确加入25mL纯化水，超声30min，冷却，过滤，即得供试品溶液。所述样品的数量为6批次。与现有技术相比，本专利技术提供的技术方案具有如下优势：(1)本专利技术提供的鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱建立方法精密度高，重现性好，通过对比所得指纹图谱中共有峰的有无，可对鼻渊通窍颗粒的质量进行全过程评价，有效得保证了成品的质量，可克服现有技术检测指标的单一，不能反映内在质量的缺点。(2)本专利技术提供的色谱条件下的各特征色谱峰均实现了良好的基线分离，稳定性好、特征峰多，能全面、准确地评价鼻渊通窍颗粒的质量，适用于对鼻渊通窍颗粒真伪鉴别和产品质量的控制。附图说明图1为鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱(1-20为20个共有峰)；图2为12批鼻渊通窍颗粒的HPLC指纹图谱叠加图；具体实施例实施例1鼻渊通窍颗粒HPLC标准指纹图谱的建立1仪器与试药1.1仪器ThermoUltimate3000高效液相色谱仪(美国)：二极管阵列检测器，四元低压梯度泵，ChromeleonTM色谱工作站。1.2试药鼻渊通窍颗粒由山东新时代药业有限公司提供，见表1；甲醇为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。表1鼻渊通窍颗粒测试样品批号2方法与结果2.1色谱条件：色谱柱：AgilentEdipseXDB-C18(4.6×250mm，5μm)柱；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.05％磷酸水，按照下表进行梯度洗脱：检测波长：310nm；流速：1ml/min；柱温：30℃；进样量：10μL。2.2供试品溶液的制备：精密称取鼻渊通窍颗粒1.0g，置具塞锥形瓶中，准确本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱建立的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：/n1)供试品溶液制备/n取鼻渊通窍颗粒，加入纯化水，超声处理，冷却，过滤，即得供试品溶液；/n2)HPLC色谱分析/n对步骤1)中得到的供试品溶液进行HPLC色谱分析，记录色谱图；/n3)标准指纹图谱制作。/n

【技术特征摘要】
1.一种鼻渊通窍颗粒HPLC指纹图谱建立的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
1)供试品溶液制备
取鼻渊通窍颗粒，加入纯化水，超声处理，冷却，过滤，即得供试品溶液；
2)HPLC色谱分析
对步骤1)中得到的供试品溶液进行HPLC色谱分析，记录色谱图；
3)标准指纹图谱制作。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中超声处理时间为10-50min；步骤2)中HPLC色谱分析条件为：AgilentEdipseXDB-C18柱，流动相A为甲醇，流动相B为0.05％-0.2％磷酸溶液，采用梯度洗脱，检测波长310nm，流速1.0ml/min，柱温30℃。


3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中超声处理时间为30min；步骤2)中流动相B为0.1％磷酸溶液。


4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2)所述梯度洗脱方法为：





5.采用权利要求1-4中任一项所述方法建立的标准指纹图谱，其特征在于，所述标准指纹图谱有20个共有峰。


6.如权利要求5所述的标准指纹图谱，其特征在于，所述峰的相对保留时间tR依次分别为：0.145，0.266，0.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，梁红宝，朱祥霞，
申请(专利权)人：鲁南制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37