α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体、合成方法及应用技术

本发明专利技术属于二聚体合成及应用技术领域，公开了一种α‑芋螺毒素Mr1.1的二聚体、合成方法及应用，α‑芋螺毒素Mr1.1二聚体的α‑芋螺毒素Mr1.1为多肽类化合物，其包含有两对二硫键，为I–III、II–IV连接方式，且C端酰胺化；氨基酸结构均用氨基酸的简写表示，两个半胱氨酸之间的连接表示其侧链之间形成的二硫键。本发明专利技术采取二聚化的方式合成Mr1.1二聚体，以提高对α9α10 nAChR的活性。α9α10 nAChR是与疼痛相关靶点，得到的α‑芋螺毒素Mr1.1的二聚体，能够作用于人源α9α10 nAChR；与野生型Mr1.1相比，活性提高了约46倍，有望开发出新的用于治疗疼痛的多肽类药物。

Dimer, synthesis and application of \u03b1 - conotoxin mr1.1

【技术实现步骤摘要】
α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体、合成方法及应用
本专利技术属于二聚体合成及应用
，尤其涉及一种α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体、合成方法及应用。
技术介绍
目前，最接近的现有技术：α9α10乙酰胆碱受体(nAChR)为近年来新发现的乙酰胆碱受体亚型之一，是治疗慢性疼痛的靶标，对外伤和化疗引起的疼痛具有明显作用。目前，特异性作用于α9α10nAChR的α-芋螺毒素为Vc1.1，RgIA和PeIA等。但是由于人体和老鼠体内α9α10nAChR的差异性，这些毒素在人体α9α10nAChR上的活性明显下降，不足以成药。Mr1.1是通过PCR对Conusmarmoreus的毒液管的cDNA序列进行扩增而得到的新的α-4/7芋螺毒素。CanPenget.al.的研究表明：Mr1.1能够特异性作用于老鼠α7nAChR，并在体内显示镇痛活性。Mr1.1是α9α10nAChR的特异性抑制剂，其靶向性远高于α7nAChR。Mr1.1对α9α10nAChR的抑制活性要大于Vc1.1和RgIA，为102.6±6.7nM。但是为发展成为镇痛药物，其对α9α10nAC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体，其特征在于，所述α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体的结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.一种α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体，其特征在于，所述α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体的结构式为：



α-芋螺毒素Mr1.1为多肽类化合物，其包含有两对二硫键，为I–III、II–IV连接方式，且C端酰胺化；氨基酸结构均用氨基酸的简写表示，两个半胱氨酸之间的连接表示其侧链之间形成的二硫键。


2.一种如权利要求1所述α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体的合成方法，其特征在于，所述α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体的合成方法包括以下步骤：
第一步，叠氮化Mr1.1的合成是通过在Mr1.1的N端引入叠氮九聚乙二醇羧酸完成；
第二步，linker的合成通过多肽固相合成以RinkAmide-MBHA树脂为载体，将GRRRRG偶联到树脂载体上；再将双Fmoc保护的赖氨酸偶联到甘氨酸的N端，通过20％哌啶脱除赖氨酸上主链和侧链上的Fmoc保护基，并与5-己炔酸偶联，合成含有两个炔基的linker的树脂肽；通过TFA:Tips：H2O＝90：5：5为切割条件，将多肽从树脂上切割，并脱去所有氨基酸侧链的保护基；液相分离纯化，冻干，得到目标linker；
第三步，Mr1.1二聚体的合成是通过叠氮化Mr1.1上的叠氮官能团和linker上的炔基发生click反应完成。


3.如权利要求2所述的α-芋螺毒素Mr1.1的二聚体的合成方法，其特征在于，所述第一步叠氮化Mr1.1肽的合成具体包括：
(1)通过多肽固相合成技术，以RinkAmide-MBHA树脂为载体，将Mr1.1的C端连接到树脂载体上；以四当量的Fmoc保护的氨基酸为原料，四当量的HCTU和八当量的DIEA为缩合试剂，室温反应1h为缩合条件实现氨基酸的偶联；
(2)以20％的哌啶为Fmoc脱除条件脱去Fmoc保护基，进行下一个氨基酸的偶联，以此重复，实现野生型Mr1.1树脂肽的合成；
(3)在实现Mr1.1...

【专利技术属性】
技术研发人员：于日磊，梁家珍，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：山东;37