一种用于消除假阴性的寨卡病毒环介导恒温荧光检测引物组及试剂盒制造技术

本发明专利技术属于分子生物学检测技术领域，公开了一种用于消除假阴性的寨卡病毒环介导恒温荧光检测引物组及试剂盒，通过在检测的过程中同时设计一个内标检测，即通过检测引物和内标引物的共同使用，能够及时发现检测中的假阴性结果，可有效防止因假阴性检测结果引起各种事故，该内标检测及检测方法具有以下特点：1)内标基因与实际样品的检测在同一管中进行检测，2)该内标基因的扩增靶标与样品检测的扩增靶标部分相同，3)内标基因的扩增靶标的核酸浓度在该内标基因的检测线附近，可识别轻微的反应抑制。本发明专利技术具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、成本低、不需要昂贵仪器、适合现场检测等有益效果，更重要是该方法提高检测的准确性。

A primer set and kit for eliminating false negative Zika virus

【技术实现步骤摘要】
一种用于消除假阴性的寨卡病毒环介导恒温荧光检测引物组及试剂盒
本专利技术涉及分子生物学检测
，更具体的，涉及一种用于消除假阴性的寨卡病毒环介导恒温荧光检测引物组及试剂盒。
技术介绍
寨卡病毒(zikavirus，ZIKV)是经埃及伊蚊传播引起的一种自限性急性传染病，主要症状类似流感，表现为轻度发热、头痛、肌肉痛、关节痛、结膜炎以及皮肤斑疹等。研究表明寨卡病毒可造成小头症和格林-巴利综合征。目前，寨卡病毒病既无特异性的治疗药物，也无安全可靠的疫苗。寨卡病毒颗粒为圆球形，直径约40-70nm，具有包膜，表面有棘突。基因组全长10794bp，基因组的5′端及3′端各有一段非编码区(non-codingregion，NCR)、仅有一个开放的阅读框(ORF)。ORF共编码一个全长3419个氨基酸的多聚蛋白，经过编译的多聚蛋白被蛋白酶水解后，进一步裂解成三个病毒结构蛋白：衣壳蛋白(capsidvirus，C)、前膜蛋白(premembranceprotein，PrM)或膜蛋白(membranceprotein，M)、包膜蛋白(enve本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于消除假阴性的寨卡病毒环介导恒温荧光检测引物组，其特征在于，所述检测引物组包含外引物对NS5-F/NS5-B、内引物对NS5-FIP/NS5-BIP、环引物对NS5-LF/NS5-LB和内标引物NS5-P，所述外引物对、内引物对和环引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～6所示，所述内标引物NS5-P为含有荧光基因和淬灭基因的荧光探针，所述内标引物NS5-P的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于消除假阴性的寨卡病毒环介导恒温荧光检测引物组，其特征在于，所述检测引物组包含外引物对NS5-F/NS5-B、内引物对NS5-FIP/NS5-BIP、环引物对NS5-LF/NS5-LB和内标引物NS5-P，所述外引物对、内引物对和环引物对的核苷酸序列如SEQIDNO：1～6所示，所述内标引物NS5-P为含有荧光基因和淬灭基因的荧光探针，所述内标引物NS5-P的核苷酸序列如SEQIDNO：7所示。


2.一种寨卡病毒反转录环介导恒温荧光检测试剂盒，其特征在于，该检测试剂盒包括权利要求1或2所述的恒温荧光检测引物组。


3.根据权利要求3所述的寨卡病毒反转录环介导恒温荧光检测试剂盒，其特征在于，所述外引物对NS5-F/NS5-B、内引物对NS5-FIP/NS5-BIP、环引物对NS5-LF/NS5-LB的摩尔比为1～2：4～8：2～4。


4.根据权利要求4所述的寨卡病毒反转录环介导恒温荧光检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括DNA聚合酶、RNA反转录酶、内标、反应液、阳性对照和阴性对照。


5.根据权利要求5所述的寨卡病毒反转录环介导恒温荧光检测试剂盒，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张影，陈皇佑，高芳，刘美贤，
申请(专利权)人：广州迪澳生物科技有限公司，广州迪澳医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44