一种苗期快速鉴别水稻野败型雄性不育系和保持系的方法技术

本发明专利技术公开了一种水稻野败型雄性不育系和保持系鉴别的方法。该方法包括以下步骤：水稻野败型雄性不育系和保持系总DNA的提取—SCAR标记CHI03对不育系和保持系总DNA的PCR扩增—花粉染色鉴定—结果比较与分析。本方法率先将SCAR标记应用于水稻野败型雄性不育系和保持系的鉴定，实现了从线粒体DNA到总DNA检测的跨越，使得分子检测的操作更加简单方便，重复性和稳定性得到显著提高；相比于传统的田间鉴定，利用SCAR标记苗期鉴别野败型雄性不育系和恢复系，大大缩短了鉴定周期，对于提高野败型三系杂交水稻的制种纯度及加快推广应用具有重要意义。

A method for rapid identification of Wild Abortive male sterile lines and maintainer lines in Rice Seedling Stage

【技术实现步骤摘要】
一种苗期快速鉴别水稻野败型雄性不育系和保持系的方法
本专利技术属于水稻雄性不育系鉴别方法领域，具体涉及一种苗期快速鉴别水稻野败型雄性不育系和保持系的方法。
技术介绍
水稻是最重要的粮食作物之一，世界上约一半人口以稻米为主食，而我国则超过65％的人口以稻米为主食。过去40余年的实践证明，水稻杂种优势的利用是提高水稻单产的有效途径。目前，我国杂交水稻年种植面积约1600万hm2，占水稻种植总面积的53％左右，每年需生产杂交稻种子2.7亿kg。杂交水稻种植面积大，种子需求量巨大，而制种过程中往往出现机械混杂、生物学混杂，加之不法经营者的人为掺杂，导致杂交种的纯度和真实性受到严重影响。不育系混杂是引起三系杂交水稻退化的主要原因。若不育系中混杂有保持系，由于保持系的自交繁殖，不育系中保持系的含量将成数倍的增加。用混有保持系的不育系进行杂交水稻的制种，杂交后代中将出现大量的不育株，从而影响水稻杂种优势的发挥。由于不育系和保持系是同核异质体，株叶形态几乎完全一致，在水稻未抽穗开花前很难用肉眼进行鉴别。Hong等(2002)、Ichii等(2003)曾本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苗期快速鉴别水稻野败型雄性不育系和保持系的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：/n（1）总DNA提取：取水稻野败型雄性不育系和保持系幼苗进行总DNA提取；/n（2）PCR扩增：PCR反应混合物总体积15ml，包括0.105 U Taq酶，10ng总DNA，10×PCR缓冲液（10 mM Tris-HCl pH 8.3，1.5 mM MgCl

【技术特征摘要】
1.一种苗期快速鉴别水稻野败型雄性不育系和保持系的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）总DNA提取：取水稻野败型雄性不育系和保持系幼苗进行总DNA提取；
（2）PCR扩增：PCR反应混合物总体积15ml，包括0.105UTaq酶，10ng总DNA，10×PCR缓冲液（10mMTris-HClpH8.3，1.5mMMgCl2，50mMKCl，gelatin0.001%），0.2mM的dNTPs，0.4µM的引物，PCR反应在ThermalCycler2720热循环仪中进行；PCR反应热循环参数设置为：95℃预变性12分钟；94℃变性1分钟，65℃退火1分钟，72℃延伸2分钟，共进行30个循环；72℃延伸7分钟；扩增产物在1.5%的琼脂糖凝胶上进行电泳，溴化乙锭染色，凝胶成像系统中观察结果；
（3）结果分析：与DNAMa...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢超，唐小美，钟许成，朱益祥，江建华，任学祥，
申请(专利权)人：常德市农林科学研究院，安徽省农业科学院水稻研究所，安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所，
类型：发明
国别省市：湖南;43